Chapitre 4 - Nutrition et culture des cellules bactériennes (partie 3) Flashcards
Efficacité de la stérilisation par la chaleur est influencée par….
1) Température
2) Durée
3) humidité
4) Nombre et état des microorganismes (endospores vs cellules végétatives)
Vrai ou faux : la chaleur est extrement efficace pour stériliser un environnement/instruments
Vrai
Vrai ou faux : le micro-onde est un bon moyen de produire de la chaleur pour stériliser
Faux (utiliser plutôt une cuisinière)
Qui suis-je : appareil utilisé pour faire une stérélisation à la vapeur
Autoclave
Pourquoi est-ce qu’il faut utiliser un autoclave lors de la stérélisation à la vapeur?
Destruction des endospores bactériennes par la chaleur humide doit être faite à des températures supérieures à 100 degrés
Température et pression désirée dans un autoclave
T = 121 degrés Pression = 1 bar = 103 kPa = 1kg/cm2
Vrai ou faux : plus le volume à stéréliser est grand, moins cela va prendre de temps si on utilise un autoclave
Faux, temsp proportionnel au volume
Expliquer le principe d’un autoclave
1) Eau bouillie pour produire de la vapeur qui sera libérér dans la chambre de l’autoclave
2) L’air présent initialement dans la chambre est complétement chassée jusqu’elle soit remplie de vapeur saturée
3) Fermeture des échappements
4) Vapeur saturée chaude continue d’entrer jusqu’à ce qu’on atteigne la pression + T désirée (121 et 1kg/cm2)
Qui suis-je : moyen utilisé pour stériliser la verrerie, pipettes, objets de métal
Four à air chaud (four Pasteur)
Température et temps nécessaire dans un Four Pasteur
160-170 degrés pendant 2-3h
Qui suis-je : l’autoclave sert à stéréliser ces milieux de culture
1) milieux de culture ayant des liquides thermorésistants
2) Conserve
Nommer les deux types de radiations utilisées comme moyen de stérilisation
Radiations ionisantes (y) + Radiations UV
Vrai ou faux : les rayons UV sont pénétrants
Faux
Vrai ou faux : les radiations inonisantes détruisent les endospores bactériennes et toutes les cellules microbiennes
Vrai
Vrai ou faux : les radiations ionisantes sont toujours efficaces contre les virus
Faux
Nommer ce qu’on peut stéréliser avec la technique de radiation ionisante
1) Objets thermosensible à usage unique
2) Conserves, épices
Nommer ce qu’on peut stéréliser avec des rayons U.V.
Surfaces (enceintes stériles, usine de traitement d’eau)
Si on veut stéréliser des liquides thermosensibles, comme du sérum, des vitamines ou des antibiotiques, quelle méthode devrait être utilisée?
Filtration
Type de filtre utilisé pour la filtration et la taille des porosités
Filtres de nitrocellulose
Porosité = 0.22-0.45 u
Qui suis-je : organisme retenu lors de la filtration
Bactérie
La technique de filtration permet de retenir les bactéries, mais laisse passer les virus. Comment obtient-on un milieu qui est tout de même stérile?
Virus ont besoin d’une cellule hôte pour vivre (donc même si passe, ne vont pas survivre et risque d’être dégradés par enzymes)
Expliquer le principe de la filtration
Un liquide à stéréliser est pompé à travers une membrane filtrante dans un récipient stérile.
Nommer deux types de gaz stérélisants
1) Oxyde d’éthylène
2) Ozone (neurotoxique)
Quel moyen devrait-être utilisé pour stéréliser des instruments chirurgicaux?
Gaz stérélisants
Pourquoi est-ce que l’oxyde d’éthylène est un agent stérélisant particulièrement efficace?
Pénètre rapidement les matériaux d’emballage
Où a lieu la stérélisation par gaz stérélisants?
Enceintes hermétiques
Pourquoi est-ce que la stérélisation est essentielle?
Pour être certain d’avoir une culture pure (donc seulement les organismes qu’on veut étudier)
Nommer les moyens de stérélisations
1) Chaleur ( flamme, chaleur sèche = four et chaleur humide = autoclave)
2) Radiations ionisantes (rayon y et rayon uv)
3) Filtration
4) Substances chimiques (gaz stérélisants)
Qui suis-je : moyen de stérélisation où les installations sont des parois couvertes de plomb
Rayon y
Qui suis-je : méthode permettant d’augmenter la proportion du microorganismes d’intérêt dans l’échantillon
Enrichissement
Nommer les trois natures des méthodes d’enrichissement
Chimiques, physiques et biologiques
Que doivent prendre en considération les méthodes d’enrichissement?
1) proportion de l’espèce d’intérêt
2) vitesse de croissance
3) caractéristiques spécifiques/discriminantes
Principe de la méthode chimique d’enrichissement par les nutriments
Identifier un nutriment ou une source d’énergie qui va favoriser l’organisme qui nous intéresse et qui est peu utilisé par les autres organismes présents
Un chercheur étudie un microorganisme autotrophe présent dans un milieu de culture très diversifié. Comment peut-il procéder s’il veut enrichir de façon chimique seulement ce microorganisme?
Organismes qui sont autotrophes = capable de fixer le CO2 et produire leur propre matière organique = établir un milieu de culture qui contient aucune source de carbone et s’assurer qu’il y a du CO2 ds le gaz environnant ou des carbonates = seuls les organismes autotrophes vont croitre
Nommer les trois méthodes chimiques permettant de faire de l’enrichissement
1) Nutriments ou sources d’énergie particulière pour un organisme
2) Milieu dilué
3) Substances inhibitrices
Expliquer le principe derrière l’utilisation d’un milieu dilué pour enrichir la population d’un certain microorganisme
Diminuer les nutriments qui sont cruciaux pour certains organismes
Expliquer comment est-ce qu’on pourrait enrichir une population de Caulobacter à l’aide d’une méthode chimique
On pourrait élaborer un milieu de culture qui est dilué. Caulobacter = vivent dans des milieux oligotrophes donc on pourrait réduire la disponibilité en nutriments
Nommer trois types de substances inhibitrices pouvant être utilisées pour enrichir une population
1) Colorants
2) Alcool phényléthylique
3) Sels biliaires
Vrai ou faux : Si on met du violet de cristal dans une population, seules bactéries Gram + vont croitre
Faux, seules les Gram -
Qui suis-je : substance inhibant la croissance des bactéries Gram -
Alcool phényléthylique
Nommer une façon d’éliminer d’un échantillon toutes les bactéries sauf celles d’origine intestinale
On peut ajouter des sels biliaires au milieu
Expliquer l’effet des sels biliaires sur les bactéries
Sels biliaires ont pour effet de désorganiser les membranes sauf pour les bactéries entériques
On veut enrichir une bactérie Gram - résistante aux sels biliaires, mais elle est présente dans une culture mixte. Comment peut-on procéder?
Ajout sels biliaires + violet cristal
Exemple de sel biliaire
Désoxycholate de Na
À quoi sert le milieu MacConkey?
Permet d’isoler et d’identifier des bactéries Gram -, entériques et fermettant le lactose
Expliquer le principe du milieu MacConkey
On met une culture bactérienne dans un milieu avec, entre autres, des sels biliaires, du cristal violet, du lactose et du rouge neutre.
1) Cristal violet élimine les Gr+
2) Sels biliaires éliminent les bactéries non-entériques
3) Bactéries qui fermentent le lactose vont produire de l’acide
4) S’il y a fermentation de lactose = rouge enutre précipite à pH acide = production de pigments rouges dans la colonie
Qu’arrive-t-il s’il y a croissance dans un milieu MacConkey, mais absence de fermentation?
Absence de pigments rouges
Nommer les quatre méthodes physiques permettant d’enrichir une population
1) Traitement à la chaleur
2) Dessication
3) Température d’incubation
4) Taille cellulaire
Un microbiologiste veut enrichir une certaine population de cellules formant des endospores dans un milieu mixte. Comment devrait-il procéder?
Exposer le milieu à une forte chaleur (ex; 80 degrés) pendant une certaine période de temps (ex :10 minutes) = toutes cellules végétatives vont mourir sauf endospores
Un microbiologiste veut mettre en évidence les Streptomyces de sa culture mixte. Comment devrait-il procéder?
Mettre l’échantillon dans un dessicant pendant 10 jours : dessicant va absorber l’eau donc le milieu va devenir sec = seuls les streptomyces vont survivre
Pourquoi utilise-t-on la température d’incubation comme méthode d’enrichissement?
Pour enrichir des bactéries thermophiles ou psychrotrophes
Expliquer la méthode d’enrichissement à l’aide d’un filtre 0,22u
Certaines espèces sont capables de passer à travers un filtre de 0,22 u (si on veut les conserver, doit travailler ds un environnement anaérobique)
Si certaines bactéries sont capables de passer à travers un filtre de 0,22 u, comment se fait-il que ce même filtre est utilisé comme moyen de stérélisation?
Bactéries qui passent à travers un filtre de 0,22u ne survivent pas ds un milieu aérobique
Nommer les deux méthodes biologiques utilisées pour enrichir une certaine population d’une culture
1) Pathogénicité
2) Symbiose
Qui suis-je : méthode d’enrichissement biologique ayant pour but de créer une infection expérimentale pour augmenter une certaine culture
Pathogénicité
Qui suis-je : méthode d’enrichissement consistant à augmenter la proportion d’une certaine culture en faisant une symbiose expérimentale
Symbiose
