Chapitre 2 - Observations microscopiques des microorganismes (Partie 1)

Question 1

Nommer les deux types de microscopes possible

Answer 1

• Microscope photonique(optique)

- Microscope électronique

Question 2

Quel type de microscope utilise la lumière pour fonctionner?

Answer 2

Microscope photonique(optique)

Question 3

Quel type de microscope utilise des électrons pour fonctionner?

Answer 3

Microscope électronique

Question 4

Si quelqu’un veut observer des bactéries, quel microscope est favorisé?

Answer 4

Microscope photonique(optique), car sert pour les organismes de ‘‘plus grande taille’’

Question 5

Si quelqu’un veut observer des virus, quel microscope est favorisé?

Answer 5

Microscope électronique, car sert pour les organismes très petits

Question 6

Vrai ou faux : les microscopes photoniques permettent d’avoir des longueurs d’onde beaucoup plus petites, ce qui permet d’agrandir les images de beaucoup sans perdre la résolution

Answer 6

Faux, microscope électronique

Question 7

Si quelqu’un veut agrandir énormément une image tout en gardant une bonne qualité, quel microscope devrait-il favoriser?

Answer 7

microscope électronique

Question 8

Nommer les trois composantes du microscope photonique

Answer 8

• Condensateur
• Objectif
• Oculaire

Question 9

Fonction du condensateur dans un microscope photonique

Answer 9

Pour moduler faisceau de photons

Question 10

Fonction de l’oculaire dans un miscroscope photonique

Answer 10

Agrandir foyer de l’image

Question 11

Formule du grandissement

Answer 11

Objectif X Oculaire

Question 12

Définir la limite de résolution

Answer 12

Distance minimale entre deux points qui peuvent être perçus comme étant distincts

Question 13

Longueurs d’ondes visibles par l’humain

Answer 13

400 à 700 nm

Question 14

Longueurs d’ondes ultraviolet

Answer 14

180 à 400 nm

Question 15

Pourquoi est-il intéressant d’utiliser un verre opaque aux UV, par exemple du quartz, dans un microscope photonique?

Answer 15

Car cela permet de diminuer lamda donc le facteur de résolution aussi

Question 16

Donner un avantage et un inconvénient d’utiliser un verre opaque aux UV comme le quartz dans un microscope photonique

Answer 16

Avantage : permet de diminuer le facteur de résolution
Désavantage : besoin de transformation optique pour pouvoir observer (car extérieur du visible) = perd l’avantage d’utiliser UV

Question 17

Donner l’avantage d’utiliser l’huile d’immersion en microscopie photonique

Answer 17

Aucune lentille dans l’air ne peut avoir une ouverture numérique supérieure à 1,00 = utilisation huile d’immersion qui a le même indice de réfraction que le verre = pénétration des rayons lumineux qui ne pénétraient pas dans l’objectif à cause de la réflexion et de la réfraction = augmentation de l’ouverture numérique et de la résolution

Question 18

Qui suis-je : mesure de combien une substance ralentit la vitesse de la lumière

Answer 18

Indice de réfraction

Question 19

Vrai ou faux : Une lentille ayant une distance focale courte agrandit plus un objet qu’une lentille dont la distance focale est plus grande

Answer 19

Vrai

Question 20

Qui suis-je : distance entre le centre de la lentille et le foyer

Answer 20

Distance focale

Question 21

Expliquer pourquoi on cherche à avoir une limite de résolution la plus petite possible

Answer 21

Plus L.R. est petit, plus la résolution augmente et plus des détails fins peuvent être discernés dans un échantillon

Question 22

Nommer deux façons de diminuer la limite de résolution

Answer 22

1) Diminuer la longueur d’onde

2) Augmenter l’ouverture numérique

Question 23

Distance minimale à laquelle un microscope optique permet de distinguer deux points séparés

Answer 23

0,2um

Question 24

Nommer une conséquence résultant de la distance minimale à laquelle un microscope optique permet de distinguer deux points séparés

Answer 24

Grande majorité des virus ne peut pas être observée à l’aide d’un microscope optique

Question 25

Nommer une limite propre au microscope à fond clair

Answer 25

Contraste

Question 26

Qui suis-je : capacité de distinguer une structure de son environnement

Answer 26

Contraste

Question 27

Pourquoi est-ce que le contraste dans un microscope à fond clair est-il très bas?

Answer 27

Car on observe les microorganismes dans leur état

Question 28

Vrai ou faux : il est plus facile d’observer des microorganismes de petites tailles avec un microscope à fond clair que des microorganismes à grande taille

Answer 28

Faux, grande taille + facile

Question 29

Nommer une façon d’augmenter le contraste

Answer 29

Coloration

Question 30

Nommer les trois types de microscope optique permettant d’observer des microorganismes vivants tout en ayant une image claire et détaillée

Answer 30

Microscope à fond noir, microscope à contraste de phase et microscope à contraste d’interférence différentielle

Question 31

Nommer les désavantages de la technique de coloration

Answer 31

• Peu de colorants vitaux

- Exigent fixation + coloration

Question 32

Désavantage de la fixation lors de la coloration

Answer 32

fixation implique que les microorganismes sont morts = donc obs. microorganismes morts

Question 33

Qui suis-je : microscope utilisant un cône creux de lumière dirigé vers l’échantillon de sorte que les rayons non réfléchis et non réfractés n’entrent pas dans l’objectif

Answer 33

Microscope à fond noir

Question 34

Qui suis-je : microscope utilisant un condensateur de Abbé et un éclairage oblique

Answer 34

Microscope à fond noir

Question 35

Vrai ou faux : dans un microscope à fond noir, les cellules sont mortes

Answer 35

Faux, vivantes

Question 36

Nommer les deux types d’ondes lumineuses qui passent à travers une préparation humide

Answer 36

1) ondes déviées qui interagissent avec les structures cellulaires
2) ondes non déviées passant autour et dans la cellule sans intéragir avec elle

Question 37

Expliquer le principe d’un microscope à contraste de phase

Answer 37

1) bactéries sont mises dans une préparation humide
2) Deux types d’ondes lumineuses passent à travers une préparation humide = crée un phénomène de déphasage
3) Peut créer différentes intensités lumineuses

Question 38

Dans un microscope à contraste de phase, quelle lumière est généralement non déviée?déviée?

Answer 38

Non déviée = environnement

Déviée = bactérie

Question 39

Utilisations courantes des microscopes à fond clair

Answer 39

• Mobilité microbienne
• Déterminer la forme des cellules vivantes
• Détecter des constituants bactériens (ex. endopore)
• Bcp utilisé pour l’étude des cellules eucaryotes

Question 40

Qui suis-je : type de microscope ayant un système de lentilles polarisantes contrôlées par informatique et donnant des images colorées grâce à une modification de la polarisation

Answer 40

Microscope à contraste d’interférence différentielle

Question 41

Différence entre les microscopes optiques et les microscopes à fluorescence

Answer 41

Microscopes optiques = forment une image à partir de la lumière qui passent à travers un échantillon

Microscopes à fluorescence = image vue parce que l’objet émet de la lumière

Question 42

Expliquer le fonctionnement d’un microscope à fluorescence

Answer 42

Voir feuille

Question 43

Utilité des fluorochromes vitaux

Answer 43

Permettent de faire la distinction entre des cellules vivantes et mortes (colorations différentes)

Question 44

Expliquer comment il est possible de différencier structurellement les cellules vivantes de celles mortes grâce aux fluorochromes vitaux

Answer 44

Cellules vivantes = exclusion par la membrane cytoplasmique

cellules mortes = membrane cytoplasmique perméable

Question 45

Nommer une application de la microscopie à fluorescence

Answer 45

• Immunofluorescence (anticorps spécifiques)

Question 46

Expliquer le principe d’immunofluorescence

Answer 46

1) Anticorps spécifiques à une protéine/organisme
2) Couplage anticorps-fluorochromes
3) S’il y a reconnaisance = fluorescence si non anticorps va être éliminé

Question 47

Nommer une technique utilisée par les microbiologistes pour dénombrer dans un échantillon un genre spécifique ou un type particulier de microorganisme

Answer 47

FISH (hybridation fluorescente in situ)

Question 48

Nommer deux limitations à la technique FISH

Answer 48

• Spécificité

- Diffusion de la sonde

Question 49

Qui suis-je : processus par lequel les structures internes et externes des cellules et des organismes sont conservées et fixées en place

Answer 49

Fixation

Question 50

Nommer les deux propritétés communes des colorants utilisés pour visualiser les microorganismes

Answer 50

• Colorent grâce à la présence de groupements chromophores possédant des liaisons conjuguées
• Peuvent se lier aux cellules par interaction ionique, covalente ou hydrophobe

Question 51

Qui suis-je : coloration dont le but est de couvrir le frotti de colorant afin de déterminer la taille, la forme et l’arrangement des cellules

Answer 51

Coloration simple

Question 52

Nommer les sortes de colorants fréquemment utilisés pour une coloration simple

Answer 52

• Bleu de méthylène

- Cristal violet

Question 53

Expliquer le principe de coloration négative

Answer 53

Coloration négative = fond coloré,mais pas la cellule

Question 54

Expliquer les étapes de la coloration de Gram

Answer 54

1) Cristal violet puis rincer à l’eau
2) iode puis rincer à l’eau
3) Alcool dénaturant puis rincer à l’eau (Gram + = violettes et Gram - = incolores)
4) Safranine (contre-colorant), rincer à l’eau puis sécher (Gram + = violettes et Gram - = rouges)

Question 55

À quoi sert l’iode dans le coloration de Gram?

Answer 55

Sert de mordant : substance qui facilite les interactions entre les cellules et le colorant pour que les cellules soit plus fortement colorées

Question 56

À quoi sert l’alcool dans la coloration de Gram?

Answer 56

Sert de dénaturant : permet de décoloré le frotti et engendrer l’aspect différentiel de la coloration de Gram

Question 57

Type de coloration différentielle utilisée pour les mycobactéries comme la lèpre et la tuberculose

Answer 57

Coloration alcoolo-acido résistance

Question 58

Qui suis-je : contre-colorant utilisé dans la coloration de Gram

Answer 58

Safranine

Question 59

Nommer 3 types de coloration différentielle

Answer 59

• Coloration de Gram
• Coloration alcoolo-acido résistance
• Coloration des structures (endospores,capsules,flagelles et corps d’inclusion)

Question 60

Qui suis-je : type de coloration différentielle utilisant la capacité des bactéries à retenir du cabrol-Fuchsine

Answer 60

Coloration par alcool-acido résistance