BASE MOL DU DEV EMBRYONNAIRE PART 2 Flashcards
Action moléculaire de Wnt
Wnt possède 2 récepteurs (Frizzled et LRP). En fonction de son adhésion à ces derniers, β-cat pourra migrer dans le noyau…
Sans Wnt β-cat
part 1
β-cat phosphorylée -> séquestration dans le cytoplasme
elle est immobilisée avec une vingtaine de protéines, dont APC, Axin, GSK3β. Cela induit un signal d’ubiquitination qui induit la dégradation de la ß-caténine.
Sans Wnt ß-cat
part 2
De plus, on a des protéines, dont Groucho, qui occupent la séquence d’ADN à laquelle la β-cat se lie, elles répriment ainsi l’expression du gène cible de la β-caténine
Avec Wnt ß-Cat
Wnt s’associe à Frizzled et LRP. La
liaison induit une dissociation de CKIα, GSK, Axin => libération de la β-caténine déphosphorylée
Une protéine Dsh (Dishevelled) va être capable de favoriser la libération de la β-caténine.
La migration de β-cat dans le noyau induit la transcription de nombreuses
protéines dont Chordin
Action Lithium
-> les sels de lithium, est un oligoélément pouvant induire une hyperdorsalisation.
-> inhibe GSK3 qui, en l’absence de ligand, séquestre β-cat dans le cytoplasme en la maintenant phosphorylée
=> libère ainsi une grande quantité de β-
cat qui rejoint le noyau
=> induit donc la neurulation.
Lithium autre propriété
L’excès d’UV détruit les cellules et empêche la dorsalisation des embryons.
xposés aux UV puis traités au lithium => restauration dorsalisation
Action BMP4
BMP4, est une protéine impliquée dans la morphogenèse des os. Elle se lie à son récepteur (protéine à activité sérine thréonine kinase), induisant une phosphorylation de R-Smad, qui peut à son tour interagir avec Co-Smad pour in fine
inhiber les gènes de différenciation nerveuse, et activer la différenciation en épiderme à
la place.
tissus epidermique et nerveux
Le tissu épidermique et le tissu nerveux dérive du même feuillet embryologique primaire : l’ectoderme. C’est donc la modification de l’expression des molécules qui va conditionner la différenciation.
Chordin et BMP4
Chordin va séquestrer BMP4 par une interaction protéine-protéine sur des résidus cystéines (responsable de pont-disulfure) de BMP4. Le complexe BMP4-
Chordin ne peut plus aller sur le récepteur à BMP4 : il y a donc inhibition de son action
Chordin induit donc une dorsalisation.
BMP autre fonction dans dev
BMP4 (associé à d’autres signaux) permet d’induire la différenciation en cellules du cartilage (chondrocytes). Le KO des récepteurs BMP (ou Hoxa10) conduit à des développements anormaux du squelette
Hippocampe =
L’hippocampe est une région du cerveau impliquée dans la mémoire et
l’apprentissage.
BMP autre utilise chez l’adulte
exp
On fait courir des souris chaque jour, et on les euthanasie. On quantifie (par
Western Blot) BMP4 et Noggin dans leur hippocampe
BMP autre utilise chez l’adulte
exp
observation
On constate que les souris qui ont couru le plus de jours ont une apparition de PCNA, une augmentation de Noggin et une diminution de BMP4 dans l’hippocampe.
BMP autre utilise chez l’adulte
exp
conclu
On peut donc supposer qu’il y a plus de neurones qui apparaissent chez ces
animaux entraînés
BMP4 s’exprime dans l’hippocampe dans la mesure où c’est un frein au
développement neuronal. Lorsque les souris courent, Noggin augmente pour empêcher BMP4 d’agir, et ainsi créer des neurones (à partir de cellules souches neuronales). Il y a donc une neurogenèse adulte induite par Noggin
dev muscle squelettique
Dérivent d’un feuillet embryonnaire appelé le mésoderme.
On observe :
-> une phase de prolifération qui permet la production de myocytes primaires.
-> une phase de différenciation qui permet la différenciation en myocytes secondaire qui donnera in fine des fibres musculaire.
Muscle marqueur
Il existe beaucoup de marqueurs de différenciation dans ce tissu, ce
qui rend son étude plus facile. Ces molécules sont caractéristiques des cellules musculaires et sont des outils très utiles, car quand une cellule exprime un marqueur de différenciation c’est qu’elle se différencie
Ces cellules ne s’expriment pas au même moment du développement, il y des marqueurs précoces ou tardifs, et certains sont transitoire
Signaux proliférateurs
Les signaux proliférateurs correspondent à des molécules qui permettent aux cellules
de proliférer en leur présence.
FGF6 exp
On permet l’expression de FGF6 dans la lignée de C2C12 en injectant dans les cellules l’ARNm qui code pour FGF6
FGF6 observation
On voit que plus on cultive les cellules
longtemps, plus on a de FGF6
Les cellules qui expriment en permanence FGF6, vont rester à l’état indifférencié et prolifére
FGF6 conclu
FGF6 envoie des signaux proliférateurs
FGF6 + ARNm
Les ARNm (MyoD, Myf5, myog) On mesure les ARNm par PCR quantitative en temps réel pour voir l'expression des marqueurs. On constate alors que lorsque les cellules expriment FGF6, il y a significativement moins de facteurs de différenciation musculaire
FGF6 + prot
Les protéines (MyoD, Myf5, myog) On observe par western blot que les cellules qui expriment F6 ont une diminution de la quantité de protéines impliquées dans la différenciation musculaire (MyoD et myog ont presque disparu, et Myf5 a beaucoup diminué)
Prot + inhibiteur FGF6
De plus, en présence de SU5402 (inhibiteur de FGF6), on constate une inhibition de FGF6. Les cellules se différencient donc en cellules musculaires.
Mdr1
Mdr1, une protéine de 1280 AA qui hydrolyse l’ATP et régule l’entrée de molécule dans la cellule (transporteur de la famille des ABC, ATP-Binding Cassette).
Mdr1 + FGF6
Il semblerai que FGF6 ai des effets sur la synthèse de Mdr1
On fait donc une qRT-PCR pour étudier cette relation.
On voit donc que FGF6 stimule la
synthèse de Mdr1
Conclu FGF6
Le rôle physiologique de Mdr1 n’est pas encore clairement identifié : il pourrait protéger les cellules de l’apoptose (mort cellulaire programmée) et ainsi assurer le maintien de la prolifération. Donc FGF6 pourrait passer par cette molécule pour exprimer son effet durant la prolifération
