BASE MOL DU DEV EMBRYONNAIRE Flashcards
Xenope cest quoi diametre 2 caracteristique peut etre utilise quand
Xénope, un batracien
diamètre d’environ 0,9 mm (ce qui est assez gros)
bicolore.
monospermique
Il peut être utilisé :
- au stade d’ovocyte immature bloqué en prophase I de
méiose.
- au stade d’ovocyte mature bloqué en métaphase II où
il est fécondable et un point blanc apparait sur la
surface de l’ovocyte
Xenope different pole
La partie claire, appelée « pôle végétal/végétatif » et la partie sombre, appelée « pôle animal ». Les réserves vitellines se situent au niveau du pôle végétal et le noyau au niveau du pôle animal.
dev
segmentation
premières divisions du développement embryonnaire, pas de changement de volume de l’embryon
- stade morula
- puis le stade blastula : fragmenté, obtenu à partir du moment où on ne peut plus compter les nombre de cellules
dev
gastrulation
-> formation d’une cavité : le blastocèle
-> mise en place des 3 feuillets : l’ectoderme (c’est le tissu le plus externe de l’embryon, et une partie deviendra le neurectoderme), le mésoderme (le tissu intermédiaire à l’origine du squelette et des muscles) et l’endoderme
(le feuillet le plus interne, à l’origine du système digestif, se développe
niveau ventral).
dev neurulation
-> mouvements des territoires embryologiques les uns face aux autres pour donner
naissance à l’apparition de la plaque neurale
-> l’embryon ressemble de plus en plus au tétard
-> différenciation d’un tube nerveux au niveau dorsal
-> apparition d’un futur système nerveux → future moelle épinière et cerveau
la fécondation
Le point d’impact du spermatozoïde est la première étape majeure dans le développement du xénope.
-> rotation d’environ 30° du cytoplasme à la superficie de l’œuf fécondé. Il apparaît alors une structure nommée « croissant gris » à l’opposé de
cet impact = la future
région dorsale. A son opposé, se trouve la future région ventrale (= point d’entrée du
spermatozoïde). On a ainsi l’établissement d’un nouvel axe (ou polarité) dorso-ventral
Quel impact croissant gris
exp 1 : on répartit équitablement le
croissant gris entre les deux blastomères =
séparation symétrique
On a des embryons jumeaux. Les deux embryons
se développent normalement
Quel impact croissant gris
exp 2
Séparation non symétrique des deux cellules, en
laissant le croissant gris en entier dans une seule
cellule, on limite la diffusion des substances.
On a un embryon normal et une « belly piece », (« pièce ventralisée ») où il n’y a
que des cellules épidermiques,
mésenchymateuses et endodermiques.
conclusion croissant gris
En l’absence de croissant gris, on n’a pas d’axe dorso-ventral, ni de système nerveux
→ ventralisation de la totalité de l’embryon.
centre de Newkoop
qu’est qu’on fait en gros
On prélève le centre de Newkoop d’un embryon
donneur pour l’implanter au niveau du pôle végétatif ventral de l’embryon receveur.
observation centre Newkoop
On obtient alors un embryon double qui se dorsalise du côté ventral, avec le développement du système nerveux dans une région où il ne se passe normalement rien. Les xénopes obtenus ne seront pas viables mais leur système nerveux se développe et donne un têtard à deux cerveaux, deux moelles
épinières, deux systèmes oculaires (qui dérivent du
système nerveux). On obtient
des siamois.
conclu cellule newkoop
Les cellules de Newkoop comprennent des informations qui peuvent être envoyées aux cellules voisines, et conditionnent l’apparition de neurones puis la différenciation en tissus nerveux : elles sont dorsalisantes
Transmission des msg de dvpmt
generalité
Les cellules « émettrices » vont envoyer aux cellules voisines une information spécifique (sous forme de protéine par exemple) en la sécrétant. En face, la cellule « réceptrice » doit être en mesure de recevoir l’information et de la comprendre
Transmission des msg de dvpmt
quand ca se passe pas
S’il n’y a pas de récepteur à la molécule, il n’y aura pas d’effet. De même, il peut y avoir des récepteurs, s’il n’y a pas d’émission du message, rien ne se passe non plus
3 effets messages
-> Prolifération : rester une cellule souche et continuer à proliférer sans se différencier
-> Différenciation : orienter la différenciation d’une cellule souche vers un type cellulaire (ex : cellules musculaires)
-> Sécrétion d’un message (protéine) informatif (spécifique des protéines du
développement).
molécule de signalisation (inductrice)
EGF (Epithelial Growth Factor)
VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor) :
IGF (Insulin-like Growth Factor) : joue un role un peu partout
NGF : différenciation des cellules nerveuses TGFβ (Nerve et Transforming Growth Factors) : si par exemple vous avez des cellules souches qui peuvent se transformer en cellules nerveuses.
facteur de transcription
protéines qui aboutissent à la fabrication des autres
ligand lier à son récepteur, il y a création d’un facteur de transcription ou activation d’un facteur de transcription déjà existant dans la cellule
conduit à l’activation de la synthèse
de l’ADN et dans un second temps de l’expression de la protéine d’intérêt
permettre, la prolifération, la différenciation ou envoyer un message par exocytose.
mise en place axe dorso-ventral
dorsalisation ou neurulation def
La dorsalisation ou neurulation de l’embryon correspond à l’allongement suivant l’axe antéro-postérieur, puis à la mise en place de l’axe dorso-ventral. Il s’agit donc de comprendre pourquoi la moelle épinière est du côté dorsal et non du côté ventral
Tsh3
generalité
XTsh3(chez Xenope)
elle possède un doigt de zinc ce qui lui confère une structure particulière et un domaine typique des protéines de biologie
du développement qui lui permet de se lier à l’ADN
Exp Tsh3
sonde fluorescente d’ADN monocaténaire
par hybridation, cette sonde va reconnaître l’ARNm de la molécule d’intérêt, ici Tsh3
Si on voit apparaitre des points de fluorescence, cela veut dire que l’ARNm est présent, cela nous permet donc de le localiser.
Observation exp Tsh3
Après hybridation in situ de XTsh3, on voit que le marquage est localisé
uniquement dans la région dorsale
Conclusion exp Tsh3
Tsh3 doit alors être un bon candidat d’inducteur de la neurulation puisqu’il est
bien localisé dans la région dorsale.
T sh3 et Tsh3MO (drogue qui bloque effet Tsh3)
Groupe témoin, dans lequel on injecte dorsalement Tsh3 et ventralement Tsh3MO. : dev normal
On procède à une injection dorsale de Tsh3MO : On a un arrêt du développement, pas de différenciation en tissu nerveux et une ventralisation de l’embryon.
On injecte Tsh3MO en région ventrale : dev normal
conclu Tsh3MO et Tsh3
Tsh3MO n’a pas d’effet toxique général et bloque uniquement Tsh3. On remarque aussi que Tsh3MO ne diffuse pas beaucoup
=> la preuve qu’il n’y a pas de diffusion
entre le compartiment ventral et dorsal.
Ainsi, on en conclu que dans la région dorsale, il y a des cellules réceptives à l’action de Tsh3