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Biologie Médicale > Automates D'hématologie En Pratique > Flashcards

Automates D'hématologie En Pratique Flashcards

1
Q

Définir hémogramme

A

Information sur la composition des éléments figurés sanguins

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Q

Globules rouges
A. De quel ordre est leur concentration?
B. Quelles variables sont étudiées?

A

A. Ordre de 10^12/L

B. Variables étudiées
-Num. GR: numération de globules rouges
-Ht: hématocrite
-Hb: hémoglobinémie
-VGB: volume globulaire moyen
-CCMH: concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine
-TCMH: teneur corpusculaire moyenne en hémoglobine
-pourcentage (Num.) de réticulocytes
(-IDR: indice de distribution des globules rouges)

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3
Q

Globules rouges
A. Définir VGM et donner sa formule
B. Définir CCMH et donner sa formule
C. Définir TCMH et donner sa formule

A

A. VGM (volume globulaire moyen)

  • taille des globules rouges
  • VGM = Ht/Num. GR

B. CCMH (concentration corpusculaire moyenne en hémoglobine)

  • concentration massique d’hémoglobine contenue dans un volume donné de globules rouge
  • CCMH = Hb/Ht

C. TCMH (teneur corpusculaire myenne en hémoglobine)

  • masse moyenne d’hémoglobine contenue dans un globule rouge
  • TCMH = Hb/Num. GR

Memo: Ht = volume des GR dans le volume sanguin

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4
Q

Globules rouges
A. Quelle variable indique une situation d’anémie ou non?
B. Quel autre variable peut être intéressante en contexte d’anémie, mais pas toutes les machiens sont capables de la calculer?

A

A. Hémoglobinémie

B. Pourcentage (Num.) réticulocytes

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5
Q

Globules rouges
A. Qu’est-ce qu’un réticulocytes?
B. Qu’est-ce que leur présence traduit?
C. Qu’est-ce que leur absence traduit?

A

A. Jeune globule rouge

B. Anémie régénérative

C. Anémie dégénérative

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6
Q

Globules blancs
A. De quel ordre est leur concentration?
B. Quelles variables sont étudiées?

A

A. Ordre de 10^9/L

B. Variables

  • Formule leucocytaire (GNN, GNE, GNB, L, M)
  • Num. GB
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7
Q

Plaquettes
A. De quel ordre est leur concentration?
B. Quelles variables sont étudiées?

A

A. Ordre de 10^9/L

B. Variables
-VMP: volyme moyen plaquettaire
-Plaquettocrite
-IDP: indice de distribution des plaquettes

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8
Q

A. Quels sont les types de facteurs de variation d’un hémogramme?
B. De quel type proviennent la majorité des erreurs?

A

A. Types de facteurs de variation: Pré-analytiques, Analytiques, Post-analytiques

B. Variation pré-analytique

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9
Q

Variation pré-analytique

Quels sont les 2 principaux facteurs de variation?

A
  • facteurs liés à l’animal

- facteurs lisé au traitement du spécimen

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10
Q

Variations pré-analytiques: Facteurs liés à l’animal

Résumer ces facteurs

A

Stress (cathécolamines: adrénaline) -> leucocytose de stress aigu par décollement des cellules marginales

  • Ca: neutrophilie
  • Fe: lymphocytose

Jeun: si n’est pas à jeun le plasma devient lactescent (apport de lipides), les valeurs de l’hémoglobinémie ne seront pas exactes

Déshydratation: le volume plasmatique est plus faible -> Ht élevée

Âge: variation dans le pourcentage de lymphocytes et neutrophiles, on ne peut pas parler de neutrophilie chez un chiot.

Traitements: corticoïdes -> leucocytose et empêche les GB de sortis, neutrophiles sont bloqués dans le sang ->neutrophilie et lymphopénie

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11
Q

Variations pré-analytiques: Facteurs liés à l’animal

Connaissant les facteurs possibles, quelles précautions doit-on prendre pour éviter les erreurs pré-analytiques?

A
  • Stress: mentionner sur la fiche que l’on transmet au laboratoire que la prise de sang ne s’est pas bien déroulée. Si on effectue nous-même l’analyse, on attend 1h avant de reprélever.
  • Déshydratation: examen préclinique (pli de peau) pour prendre en compte lors de l’analyse des résultats.
  • Traitements: touours indiquer les molécyles données en traitement
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12
Q

Variations pré-analytiques: Facteurs liés au spécimen - Quel antivoagulant

A. Quel est le gold standard de l’hématologie?
B. Pour le chat lequel est plutôt utilisé et pourquoi?
C. Pour réaliser une sérologie lequel est utilisé?

A

A. Gold standard de l’hématologie: Tube EDTA (bouchon violet)

B. Chat: Tube CTAD (bouchon bleu; Citrate, Théophylline, Adénosine, Dipyridamole), des molécules qui mettent les plaquettes au repos et permettent d’empêcher les agrégats plaquettaires (artéfact majeur en hématologie féline)

C. Sérologie: Tube sec (bouchon rouge)

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13
Q

Variations pré-analytiques: Facteurs liés au spécimen - traitement du spécimen
A. Que fait-on après la collection?
B. L’idéal est de traiter le plus rapidement possible, si c’est pas possible que fait-on?
C. Quel genre de prélèvement ne se conserve pas?
D. De quoi un tube envoyé au labo doit-il toujours être accompagné?
E. Quand réalise-t-on le frottis sanguin?

A

A. Homogénéiser le sang avec l’anticoagulant: retourner délicatement 10 fois le tube, pas trop fort pour ne pas éclater les cellules

B. Possible de conserver le spéciment réfrigérer de 24 à 48h à 4 degrés

C. Le prélèvement pour analyse de plaquettes ne se conserve pas

D. Toujours accompagner le tube envoyé au labo d’un frottis non coloré

E. Toujours réaliser le frottis sanguin immédiatement après la collection et homogénisation, la coloration peut se faire ultérieurement au labo

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14
Q

Variations analytiques

Quelles sont les différentes technologues d’automates d’hématologie?

A
  • variation d’impédance (principe Coulter)
  • analyse quantitative du buffy coat (QBC)
  • cytométrie en flux (CMF)
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15
Q

Variations analytiques: variation d’impédance
A. Quel est le principe?
B. Quelles sont les variables mesurées?
C. Quelles sont les variables à calculer?
D. De quelle façon sont présentés les résultats?
E. Quelle variable absente?

A

A. Le tube est mis dans la machine qui absorbe une petite quantité de sang et le dilue dans un milieu riche en ions. Les cellules sont aspirées entre 2 électrodes, il y a donc passage de la cellule dans un champ électrique ce qui entraine une variation d’impédance proportionnellement au VOLUME de la particule traversée.

B. Variables mesurées

  • GR: Num., Hb, VGM
  • GB: Num., formule
  • Plaquettes: Num., VMP

C. Variables à calculer

  • GR: Ht (Num. GR x VGM), CCMH (Hb/Ht), TCMH (Hb/Num. GR), IDR
  • Plaquettes: plaquettocrite (Num./VMP), IDP

D. Présentation des résultats: chifférs et sous forme de courbes

E. Variable absente: réticulocytes

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16
Q

Variations analytiques: variation d’impédance, les courbes
A. Que doit-on faire pour les valider?
B. Quels sont les axes?
C. Comment sait-on qu’on est sur une courbe de GB (leucogramme) de carnivore VS un bovin?
D. Quelles variables seront faussées si la machine fait une erreur dans la numération ou la VGM?

A

A. Valider les courbes

  • comparer avec celles d’un animal sain
  • courbe des plaquettes: pas gaussienne
  • courbe des GR: gausienne
  • une courbe tronquée ne peut pas être validée (problème avec le seuil)
  • regarder les alarmes

B. Axes

  • abscisse: volume des cellules
  • ordonnée: nombre de cellules

C. Courbes leucogramme de carnivores: plus de neutrophiles (GNN) que de lympho, ce serait le contraire pour le bovin

D. Ht et CCMH (Hb/Ht ou Num. GR x VGM) seront faux

17
Q

Variations analytiques: analyse quantitative du buffy coat (QBC)
A. Quel est le principe?
B. Quelles sont les épaisseurs dinstinguées dans le buffy coat?
C. Quelles sont les variables mesurées?
D. Quelles sont les variables à calculer?
E. Quelle variable absente?
F. De quelle façon sont présentés les résultats?
G. Quelles sont les conditions pour que les résultats soient interprétables?

A

A. Reprend le principe de la microhématocrite, mais les microtubes sont recouverts d’un colorant vital : acide d’acridine orange. Cela permet de visualiser par fluorescence l’ADN, l’ARN et les lipoprotéines sous une lumière bleue. L’appareil mesure la fluorexcent. On ajoute un flotteur dans le tube, qui vient se placer au niveau du buffy coat pour «l’étaler», le décondenser, afin que les mesures soient plus précises.

B. Épaisseurs dans le buffy coat (tri par poids): granulocytes au fond, lymphocytes et monocytes au milieu, plaquettes juste sous le plasma

C. Variables mesurées

  • GR: CCMH, Ht, «réticulocytes»
  • GB: hauteur du buffy coat, formule approchée
  • plaquettes: plaquettocrite

D. Variables à calculer

  • GR: Hb (CCMH x Ht)
  • GB: Num. (logiciel de conversion)
  • plaquettes: Num. (logiciel de conversion)

E. Variable absente: Num. GR et donc TCMH

F. Résultats chiffrés et courbe de fluorescence en fonction de la position dans le tube

G. Conditions d’interprétation

  • cellules bien séparées = points d’inflexion nets et bien visibles entre L/M et Gran, entre PLT et L/M, et entre GR et Gran
  • courbe GR à 0 puisque fluorescence nulle (pas d’ARN ni d’ADN), s’il y a des réticulocytes l’inflexion est moins marquée -> regarder la valeur de l’Ht pour s’assurer de la fiabilité
  • pic pour les lymphocytes monocytes, bien marqué par rapport aux plaquettes
  • éventuel second pic correspondant aux éosinophiles en cas d’éosinophilie
  • pic en surface du plasma
  • regarder les alarmes de la machine
18
Q

Variations analytiques: cytométrie en flux (CMF)
A. Quel est le principe?
B. De quelle façon sont présentés les résultats?
C. Quels sont les axes?
D. Quelles sont les variables mesurées?
E. Quelles sont les conditions pour que les résultats soient interprétables?

A

A. «Carte d’identitée des cellules»: les cellules sont aspirées et s’écoulent selon un flux laminaire central à l’intérieur d’une cellule d’écoulement. Un système focalisant amène les cellules au centre de la cellule d’écoulement, les unes après les autres. Elles sont iluminées par un faisceau laser créant une diffraction de la lumière qui va être analysée. Il y a un détecteur dans l’axe qui apporte une information sur la taille de la cellule, et un détecteur à angle élevé qui donne une information sur la structure interne (granulosité, forme et activité du noyau). Les GR sont rendus sphériques par un surfactant anionique et une colrant vital colore l’ARN dans les réticulocutes et GR immatures, et colore les granulations des plaquettes.

B. Résultats chiffrés et sous forme de cytogrammes (nuage de points en couleur)

C. Axes des cytogrammes

  • abscisse: granulosité
  • ordonnée: taille

D. Variables mesurées: on a la totale

E. Conditions d’interprétation

  • réticulocytes accolés au RG en «queue de comète» (ils se différencient des GR)
  • GB: un étalon interne (billes en latex) doit toujours sortir en bas à droite
  • les nuages de points ne doivent pas se chevaucher (différenciation des cellules)
  • attention différences en fonction des espèces
19
Q

On retrouve des automates avec doucle méthode
A. Quelles sont ces méthodes combinées?
B. Quel est le principe?
C. Quels sont les axes des cytogrammes?
D. Selon les espèces, les nuages ne sont pas au même endroit. Comment se présente le cytogramme GR du chat?
E. Quelle population de GB n’ont jamais leur nuage au même endroit selon les espèces. Pourquoi?
F. Lorsque le machine n’a pas russi à différencier les populations de cellules que doit-on faire?
G. La numératin de quelle population de GB n’est jamais fiable?

A

A. Automates CMF à fluorescence, double méthode impédance + CMF

B. La numération des globules rouges et plaquettes se fait par variation d’impédance car cette méthode est très efficace. Le laser illumine les cellule suqi passent et il y a un marqueur florescent permettant la détection de la taille, granulosité et florescence des cellules. Il y a comptage et identification descllules, la densité de points est proportionnelle à la quantité de cellules (1 point = 1 cellule).

C. Axes des cytogrammes

  • abscisse: granulosité
  • ordonnée: fluorescence

D. Chat: le nuage de point des GR est proche des plaquettes et il est étiré car il existe des plaquettes géantes.

E. Les éosinophiles n’ont jamais leur nuage au même endroit, les granulations sont très différentes en taille/forme selon l’espèce. (Le bovin a beaucoup de lymphocytes et peu de neutrophiles)

F. Regarder le frottis sanguin pour savoir pourquoi la machine n’a pas réussi à faire la différence entre les populations de cellules et quelle est l’anomalie sanguine trouvée.

G. Aucun cytomètre ne donne de numération de basophiles fiable.

20
Q

Quelle est la machine la plus complète?

A

Cytomètre (pour la cytométrie en flux il n’y a aucun paramètres hématologiques absents)

21
Q

Comment valide-t-on une concentration de GR qui nous parrait anormale avec la variation d’impédance?

A

Microhématocrite

Biologie Médicale (10 decks)

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