Ativação Resposta adaptativa Flashcards
Apesar das DC fazerem parte do Sistema Imune Inato, elas são a ponte…
Entre o sistema inato e adaptativo, pois quando ativadas amadurecem e migram para os órgãos linfoides secundários/terciários e expressam moléculas para as T e B, de forma a que estas se tornem células efetoras.
Antes da ativação por antigénio, os linfócitos naive T e B estão…
Em circulação, entrando nos órgãos linfoides secundários/terciários pelas HEV que são ricas em células endoteliais.
Nos órgãos 2º como os nodos por onde entram as DC migratórias?
Pelos vasos linfáticos aferentes.
Como estão divididos os nodos estruturalmente?
Cápsula, sinos subcapsular, córtex, paracórtex e medula.
Onde se situam as células B e T nos nodos?
Estão separadas entre si: as B nos folículos do córtex e as T no paracórtex.
Onde se situam as FDC e as FRC?
As FDC estão nos folículos e as FRC no paracórtex.
Como se movimentam as células dentro dos nodos?
Através do gradiente de quimiocinas e folículos que servem de suporte:
FRC expressam CCL21 e CCL19 que atraem T naive que expressam CCR7;
FDC expressam CXCL13 que atraem B naive que expressam CXCR5.
O que acontece se as células naive não encontrarem um antigénio?
Saem dos nodos pela expressão do S1P1R sensível ao gradiente de S1P presente nas vias eferentes da medula do sinos.
Como é que os antigénios viajam até os órgãos 2º?
Para as células B o antigénio é opsonizado e reconhecido pelos SCSM (macrófagos presentes no sinos subcapsular) que transportam o antigénio para o folículo, as B não específicas fornecem o antigénio às FDC e estas apresentam às B específicas para o antigénio;
Para as T o antigénio é capturado pelas DC que migram até o paracórtex, aqui associam-se às FRC e apresentam o antigénio às T.
Qual a principal diferença entre o processo de reconhecimento de antigénio pelas T e B?
As B reconhecem antigénios não processados, enquanto as T procuram antigénios peptídicos ligados a MHC.
Quantos sinais ocorrem na ativação das células T? E o que estimulam?
3 sinais:
1º. reconhecimento de antigénio-MHC pelo TCR
2º. moléculas co-estimuladoras
3º. citocinas para proliferação (IL-2 e IL-12) e polarização
Estimulam a expressão de genes.
Como está estruturada a sinapse imunitária nas células T?
cSMAC - complexo ativador central constituído por TCR-antigénio-MHC e co-recetores, tratando-se do método de sinalização;
pSMAC - complexo ativador periférico constituído por moléculas de adesão (interinas).
Após interação das moléculas membranares das células T e APC, a ativação das T deve-se a…
Fosforilação de ITAMs do CD3 pelo Lck;
As moléculas ZAP70 ficam associadas e são fosforiladas pelo Lck;
O ZAP-70 fosforilados fosforilam LAT e SLP-76;
O SLP-76 ativa o PLC-gama | PIP2 | RAS, PKC e IP3 | MAP, NF-KB e NFAT.
Os sinais de co-estimulação podem ser positivos e negativos?
Sim. Os positivos provém de recetores que facilitam a ativação (ICOS e CD28) e os negativos ajudam a diminuir o sinal de ativação (CTLA-4, PD-1 e BTLA).
Que ligandos de co-estimulação expressam as células B e APC?
As APC expressam CD80/86 que se ligam a CD28 (positivo) e a CTLA-4 (negativo).
As B e algumas APC e T expressam ICOS-L que se liga a ICOS (positivo) e PD-L1/2 que se ligam a PD-1 (negativo).
Qual a diferença entre a atividade do CD28 e do ICOS?
O CD28 é expresso em eventos iniciais de ativação das células T, sendo um homodímero expresso na maioria dessas células que aumenta a proliferação e os sinais de sobrevivência;
ICOS é expresso em células T de memória e efetoras, de forma a manter a atividade das células já diferenciadas.
Quais as caraterísticas dos recetores co-estimuladores negativos (CTLA-4, PD-1 e BTLA)?
CTLA-4: induzido passadas 24 horas após a ativação das T com um pico de atividade de 2 a 3 dias, liga-se com maior afinidade do que o CD28 ao CD80/86 (competição);
PD-1: medeia a tolerância das células T em tecidos não linfoides;
BTLA: diminui as respostas inflamatórias e autoimunes.
Em que áreas já foi utilizada a técnica de bloqueio de CTLA-4 e PD-1?
Imunoterapias para cancro. Algumas células cancerígenas expressam os ligandos de bloqueio, impedindo que as células imunes eliminem os tumores.
Do que se trata a anergia clonal?
Se a célula T receber apenas o sinal 1 (TCR-péptido-MHC), ou seja, quando a co-estimulação não ocorre. Isto leva a tolerância, principalmente na periferia. O péptido até pode fazer parte dum antigénio próprio.
A IL-2 é uma citocina…
Autócrina que é produzida quando a célula T está a ser estimulada, sendo secretada e o seu recetor produzido pela mesma célula T, tratando-se dum sinal de proliferação.
Os sinais de proliferação celulares leva a…
Produção de células efetoras e de memória.
As células de memória vão desde estaminal (maior potencial de renovação), central, efetora e terminal (maior potencial efetor).
Que citocinas polarizadoras levam à diferenciação dos subtipos de células T?
Os diferentes PRR presentes nas APC ao serem estimulados levam à produção de várias citocinas:
Vírus - IL12 - Th1
Parasitas/vermes - IL4 - Th2
As citocinas polarizadoras levam à…
Expressão e transcrição de vários genes de regulação associados à produção e secreção de citocinas efetoras.
Descreve as citocinas polarizadoras, os fatores de transcrição, o subtipo, as citocinas efetoras e as funções efetoras.
IL12, IFN, IL18 - T Bet - Th1 - IFN, TNF - combate patogénios intracelulares (estimula CTL) e ativa macrófagos;
IL4 - GATA3 - Th2 - IL4, 5,13 - combate parasitas e ativa eosinófilos;
IL6, 23, 1beta, TGF - RORgamat - Th17 - IL17, 21, 22 - combate patogénios extracelulares nos tecidos;
IL2, TGF - FOXP3 - Treg - IL10, TGF - suprime respostas imunes e inflamação (inibe APC);
IL6, 21 - Bcl6 - Tfh - IL4, 21 - regula a maturação das células B nos centros germinativos.
As citocinas IL17F, 21, 22 tem funções de… E as IL17A…
Afastar fungos e infeções bacterianas extracelulares.
Inflamação crónica e respostas autoimunes.
O que são as iTreg?
São células T com a mesma função das Treg, mas que provêm das T pela ativação da TGF que estimula a expressão de FOXP3, para diferenciação nesse subtipo celular
A Treg podem…
Depletar as citocinas no local;
Produzir citocinas inibitórias;
Inibir a atividade das APC;
Matar diretamente células T.
O TGF estimula tanto as Treg como as Th17? O que diferencia a polarização destes 2 subtipos?
A IL-6 que induz a Th17.
Um estado normal estimula a manutenção das Treg, enquanto um estado inflamatório estimula a produção de IL-6 que por sua vez promove a diferenciação do tipo Th17.
Para além das Treg tímicas ou naturais existem…
As pTreg ou iTreg que são periféricas.
A ativação do fator de transcrição Bcl-6 inibe…
Os fatores GATA3, RORgamaT e T-Bet.
As Tfh expressam…
CXCR5 (direcionamento para os folículos) e CD40L (sinalização com as B).
Como é que uma APC apresenta um antigénio às Tc sem ficar infetada?
Pela apresentação cruzada em que o antigénio é internalizado e dirigido para a via endógena, para que se associe à MHC I. Estimulando a Tc pela secreção de IL-12.
Como é que as Tc matam as células infetadas?
Formação de um conjugado entre Tc e célula alvo através das interações de ICAM 1 - LFA 1;
Libertação de conteúdo dos grânulos: perforina (formação de poros) e granzima (proteases de serina);
Indução de apoptose pelo conteúdo dos grânulos ou pela via Fas/FasL.
Os vários tipos de células T de memória distinguem-se como?
Através da sua localização e das suas funções efetoras:
Tcm: circulam entre os diversos órgãos 2º, são ativadas rapidamente pelo 2º encontro com o antigénio e conseguem diferenciar-se segundo as citocinas;
Tem: viajam entre tecidos terciários, contribuem para a 1ª linha de defesa e efetuam logo as suas funções com a exposição ao antigénio;
Trm: residentes nos tecidos com antiga infeção, principalmente as CD8+ e são ativadas logo após reinfeção.
As células de memória devem desenvolver-se…
Após 3 dias do início da resposta imune.
As CD8+ estão localizadas apenas num local do organismo?
Não, distribuem-se por todo o organismo, pois os patogénios podem entrar posteriormente por outro local.
Descreve a seleção clonal que ocorre nas células B.
As células B imaturas já possuem um tipo específico de recetor Ig (BCR) que ao reconhecer o antigénio vai promover a maturação da célula. A célula matura segue para os órgãos 2º, para replicação e desenvolvimento de células de memória.
Aquelas que reconhecem antigénios próprios são deletadas durante o seu desenvolvimento embriónico.
As respostas das células B são dependentes das T?
Podem ser dependentes ou independentes (reconhecimento pelos PRR).
Descreve o mecanismo de resposta B dependente da T.
Antigénio de grande dimensão é capturado pelos SCSM;
Direção dos antigénios (grandes e pequenos) até aos folículos dos nodos linfáticos;
Antigénios adquiridos pelas FDC;
Interação entre antigénio e célula B por movimentos da membrana da B levando a oligomerizações e movimentos de moléculas em jangadas de lípidos (lipid rafts).
A interação de BCR-antigénio provoca…
Arranjos membranares que levam a associação de ITAM dos BCR e À formação de SMAC (cluster de ativação) com associações de integrinas e actina.
Qual a transdução de sinal na ativação das células B?
Fosforilação de ITAMs pela família de Src (Lyn), formando um sinalossoma.
Quais são os co-recetores da ativação das B?
CD21, 19, 81. O CD21 liga-se ao fragmento de antigénio aumentando o sinal. O CD40 liga-se ao CD40L presente na Th para promover a diferenciação e produção de células de memória.
Após o reconhecimento do antigénio pelas B e da transdução de sinal, o que acontece na resposta dependente das células T?
O complexo BCR-antigénio é internalizado, sendo o antigénio processado pela via exógena. Os fragmentos são apresentados às MHC II, solicitando ajuda às células T. Ocorre um aumento de expressão de co-recetores de CD40, CD80 e CD86.
A proliferação das células B induz…
Formação de centros germinativos nos nodos linfáticos e no baço.
Após ativação das células B, para onde é que elas se dirigem?
Através do gradiente de quimiocinas as células B dirigem-se para a zona B-T nos nodos linfáticos, pois passam a expressar o CCR7 que é sensível a moléculas como CCL19/21 muito presentes nas zonas ricas em células T. A interação destas células ocorre na fronteira entre o folículo no córtex e o paracórtex.
As B interagem com a célula T que partilha da mesma especificidade para o antigénio e após tal ocorrer a expressão de CCR7 nas B diminui, dirigindo-se para os folículos através do aumento de expressão de CXCR5 que é sensível a CXCL13 presente nessas áreas.
Na migração das B nos nodos linfáticos que outros recetores e quimiocinas podem auxiliar nessa transição?
CXCR4 - CXCL12 produzido nos cordões medulares dos nodos, na polpa vermelha do baço;
EBI2 - 25 OHC nos folículos (zonas mais exteriores).
Os níveis de expressão do CXCR5 altera ao longo do processo de ativação das B? E a expressão de EBI2?
Não, permanece constantes desde a exposição ao antigénio, a apresentação às T e até à maturação em plasmócito/formação dos centros germinativos.
Diminui na fase de desenvolvimento em plasmócitos e dos centros germinativos.
Em que tipo de células podem as B diferenciarem-se?
Plasmócitos, células de memória precorses e células de centro germinativo.
Qual a diferença entre plasmablastos e plasmócitos?
São células B em proliferação que secretam anticorpos e que ainda admitem Ig na superfície membranar. Os plasmócitos são células B que pararam de proliferar e que secretam anticorpos sem qualquer Ig na membrana.
Como se formam os centros germinativos e qual a sua estrutura?
Necessita de interações à base de CD40/CD40L entre as B e T e citocinas de FDC e Tfh para estimular a proliferação.
Admite 2 zonas: escura que está densamente empacotada com B proliferativas e clara constituída por B e FDC.
O que ocorre nos centros germinativos?
Hipermutações somáticas nas cadeias pesadas e rearranjos das cadeias leves das Ig, seguindo-se a seleção por afinidade. As mutações aumentam com o tempo e com repetitivas exposições. Os hot spots das mutações tendem a ser motivos sequenciais que admitem maior probabilidade de serem alvos, prevenindo que ocorram mutações em áreas não Ig.
Como é que a seleção de afinidade ocorre?
As células B que conseguem ligar, processar e apresentar mais Ag a células T com assistência a citocinas tendem a sobreviver. Permanecem as que admitem maiores níveis de afinidade para um Ag específico.
A alteração de classes das Ig também ocorre nos centros germinativos?
Sim, após contacto com o Ag a célula B recebe sinais de CD40, para iniciar a recombinação de alteração de classe. São as citocinas que medeiam essa alteração.
A que classes de Ig correspondem os seguintes sinais de citocinas: IL4, TGF, IL5 e IFN?
IgG1, IgE;
IgA, IgG2b;
IgA;
IgG3, IgG2a.
Quais as diversas funções efetoras dos anticorpos?
- Neutralização: inativação de patogénios extracelulares, impedindo a ligação destes às células;
- Aglutinação: previne a ligação às células e aumenta a limpeza dos micróbios do organismo;
- Opsonização: estimula a fagocitose;
- Ativação do complemento: formação de MAC nas membranas dos micróbios, criando poros e levando à morte;
- Citotoxicidade dependente de Ab (ADCC): ativação de células citotóxicas como as NK;
- Desgranulação: libertação de mediadores dos granulócitos.
Quais as principais funções das IgG?
- Fixação do complemento: IgG1/3
- Aumento de fagocitose
- Ativação de NK: IgG1 e IgG2a em ratinhos
Quais as funções efetoras do IgA?
- Neutralização de toxinas e patogénios
Onde podemos encontrar o IgA?
Nas mucosas e secreções como saliva, lágrimas, leite materno e mucosa intestinal. Admite um longo de período de vida, pois a sua região Fc é constituída por aminoácidos resistentes a proteases.
O IgA pode levar a inflamação?
Não, visto que não auxilia na fixação do complemento.
Quais as principais funções das IgE?
- Desgranulação de eosinófilos e basófilos, sendo dos principais compostos secretados a histamina.
O IgE está muito associado a situações alérgicas…
Asma e proteção contra protozoários e helmintas.
Que região dos anticorpos medeia as funções efetoras de cada classe?
A região Fc.
As células B recentemente geradas mantém-se ao longo da vida do indivíduo?
Não, a maioria é eliminada no fim da primeira resposta ao antigénio. Mas algumas nos centros germinativos terminam a maturação em plasmócitos.
O que acontece para as células B serem eliminadas após a sua ativação na 1ª resposta ao antigénio?
Interagem com as Tfh e passam a expressar PD-1 que se liga ao recetor presente nas T ao fim de 10 dias após o início da resposta das células B. Tal leva À promoção de plasmócitos e o ambiente de quimiocinas promove o movimento para diversos locais do corpo.
Em que órgãos podem as células B tornarem-se residentes?
Medula óssea onde admitem vida muito longa;
Mucosas onde produzem elevados níveis de IgA.
Quais as diferenças entre as respostas imunitárias primária e secundária pelas células B?
Os plasmócitos de longa vida produzem anticorpos logo após a exposição ao antigénio, seguem mutações somáticas e maturação de afinidade, a histologia destas células parece maior e expressam diferentes marcadores membranares;
Os isótipos de anticorpos produzidos em cada uma das resposta diferem: 1ª predomina IgM e na 2ª predomina IgG e IgA (mucosas);
A resposta secundária vai depender na sua totalidade das células T;
Afinidade dos anticorpos é mais alta na 2ª resposta.
O isótipo IgM é gerado antes ou depois de seguir as hipermutações somáticas (SHM)?
Antes, enquanto o IgG forma-se após as mutações.
Quais as caraterísticas da reposta das células B independentes das T?
A produção de anticorpos não necessita de auxílio das células T;
Existem 2 tipos de antigénios: Ti1 que representa tipicamente os componentes das paredes das bactérias que se ligam aos PRR das células B | Ti2 que representa antigénios proteicos poliméricos e polissacáridos capsulares que se ligam a BCR do tipo IgM monomérico.
Os antigénios da resposta independente não conseguem como na resposta dependente…
Promover a alteração de classes;
Promover a maturação de afinidade;
Promover memória imunológica.
Os antigénios do Ti levam a ativação policlonal?
Os de tipo 1 sim, mas os de tipo 2 não.
Nem os tipos de resposta dependente!
Como se pode parar a proliferação das células B quando esta não é mais necessária?
Quando o antigénio deixa de ser apresentado em altas quantidades, o sinal proveniente de CD22 inibe qualquer sinal de BCR desnecessário;
Ligação de IgG ao recetor CD32 (FcgamaRIIb) que promove a fosforilação de ITIMs que por sua vez recruta fosfatases;
Secreção de IL-10 pelas B CD5+ (células B-2) após interação com as T por CD40-BCR, sendo que a interleucina diminui a resposta inflamatória das T e das APC. As células B-10 presentes no baço também secretam IL-10.
Quais as caraterísticas do CD22?
Possui regiões de ITIMs cuja fosforilação recruta SHP-1 que retira os grupos fosfatos das moléculas de sinalização vizinhas.
Que tipos de comunicação intercelular existem?
Dependente de contacto: sinapse imune e nanotubos;
Independente de contacto: citocinas e quimiocinas.
Com que se parece a estrutura da sinapse imunitária?
Com a estrutura da sinapse neuronal.
Os nanotubos entre células são para distâncias curtas ou longas?
Longas.
As citocinas podem atuar por 3 maneiras, sendo essas…
Endócrina: libertadas na corrente sanguínea até chegar à célula alvo, percorrendo grandes distâncias;
Parácrina: efeito nas células próximas;
Autócrina: efeito na célula que a secretou.
As citocinas têm caraterísticas efetoras de…
Pleitropia: diferentes efeitos biológicos dependendo da célula alvo;
Redundância: diferentes citocinas podem ter o mesmo efeito na mesma célula alvo;
Sinergia: a atividade de 2 citocinas, de forma a aumentar o resulatdo na célula alvo;
Antagonista: o efeito duma citocina pode inibir o efeito de outra;
Cascada: uma citocina tem o efeito de a célula alvo produzir outras citocinas.
