artefacten Flashcards
verschillende artefacten
meest voorkomende
stotter piek
split piek
pull up
OL
Te veel/weinig DNA
Gedegradeerd
Mengprofiel
stotter piek
repeat korter dan werkelijke allel. Hoogte is 15% minder dan werkelijke repeat
ontstaan stotter piek
tijdens de TAQ polemerase slaat een repeat over. Of maakt een circkel en begint weer opnieuw (repeat langer)
Dit is strand slippage.
Andere artefacten
overloaded profile
split piek
taq bouwt overal aan het einde een nucleotide in.
ook bekend als terminal transferase
oorzaak: taq werkt niet optimaal of teveel DNA
oplossing: nog een x de extentie stap uitvoeren
pull up
dit ontstaat doordat er een emissie spectra dat overlapt
bestaat uit meer dan 1 kleur
OL
of ladder, piek is onbekend en staat niet op de allelen ladden.
range is 0,5
te veel DNA
er is veel fluorisatie van de fluor wat er toe leidt dat de camera geen goede indicatie meer kan geven van de hoeveelheid DNA
veel ruis, stotter pieken, split pieken, pull ups
te weinig DNA
(low copy number DNA)
DNA monster zit onder de 100 pg.
Allel drop out en drop in, geen piek blans, locus drop out, ernstige stotter pieken
Aantal cycli verhogen naar 34 , wel meer artefacten.
mengprofielen
meer dan twee allelen op 1 loci zichtbaar.