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Biologie Cellulaire > Appareil de Golgi > Flashcards

Appareil de Golgi Flashcards

1
Q

Qui et en quelle années l’appareil réticulé interne à été mis en évidence à l’argent métallique?

A

Camillo Golgi à la fin du XIXe siècle

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Q

Après la deuxième guerre mondiale, quelles méthodes sont utilisées pour observer l’appareil golgien?

A

MET et MET à haut voltage (coupes minces et coupes épaisses)

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3
Q

De quoi est constitué l’appareil de Golgi?

A

l’ensemble des golgiosomes (dictyosomes) de la cellule

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4
Q

Qu’est-ce qu’un golgiosome?

A

empilement de saccules régulièrement espacés.

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Q

Quelle est la forme des golgiosomes?

A

Les golgiosomes sont courbés et présentent une face concave et une face convexe.

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6
Q

Quelles sont les distinction entre les saccules golgiens et RE?

A
  • Arrangement ordonné des saccules golgiens
  • Jamais de ribosomes sur les saccules golgiens
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7
Q

Par qui et en quelle années est utilisée l’autoradiographie?

A

Leblond, Palade, Jamieson en 1967

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8
Q

Qu’est-ce que l’autoradiographie?

A

Pulse et chasse autoradiographique pour mieux connaître l’appareil de Golgi
Pulse de 3’ dans un milieu avec leucine 3H (chaud)
Chasse dans un milieu froid à 10, 40 et 120 minutes

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9
Q

Quelles sont les étapes de pulse et chasse autoradiographique sur les cellules acineuses pancréatiques?

A
  1. Prélèvement du pancréas
  2. Pulse
  3. Milieu chaud: milieu de culture avec de la leucine-3H
  4. Chasse
  5. Milieu froid: milieu avec la leucine non radioactive
  6. autoradiographie: dépôt de grain d’Argent
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10
Q

Quels sont les transports intracellulaires des protéines observés au MET?

A

Les protéines migrent du RE
1. vers le Golgi
2. vers les vacuoles de sécrétion
3. vers le milieu extracellulaire

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11
Q

Que permet le fractionnement cellulaire?

A

Mise en évidence par mesure de la radioactivité spécifique des fractions.

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12
Q

À quoi représente la fraction de microsomes rugueux?

A
  • Correspond au réticulum endoplasmique rugueux
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13
Q

À quoi correspond la fraction de microsomes lisses?

A
  • Correspond au complexe golgien
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14
Q

À quoi correspond la fraction des grains zymogène?

A
  • Correspond aux vésicules de sécrétion
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15
Q

Que montre la radioactivité du surnageant constante?

A

les protéines du cytoplasme demeurent séparées de celles du suc pancréatique.

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16
Q

Quelles sont les étapes de la biogénèse des saccules golgiens (migration des saccules)?

A

Migration de la face cis vers la face trans
1. Bourgeonnement des vésicules de transition à partir du RE
2. Formation de saccules par fusion des vésicules de transition
3. Migration de saccules
4. Bourgeonnement des saccules à la face de maturation en vésicules de sécrétion
5. Libération de vésicules de sécrétion

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17
Q

Quelle est la description moderne du complexe golgien?

A
  • 2 réseaux (cis, proche du REG, et trans)
  • 3 types de saccules (cis, médian et trans)
  • Fusion des vésicules de transition avec le CIREG, migration de celui-ci sur des microtubules et fusion avec le RCG.
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18
Q

Qu’est-ce que le CIREG?

A
  • Compartiment Intermédiaire Réticulum Endoplasmique Golgi nommé aussi agrégats vésiculaires tubulaires.
  • Différent du RE, car il lui manque des protéines retrouvées uniquement dans
    le RE.
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19
Q

Quelles sont les fonctions du complexe golgien?

A
  1. Rétention des protéines résidentes du RE
  2. Sécrétion cellulaire
  3. Synthèse des molécules transitant par la voie de sécrétion N-glycosylation
  4. Directeur du trafic des macromolécules sécrétées
20
Q

Qu’est-ce que la rétention des protéines résidentes du RE?

A

Capture des protéines solubles évadées du R.E.
* KDEL à l’extrémité COOH.
Capture des protéines enchâssées dans la membrane du RE et qui se sont évadées.
* KKXX sur la partie cytosolique des protéines

Exemple
* Les récepteurs de KDEL et les récepteurs de la PRS possèdent une séquence KKXX, au niveau de leur partie cytosolique (extrémité COOH), reconnue par COP1.

21
Q

Quelles sont les 2 grands types de sécrétion cellulaire?

A
  1. Constitutive: Protéines solubles néosynthétisées, fusion membranaire non régulée
  2. Contrôlée (régulée): Vésicule sécrétoire stockant des protéines sécrétoires, fusion membranaire régulée par signal de type hormone ou neurotransmetteur
22
Q

Quels sont les 4 types d’oligosaccharide n-glycosidique?

A
  • Oligosaccharides phosphorylés
  • Oligosaccharides riches en mannose
  • Oligosaccharides complexes
  • Oligosaccharides hybrides
23
Q

Quelles sont les fonctions de la glycosylation?

A
  • Résistance aux protéases dans les lysosomes
  • Remplacement de la paroi de peptidoglycane (par le glycocalyx) chez les eucaryotes ancestraux car la paroi empêchait la phagocytose
  • Adhérence intercellulaire
  • Contrôle de la qualité (RE)
24
Q

Sur quoi agit le complexe golgien dans la synthèse des molécules transitant par la voie de sécrétion N-Glycosylation?

A

Terminaison de la glycosylation de la région terminale des N-glycoprotéines et glycosylation des glycolipides

25
Q

Quelle est la destination des oligosaccharides complexes?

A
  • Granules de sécrétion
  • Membrane plasmique
26
Q

Quelle est la destination des oligosaccharides phosphorylés?

A

Lysosomes

27
Q

Quelles sont les étapes de remodelage d’un oligosaccharides lié à l’asparagine en oligosaccharide complexe?

A

RE
1. Glucosidase 1 et 2 Mannosidase
2. Mannosidase
3. GlcNAc transférase

Golgi
4. Mannosidase

28
Q

Qu’est-ce que la O-glycosylation?

A
  • Principalement menée dans le complexe Golgien, mais peut débuter dans le RE
  • Pas d’ajout en bloc d’oligosaccharide
  • Distribution des glycosyltransférases et glycosidases dans les compartiments du Golgi selon l’ordre d’ajout des glucides
  • Ex. L’ajout d’acide sialique termine habituellement la glycosylation  les sialyltransférases se trouvent principalement dans les compartiments médian et trans du Golgi
29
Q

Quels sont les résultats de Rothman (1984) sur le transport des protéines dans le complexe golgien?

A

Centrifugation en gradient de densité
* Obtient 3 types de saccules quant à leur densité et leur contenu enzymatique
* Plus denses : Phosphotransférases
* Moyennement denses : Mannosidases et N-acétylglucosamine transférases
* Moins denses : Galactoses transférases et acides sialiques transférases

30
Q

Que sont les travaux d’immunocytochimie?

A
  • Les Ac dirigés contre les diverses glycosyl-transférases marquent spécifiquement les divers saccules.
  • Conclusion : Les saccules possèdent une identité enzymatique unique.
  • Entre en contradiction avec la migration des saccules où chaque saccule doit posséder toutes les enzymes.
31
Q

Qui et en quelle années vient l’hypothèse du transport vésiculaire?

A

Rothman en 1984

32
Q

Quelle est l’hypothèse du transport vésiculaire?

A

Les saccules sont fixes et leur contenu enzymatique varie d’un saccule à l’autre.
Les protéines sont transportées d’un saccule au suivant par des vésicules en périphérie.

33
Q

Quelle est l’hypothèse du transport vésiculaire mise à jour avec la notion de CIREG?

A

Fusion des vésicules de transition pour former le CIREG : Compartiment Intermédiaire Rét. End. Golgi (ou agrégats tubulaires vésiculaires).
CIREG se déplace sur des microtubules pour fusionner avec le réseau Cis -golgi.
Enzymes demeurent dans leur saccule respectif alors que les protéines migrent par des vésicules périphériques (COP I).
Flux rétrograde qui rapporte les enzymes qui ont fui leur saccule.
Nécessite des protéines adaptatrices qui se lient à COP I et aux protéines à embarquer.

34
Q

Quelle est l’autre hypothèse sur le transport des protéines?

A

les protéines de procollagène des fibroblastes, sont trop grosses pour embarquer dans les vésicules de transport périphérique et seraient transportées de cis vers trans par la migration des saccules eux-mêmes.

Description
* Les agrégats tubulaires vésiculaires (CIREG) fusionnent entre eux pour former le réseau cis-golgi.
* Maturation du réseau Cis-golgi produit un saccule cis qui deviendra un saccule médian etc.
* Les saccules reçoivent leurs enzymes par un flux rétrograde (trans vers cis) de vésicules enrobées de COP I.

35
Q

Quelle est l’hypothèse mixte?

A

Vision synthétique des 2 hypothèses
Le transport vésiculaire et la migration des saccules ne sont pas mutuellement exclusifs
Les 2 modèles peuvent coexister à divers degrés
1. Transport rapide de petites protéines via des vésicules périphériques de cis vers trans.
2. Transport lent de gros agrégats par migration des saccules de cis vers trans.
3. Retour des enzymes dans les saccules par un flux rétrograde de vésicules périphériques (de trans vers cis).

36
Q

De quoi dépend l’architecture du complexe golgien?

A

des microtubules et des protéines
cytoplasmiques de la matrice golgienne.

37
Q

Qu’est-ce que la matrice golgienne?

A

La matrice golgienne est un échafaudage protéique, érigé entre les cisternes, qui confère l’intégrité structurale du Golgi.

  • La phosphorylation des protéines de la matrice golgienne, par une kinase lors de la mitose, cause la fragmentation du Golgi qui se disperse dans le cytosol, assurant une distribution dans les 2 cellules filles.
    La déphosphorylation mène au réassemblage du complexe golgien.
38
Q

Que sont les golgines?

A

longues protéines fibrillaires de la matrice, aident à la rétention des vésicules périphériques de transport
Les golgines s’associent aux protéines Rab,
elles -mêmes associées aux vésicules de transport.

39
Q

Quels sont les 3 grands groupes de protéines qui transitent en même temps dans le golgi?

A
  • Protéines lysosomales
  • Protéines sécrétées
  • Protéines membranaires
40
Q

Qu’est-ce que le RTG?

A

Le RTG est le site du tri des protéines
* Ex. Protéines lysosomales : M-6-P

41
Q

Qu’est-ce qu’une cellule épithéliale polarisée?

A
  • Rôle de la zonula occludens dans la polarité des cellules
  • Possède 2 types de membrane plasmique
  • membrane apicale
  • membrane baso-latérale
  • Rôle du RTG dans l’adressage des protéines
42
Q

Qu’est-ce qu’un fibroblaste du tissu conjonctif non polarisé?

A
  • Possède la même membrane sur toute sa surface car la cellule est entièrement en contact avec le milieu intérieur.
43
Q

Comment se fait le ciblage vers la membrane basolatérale?

A

Protéines solubles
* Des séquences de ciblage existent probablement

Protéines membranaires
* Séquences de ciblage cytosoliques des cargos membranaires
* Motif tyrosine (YxxΦ ou NPxY; Φ résidus hydrophobe)
* Motif dileucine (D/ExxxLL)
* Reconnus par AP1B qui recrute ensuite la clathrine

44
Q

Comment se fait le ciblage vers la membrane apicale?

A

Protéines sécrétées
* Activation de SPCA1 par une ↑ de la concentration membranaire de cholestérol et sphingomyéline (radeau lipidique).
* L’entrée de calcium active Cab45 qui s’oligomérise et provoque l’agrégation des protéines solubles favorisant leur exportation dans des vésicules riches en radeaux lipidiques.

Protéines membranaires
* Ciblage par N- ou O-glycosylation
– Association à des lectines de ciblage
* Domaine transmembranaire associé aux radeaux lipidiques
* Ciblage par présence d’une ancre GPI
– Activation de SPCA1, puis l’entrée de calcium active Cab45 qui provoque l’agrégation des protéines avec ancres GPI et favorise leur exportation.

45
Q

Quel est le mécanisme de rétention des enzymes résidentes du Golgi?

A
  • Exclusion par l’épaisseur de la membrane
  • La presque totalité des enzymes golgiennes sont membranaires avec un segment transmembranaire relativement court les excluant des radeaux lipidiques de plus en plus nombreux en progressant vers le RTG.
  • Rétention par un domaine transmembranaire spécifique
  • Oligomérisation
  • Queue cytoplasmique présentant une séquence de ciblage
46
Q

Quel est le rôle du golgi dans le renouvellement de la membrane plasmique?

A

Transport des vésicules vers la membrane plasmique par la kinésine sur les microtubules.
Le golgi est un site important de synthèse des sphingolipides.
Le RE synthétise des précurseurs de sphingolipides.

47
Q

Quels sont les exemples de sécrétion?

A

Mucus
Ex. Par cellules caliciformes de l’intestin

Hormone
Ex. Thyroglobuline (lumière des follicules thyroïdiens)

Enzymes
Ex. trypsine (acini pancréatiques)

Lait
Protéines du lait
Lipides
Anticorps
Production de lait chez la femme

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