Anticorps Et Derivés 1 Et 2

Question 1

Différentes classes d’anticorps monoclonaux

Answer 1

Omab: murine

Ximab: chimeric

Zumab: Humanized

Umab: human

Question 2

Production d’anticorps monoclonaux «omab»

Answer 2

1) immunisation animale
2) isolement Lb de la rate
3) fusion Lb avec cellule myélome
4) mise en culture de l’hybridome
5) récupération des anticorps

Ac murins: risque d’allergie

Question 3

Production d’Ac Ximab

Answer 3

1) immunisation animal
2) isolement Lb rate
3) construction génétique homme/souris
4) transfection E. Coli
5) récupération des Ac

➡️ chimériques

Question 4

Prod d’Ac monoclonaux zumab

Answer 4

1) obtention d’Ac murins par hybridomes
2) greffage des CDR murins dans un anticorps humain via construction génétique dans un vecteur d’expression type CHO

➡️ humanisé

Question 5

Prod d’Ac umab

Answer 5

Patient infecté -> Lb mémoires isolés -> immortalisation -> sélection

Question 6

CDR sur anticorps

Answer 6

Complementary Determining Region

Question 7

Isotypes d’Ac

Answer 7

IgM: 1ers a circuler, pentamerique
IgG: (1 a 4): le + abondant
IgA: muqueuses, dimerique
IgD: surface Lb, formation Lb mémoire
IgE: allergies, sécrétions histamine

Question 8

Généralités Ac et Imagerie

Answer 8

Peu d’Ac disponible en cliniques (SPECT)
Arrêt de commercialisation pour certains
Souvent d’origine murine
Problème: clairance (car petits) ➡️ temps long pour images correctes ➡️ fragmentation

Oncologie +++
Imagerie: ciblage et info dosimetrique (thérapie)
+ theranostique: Ac radioactif: PET/SPECT: expression de la cible, activité radioactif + immunothérapie avec radiations

Question 9

3 éléments anticorps imagerie

Answer 9

• Modalités d’imagerie: résolution, sensibilité, multiplexing, compatibilité avec d’autres modalités d’imagerie
• Hôte:
• cible antigènique: spécifique, niveau d’expression, localisation, turnover protéique
• organe avec tumeur: vascularisation, localisation, fonctions physiologiques, microenvironnements tumeur

• Agent:

• Ac: taille, stabilité, affinité, spécificité, clairance, pénétration tumeur
• conjugué: toxicité, 1/2 vie, méthode de conjugaison

Question 10

Anticorps tailles ordre croissant

Answer 10

Fv - 12 kDa
scFv - 25 kDa
Diabody - 50 kDa
Minibody - 80 kDa 
scFv-Fc - 105 kDa
Ac intacte - 150 kDa 

Fab - 50 kDa
F(ab’)2 - 100 kDa

KYN - inversement proportionnelle à taille
Clairance - inversement proportionnelle à la taille

Question 11

scFv - Monovalent Single-Chain Fv fragment

Answer 11

25 kDa = Domaine variable léger + domaine variable lourd

Lié par peptide (linker)

Clairance rapide mais bonne fixation cible

Qualité moyenne des images - fixation rénale, affinité, 1/2 vie

Production facile, modulation de la pKYN par pegylation

Question 12

Fab

Answer 12

50 kDa

Fixation tumorale rapide, améliorée
Clairance sanguine rapide 
Bruit de fond faible 
Moins immunogène qu’Ac entier 
Toxicité rénale, faible affinité

Question 13

Di- et multivalent Single-Chain Fv fragment

Answer 13

Prod de sc(Fv)2 et tendance à se dimériser en (sc(Fv)2)2 tétravalent, cinétique plus favorable

Question 14

Diabody (sc(Fv) dimer)

Answer 14

Diminution de taille du linker
Dimérisation avec un autre sc(Fv) (non-covalent)

Meilleure cinétique tumorale que body seul, clairance rénale

Question 15

Minibody (scFv-CH3 dimer)

Answer 15

80 kDa-
Contourner accumulation rénale (car seuil de clairance rénale < 60 kDa)

Dimère scFv + CH3

Acc. tumorale variable

Question 16

F(ab)2

Answer 16

Fixation tumorale rapide, améliorée
Clairance sanguine rapide 
Bruit de fond faible
Moins immunogène qu’Ac entier 
Toxicité rénale, bonne affinité

Question 17

Single-Chain Fv-Fc - scFv-Fc

Answer 17

105 kDa
Fragment avec partie Fc modifiée, évite trop ↗️ 1/2

1/2 vie: qques jours

Plutôt pour thérapie

Question 18

Single domain antibodies - SdAbs

Answer 18

Domaine variable chaîne légère ou lourde

Dans la nature:
- camélidés, poissons cartilagineux

Nanobodies (camélidés):

• Bonne pénétration tumorale 15 kDa
• humanisation (immunogénicité)

Question 19

Affibodies

Answer 19

Protéines issues de l’ingénierie 
Triple hélice 
58 AA, 6 kDa
Structure simple, soluble 
Bactéries/ synthèse peptidique
HER2 le plus étudié

Question 20

DARPins - Designed Ankyrin Repeat Proteins

Answer 20

Ankyrines = protéines de liaison intracellulaire (GR)
Darpin: motif de 33 AA

14,5 kDa (Monovalent): bonne acc., élimination rapide

30 kDa (bivalentes)

300 kDa (PEGylation): bonne acc. tumorale, élimination lente

Question 21

Ac et SPECT

Answer 21

Peu $ comparé aux traceurs PET
P détections en même temps
1/2 vie plus longue
Inconvénient majeur: atténuation photons

Conjugaison Ac:
111 In; 99m Tc; 125 I; 123 I; 131 I; 67 Ga

Question 22

Ac et PET

Answer 22

Grande variété de radiotraceurs avec 1/2 vie variables
Technologies de marquages avancent
Haute résolution de petites tumeurs à stades très précoces
Haut contraste
Haute sensibilité et spécificité
Always ON

68 Ga; 124 I; 64 Cu; 89 Zr

Question 23

Ac et images optiques

Answer 23

Minimum invasif et sans radiations ionisantes
Sensible à des pmol, pas cher, spécifique aux cibles
Multicolore possible
Sondes qui s’activent une fois sur le site
Pénétration profonde, fort sensible IR sondes

Vert indocyanine, Cy5.5, Cy 7, quantum dots

Question 24

Ac et IRM

Answer 24

Faible sensibilité, temps d’acquisition long, et grandes qtté d’agent à injecter
Haute résolution, magnifique contraste sur soft tissu (morphologie et anatomie)
Meilleur contraste et accumulation tumorale
Efficacité limité des Ac intactes d’aller dans tissus profonds
Non-spécifique assimilation par macrophages

Gadolinium, MION, SPIO, USPIO

Question 25

Ac et échographie

Answer 25

Transportable, peu cher, imagerie en temps réel

Peut être fait dans lit
Pas de radiations
Bien pour suivre thérapie
Approprier pour image angiogenese et inflammation