Análise de Salmonella

Question 1

Quais são os procedimentos para análise da Salmonella?

Answer 1

1- Preparar das diluições seriadas;

2- enriquecimento seletivo
-Verter cada 0.1ml para 2 tubos contendo ( RVS e TTB );
- Encubar por 42°C/ 24h;

3- Plaqueamento selectivo e diferencial
- Dividir em 2 partes uma placa contendo o meio de cultura XLD e fazer o estriamento com os tubos RVS e TTB
- Encubar por 35°C/ 24h após de apresentar a coloração Vermelha.

4- Prova bioquímica

Question 2

Como explicarias o aparecimento da coloração vermelha intensa no Agar Xilose Lisina Desoxicolato?

Answer 2

1-A salmionella não fermenta a lactose e nem a Sacarose, mas fermenta a Xilose levando á viragem do indicador vermelho de fenol para amarelo devido a produção de ácido.
2-Após haverá um aumento de pH devido a descarboxilação da lisina tornando o vermelho de fenol novamente vermelho só que mais intenso.

Question 3

Como se realiza a confirmação das colônias típicas de Salmonella?

Answer 3

1- Escolher apenas uma colônia típicas e realizar a Triagem Bioquímica( TSI,LIA e Ureia) e os Testes bioquímicos(Indol, VMVP, Citrato)

Question 4

Descreva o TSI( Triplo açúcar-Glicose (0,1%), lactose (1,0%) e sacarose (1,0%)

Answer 4

• Inocular com colônia suspeita, através de picada
  (anaerobiose) e estrias na rampa (aerobiose) 35-37ºC/24h
  Positividade(+)
  Fundo amarelo- Fermentação da glicose
  Meio preto- Redução do Tiossulfato em H2S
  Rampa vermelha-Degradação de substrato proteico

Question 5

Descreva o LIA- Agar Lisina

Answer 5

• Inocular com colônia suspeita, através de picada
  (anaerobiose) e estrias na rampa (aerobiose) 35-37ºC/24h
  Positividade(+)
  Fundo Preto e Rampa roxa
  O meio fica alcalino, porque mesmo ocorrendo a
  fermentação da glicose com produção de ácido
  (amarelo), a lisina é descarboxilada, produzindo um
  composto alcalino (cadaverina) que neutraliza o ácido
  formado.

Question 6

Descreva o Agar Uréia

Answer 6

• Inocular com colônia suspeita, através de estrias na rampa (aerobiose) 35-37ºC/24h
  Negativo(-)
  -A Salmonella não produz urease portanto o meio mantém a coloração inicial( amarela)

Question 7

Descreva o Ágar citrato

Answer 7

• Inocular com colônia suspeita, através de estrias na rampa (aerobiose) 35-37ºC/48h
  Positividade(+)
  Azul- Se o microrganismo for capaz de utilizar o citrato como única fonte de carbono, ele produzirá alcalinidade no meio e este mudará a cor de verde para azul

Question 8

Descreva o INDOL

Answer 8

Principio: Capacidade de produzir a enzima triptofanase que degrada o triptofano, produzindo indol + ac. Pirúvico + amônia
Negativo(-)
O indol reage com o Reagente de Kovak( 3 gotas), resultando em aparecimento de cor amarela na camada superior do tubo porque a Salmonella não produz INDOL

Question 9

Descreva o VMVP

Answer 9

1- Retira-se 1ml do tubo VMVP para obter o meio VP

2- No tubo VM adiciona-se 5 gotas de vermelho de metila.
Positividade(+)
vermelha- O microrganismo produz ácidos a partir da fermentação da glicose. Amarela é Neg

3- No tubo VP adicionar KHO e alfa naftol

Principio: Detectar a presença de acetoina produzida pelo metabolismo de certos microrganismos
Negativo(-)
Amarela

Question 10

Resumo da Triagem Bioquímica

Answer 10

TSI(+)- Fundo amarelo, centro preto e Rampa vermelha
LIA(+)- Fundo preto e Rampa roxo
UREIA(-) Amarela

Question 11

Resumo da confirmação Bioquímica

Answer 11

Citrato(+)- Azul
INDOL(-)-Amarela
VM(+)-Vermelho
VP(-)- Amarelo