Aislamiento de Secuencias Flashcards
¿Para qué sirve el alineamiento de secuencias?
- Detecta mutaciones
- Causas de enfermedades
- Ancestría como procesos evolutivos
- Similitudes entre especies
Salmonella y Shigella tienen alineamiento muy similar. Pequeños cambios
BLAST
- Plataforma con diversas versiones que permite hacer el alineamiento de secuencias
- Busca similitud entre secuencia de referencia y secuencia que se muestra
- Mejor resolución de secuenciamiento masivo
Un alineamiento de secuencias es una
- Forma de organizar las secuencias de ADN, ARN, proteínas.
- Se pone una de consulta (“query”) **contra una de referencia **
- Identifica regiones similiares entre ellas que pueden ser debido relaciones, evolutivas, estructurales o funcionales entre ellas.
Utilidad de alineamiento de secuencias
- Si dos secuencias en una alineación comparten un ancestro común, los desajustes se interpretan como mutaciones puntuales ** y las brechas (GAPs) como “INDELES”** (mutaciones de inserción o deleción) introducidos en uno o ambos linajes en el tiempo que divergieron entre si
Las variaciones de sentido erróneo alteran
El marco de lectura
Missense mutación con cambio de sentido
Características del alineamiento de secuencias
- Estima similitud
- Infiere relaciones evolutivas
¿Con qué herramientas se analizan las secuencias con detalle?
- Más precisos
- Como diagramas de puntos para análisis gráfico
- Alineaciones globales o locales para análsiis de residuos
Alineación de secuencias por pares
- Alineación que compara dos secuencias biológicas (ADN, ARN, proteínas)
Alineación de secuencias múltiples
- Alineación que compara 3 o más secuencias
Alineamiento global
- Permite ver las similitudes entre toda la secuencia de la genoma vs una de referencia
Alineamiento local
- Encuentra alineamiento entre secciones muy particulares (ej. fenilalanina 4 hidroxilasa)
¿Qué hacen las herramientas de alineamiento?
- Identifican regiones conservadas entre dos secuencias
- Busca similitud en relación a una base de datos de referenciar
BLAST, LAIGN, EMBOSS Needle, EMBOSS WATER
FASTA
- Secuencia que se pide en BLAST
Diferencia entre alineamiento global y local
Alineamiento local + específico para ver un gen (como insulina) y encontrar explicaciones evolutivas o variantes.
Global para ver secuencia de aminoácidos o nucleótidos completa. Identificar de quién es el genoma o comparar especies
Local- parte de ADN donde está el gen/variante, particular.
Metodo de alineamiento Dot Plot
- Exploración general de secuencia
- Hallar grandes Indels
- Identificación de regiones para alineamiento múltiple posterior