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Biologia molecular lab > 4. Determinacion del contenido de proteinas > Flashcards

4. Determinacion del contenido de proteinas Flashcards

1
Q

la cuantificacion de proteinas suele ser necesaria antes de su aislamiento o purificacion y si analisis mediante

A

cromatografia
electroforesis
inmuoensayos

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2
Q

proteinuria o albuminuria

A

los riñones no funcionan adecuadamente, las proteinas pueden pasar la orina

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3
Q

niveles elevados de proteinas en el lcr

A

hiper proteinorraquia

*menigitis, encefalitis, tumor medular o puncion sanguinolenta

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4
Q

las proteinas estan codificadas por genes y determian la

A

-forma
-funcion
-fenotipo

de un organismo

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5
Q

es el conjunto completo de proteinas en un organismo

A

proteoma

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6
Q

es el estudio
-ubicacion
-funcion
-estructura
-cantidad
-interaccion de las proteinas entre si y su entorno

A

proteomica

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7
Q

en estudios de proteomica cuantitativa se requieren cuantificar los extractos proteicos analizados para el estudio de las variaciones de los niveles de

A

expresion de proteina en determiandos momentos y bajo ciertas condiciones de la celula

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8
Q

permite detectar aquelas proteinas cuya
-presencia
-ausencia
-alteracion se correlaciona con

A

determinados estadios fisiologicos

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9
Q

para estudiar una enzima en el laboratorio se debe tener en cuenta

A

-cantidad total del proteina presenta
-nivel de actividad enzimatica

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10
Q

con el tiempo muchasenzimas pierden su activdad aunque la proteina total presente en la muestra permanece

A

constante

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11
Q

integran una grupo de macromoleculas que participan en una gran variedad de funciones como la
-respuesta inmunologica
-catalisisinzimatica
-mantenimiento de presion osmotica oncotica del plasma
-procesos de coagulacion

A

proteinas plasmaticas

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12
Q

casi todas las proteinas del suero se producen en el higado, a excepcion de

A

-componentes del complemento
-inmunoglobulinas

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13
Q

proteinas plasmaticas

son catabolizadas principalmente por

A

-macrofagos
-celulas del endotelio capilar
-proteinas pequeñas se pierden pasivamente en el:
*glomerulo
*pared intestinal

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14
Q

proteinas plasmaticas

su determinacion en suero proporciona informacion sobre

A

-fx gastrointestinal
-hepatico
-hematologico
-inmunologico
-renal

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15
Q

fracciones

A

albumina
globulina a1,a2,b y y

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16
Q

-es la proteina mas abundante del plasma
-contribuye a mantener el liquido dentro de los vasos sanguineos evitando que se filtre a los tejidos
-principal componente proteico del lcr

A

albumina

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17
Q

niveles elevados de proteinas en sangre

A

hiperproteinemia

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18
Q

hiperproteinemia puede presentarse en

A

-amiloidosis
-hemoconcentracion consecutiva a deshidratacion
-mieloma multiple
-gammapatia monoclonal de significado incierto

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19
Q

situaciones como traumatismos o infeccion el higado incrementa

A

la sintesis de proteinas como respuesta protectora para contribuir a limitar el daño y promover la reparacion

20
Q

en la reaccion de fase aguda incrementa

A

-concentracion toal
-propocion de las fracciones

21
Q

niveles normales

A

6.2-7.8 g/dL

22
Q

nivel normal de albumina

A

3.5-5.0 g/dL
55%

23
Q

nivel normal de globulina

A

2.0-2.5 g/dL
38%

24
Q

concentracion de fibrinogeno es

A

0.2-0.45g/dL
7%

25
Q

niveles bajos de proteina en sangre

A

hipoproteinemia

26
Q

hipoproteinemia puede deberse

A

-disminucion de la ingesta de proteinas
-absorcion intestinal deficiente
-disminucion de la sintesis proteica en enfermedades hepaticas, higadograso o desnutrcion

27
Q

debe identificarse algo medible que sea proporcional a la concentracion de

A

la sustancia de interes

28
Q

describe la tecnologia que se centra en la interaccion de los materiales biologicos con la luz y otras formas de energia radiante cuya unidad cuantica es el foton

A

biofotonica

29
Q

es la energia que viene de una fuente y puede viajar a traves de la materia o el espacio

A

radiacion

30
Q

en el espectro electromagnetio de la luz se observan los colores asociados

A

con las longitudes de onda de la luz visible

31
Q

la luz puede interactuar con las biomoleculas de varias maneras:

A

-reflexion
-absorcion
-transmision
-dispersion de luz

32
Q

establece que cuando un soluto absorbe luz de una determinada longitud de onda, la absorbancia es directamente proporcional a la concentracion del soluto en solucion

A

ley de beer

33
Q

las proteinas no absorben suficiente luz para

A

analizarlas por si mismas

34
Q

se basa en la absorcion de la luz en funcion de la longitud de onda

A

ensayo de bradford

35
Q

la eliminacion de estas longitudes de onda de la luz visible le da

A

al material su color

36
Q

el colorante coomassie brillant blue G-25 de la solucion de Bradford en su estado CATIONICO libre de proteinas presenta un colo ROJIZO debido a que el pico de absorcion de luz es de

A

470 nm (luz azul)

37
Q

las propiedades quimicas unicas del colorante le permiten interactuar con las cadenas lat, o grupos r, de aa especificos convirtiendo en una forma SIN PROTONAR de color AZUL debido a la eliminacion de longitudes de onda amarillas de la luz a

A

595nm por el complejo proteina-colorante

38
Q

a mas proteinas

A

mas intenso el color azul

39
Q

el ensayo permite medir los resultados

A

-cualitativamente: simple vista
-cuantitativamente: espectofotometro

40
Q

el ensayo de bradford es simple, altamente sensible (1ug/ml) y no se ve afectado por muchos reactivos y productos quimicos del lab a diferencia de otros ensayos colorimetricos como

A

biuret
lowry

41
Q

leucina

A

no polar
estructura peptidica
interaccion hidrofogiba

42
Q

no polares

A

leucina
triptofano
phenilalanina

43
Q

positivos

A

histina
argininca
lisina

44
Q

polar nuetro

A

tirosina

45
Q

el colorante se une a las proteinas mediante 3 tipos de interacciones

A

-principal: del colorante con proteinas con la arginina (muy basico) interactua con los grupos sulfato cargados negativamente a traves de interacciones electrostaticas
-otras: mas debiles
*interaccion con anillos aromaticos del colorante cromassie g-250 con los anillos aromaticosde aa como triptofano a traves de interacciones de pilamiento de electrones
-interactua con aa no polares que tienen grupo r hidrofobicos

46
Q

-principal proteina de la sangre
-tiene 609aa
-peso molecular: 67kda
-64 aa interactuan fuertemente con el cromassie g-250
*27arg
*2 triptofanos
*19tiro
*16 his

A

albumina humana

47
Q

-mucho mas grande que el aa tipico
-854daltos
-facil de visualizar
-pocas moleculas pueden unirse y recubrir una proteina tipica en solucion
-esta union es el principio del ensanyode bradfor

A

molecula del colorante coomassie

Biologia molecular lab (7 decks)

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