2.1- Les enzymes de restriction

Question 1

ADN recombinante

Answer 1

ADN retiré d’un ou plusieurs organismes et ressoudés (recombinés) à l’ADN d’une cellule hôte

Question 2

Protéine ou ARN recombinante

Answer 2

dérive d’un ADN recombinant

Question 3

vecteur d’ADN

Answer 3

molécule composée d’acide nucléique servant de véhicule capable de se répliquer dans une cellule hôte

Question 4

insert

Answer 4

molécule d’ADN recombinante

Question 5

Pocédure moléculaire

Answer 5

1. construction du vecteur+insert
   2.réplication et production de l’ADN dans des cellules hôtes pour générer du matériel
   3.purification et séquençage du fragment d’ADN (insert)
   4.insertion de l’ADN recombinant (vecteur+insert) dans le modèle cellulaire à l’étude
   5.analyses biochimiques et cellulaires

Question 6

enzymes de restrictions

Answer 6

endonucléases produites par des bactéries qui reconnaissent des régions à séquence spécifique (4 à 18 pb) et clivent les deux brins d’ADN au niveau de ces sites

Question 7

sites de restrictions

Answer 7

régions à séquences spécifiques (4 à 18 pb) reconnus par les enzymes de restrictions

Question 8

enzymes de modifications

Answer 8

protège l’ADN de la bactérie hôte du clivage, en le modifiant au niveau de chaque site potentiel ou a lieu l’activité endonucléase (ou près de celui-ci) en ajoutant un groupement méthyl à une ou deux bases, habituellement dans le site de restriction

Question 9

groupement méthyl

Answer 9

CH3 terminal

Question 10

bactériophage

Answer 10

virus qui infecte seulement les bactéries

Question 11

enzymes de restrictions type I et III

Answer 11

reconnaissent une séquence d’ADN spécifique et coupent en un endroit aléatoire, assez loin du site reconnu (jusqu’à quelques centaines de pb de loin)

Question 12

enzymes de restrictions type II et sous types

Answer 12

reconnaissent une séquence spécifique et coupent une partie spécifique de cette séquence
plupart reconnaissent et coupent dans un site palindromique spécifique
types IIa reconnaissent des séquences palindromiques et coupent à l’extérieur du site de restriction
type IIb coupent à chaque extrémité (5’ et 3’) du site de restriction

Question 13

enzymes de restrictions de type IV

Answer 13

ciblent seulement les ADN méthylés

Question 14

fragments cohésifs

Answer 14

fragments qui possèdent une queue ou une région débordante (overhang) aux deux extrémités
sont toujours complémentaires aux autres fragments produits par la même enzyme de restriction

Question 15

extrémités collantes/sticky ends/cohésives

Answer 15

régions simples brins des fragments cohésifs
peuvent s’apparier transitoirement aux extrémités des autres fragments caractérisés par les mêmes bouts

Question 16

extrémité simple brin débordante 5’ (overhang 5’)

Answer 16

bouts cohésifs qui débordent en 5’ ou 3’

Question 17

extrémités franches (blunt ends)

Answer 17

tous les nucléotides présents aux extrémités sont appariés à des nucléotides dans le brin complémentaire, donc aucun bout simple brin débordant

Question 18

fragments de restriction

Answer 18

ensemble de fragments coupés de façon reproductible à partir de l’ADN d’une origine par une enzyme de restriction

Question 19

carte génétique ou carte de restrictions

Answer 19

donne l’ordre et la fréquence des sites de restrictions le long d’une molécule d’ADN et la taille des fragments produits