zuivering van nucleïnezuren Flashcards
Depurinatie
Verwijderen van purinebasen (A+G) (apurinic site)
Blotting
Overbrengen van biomoleculen van een gel naar een membraan. Er zijn drie soorten: western blotting (eiwitten), northern blotting (RNA) en southern blotting (DNA)
Oligonucleotide
Een kort stukje DNA of RNA van 20 tot 100 basenparen lang.
Denaturatie
Ontrollen van 2 complementaire strengen van de dubbele helix. Wordt ook vaak het smelten van de DNA keten genoemd.
Renaturatie
= Hybridisatie. Kan doorgaan als de enkelstrengige ketens exact complementair zijn.
Subdenaturerende omstandigheden
Bij een temperatuur net onder de smelttemperatuur waarbij er dubbele helixen kunnen gevormd worden.
hybridisatie
Hechting van een complementair stuk DNA of RNA aan een enkelstrengige keten.
Smelttemperatuur (TM)
Temperatuur waarbij, onder invloed van temperatuursverhoging, 2 complementaire ketens voor de helft gescheiden zijn.
Ct
Cycle treshold. Maat voor de hoeveelheid startmateriaal.
Cq
Quantification cycle. Maat voor de hoeveelheid startmateriaal.
exonuclease
Een enzym dat de fosfodiësterbinding aan het eind van DNA verbreekt.
Endonuclease
Een enzym dat de fosfodiësterbinding in het DNA verbreekt.
Sticky ends
2 strengen DNA die niet even lang zijn aan het uiteinde na met restrictie-enzymen te hebben geknipt.
Multiple cloning site
Plaats op een plasmide waar veel restrictie-enzymen kunnen knippen en waar we vreemd DNA kunnen ligeren.