W6 Flashcards
contraction des cardiomyocytes
variation de l’activité électrique, potentiel PA, se propage, courants d’ions sodium, calcique, potassium
technique patch clamp principe
2 micro électrodes, 1 chargée - électrode de ref, une chargée + dans une micropipette
création d’une dépression, le patch partie de la cellule dans la pipette permet d’analyser les courants ioniques d’un canal,
en aspirant plus on rompt la membrane et c’est alors les courants ioniques cellulaire qui sont analysés
qu’est ce qu’un PA
variation potentiel spontané à travers la membrane
principe de la méthode CellOptiq
enregistrement à hauts débit des molécules fluorescentes transmembranaires qui selon le potentiel d’action varie en émission lumineuse
fabrication de micropipette
capillaires de verre très fins, très reproductible en taille et forme
mise en place de la technique patch clamp
matériel
microscope
système de perfusion locale en sérum physiologique
amplificateur
micromanipulateur électrique
table anti vibration
cage de faraday
mise en place de la méthode patch clamp,seal
obtention du seal
le terme “seal” fait référence à la formation d’une étanchéité hermétique entre le verre d’une microélectrode patch et la membrane cellulaire d’un neurone ou d’une cellule excitable.
celui ci est accentué par dépression de la pipette
configuration cell entière, continuité pipette milieu intracell
enregistrement de potentiel d’action par patch clamp
succession de PA pour une IPSc diff en cardiomyocytes
enregistrement de courants ioniques par patch clamp
plus la différence de polarité de la cellule et de son milieu extra augmente plus ont observe une augmentation du flux ioniques
analyse via CellOptiq
cells fluo
incubateur
selection de zone
enregistrement du signal
accès à l’échelle cell
analyser des ips
analyser effet de médoc
contraction musculaire
faisceaux fait de fibre fait de myofibrille fait de sarcomères
les cells myo sont multinuclée et entourée de sarcolemme, membrane cell
sarcomère compo
filament fin actine
filament épais myosine
la contraction résulte de mvmt d’ions calciques
pathologie musculaire
myopathie de duchenne
dystrophine fait le lien entre sarcolemme et actine et ls complexes protéiques, la dystrophine n’est plus expr
infarctus, la troponine utile à la contraction est libéré dans le sang est peu êtree doser pour connaitre la diagnostic cardiaque du patient
le proteasome
utile au renouvellement cell, dégrade puis recycle des constituants
il reconnait la chaine ubiquitines au moins 4 , la difère en peptides assemblage de quelques AA
partent au lysosome puis sont recyclés en acide aminés
autophagie
par enzyme de dégradation protéasome lysosome
role autophagie
maintien des grandes fonctions
équilibre synthèse et dégradation
turn over: renouvellement des constituants
fourniture de carburant
dégradation en composé de base et recyclage
influence du stress sur l’autophagie
augmente sous stress
réparation des dell et maintiens de grandes fonct
macro autophagie
macro autophagie
routage éléments du cytoplasme pour être digérés dans le lysosome, sert au turn over , lien etroit avec la mort cell, une vésicule se recourbent puis entraine alors le contenu dans un lysosome qui va le digérer
micro autophagie
invagination de la membrane d’ un lysososme
autophagie médiée par les protéines….
chaperonnes, ces prot prenent en charge la prot à dégrader vers un lysosome
pathologie assoc à l’autophagie
cancer
effets favorables, réparant la cell
effets défavorables: survie cell
risque de mort cell
déficit alpha 1 trypsine
Alzheimer
mitochondrie membrane ext
porine assure grande perméabilité
mitochondrie EIM
enzymes ions H+
mitochondrie membrane int
repliements protéines de la chaîne respi
protéine de la synthèse de l’ATP
mitochondrie matrice
cycle de krebs
génome mitochondrial
code génétique particulier, petit nombre de prot anomalie du génome mitochondiral, maladie musculaire
la production de l’énergie mitochondriale
consommer Oé et nutriments pour former de l’eau et du CO2 et de l’énergie
1molécule de glucose forme 36 molécules d’ATP through le cycle of krebs
étape du cycle de krebs
pyruvate en glucose
chaine respiratoire subit des transfert de H+
qui après avec l’ATP synthase forme de l’ATP à partir d’ADP
les transferts de H+ permettent aussi la formation d’eau
différents types de morts cells
nécrose: éclatement
autophagie excessive: digestion
apoptose: mort cell programmée, but éliminer les cellules indésirables
situation d’apoptose physiologique
vie embryonnaire: individualisation des dedos de la mano
adulte règles
situtation particulières infection pneuonie, globules blancs
Situations pathologique de l’apoptose
Trop
Hépatite virales aiguës
Maladies neurodegeneratives, Alzheimer, Parkinson
Pas assez
Cancer
Caractéristiques des cells en apoptose
Rétraction
Condensation chromatine
Maintien de l’intégralité de la membrane plasmique
Formation de corps apoptotiques: bulles qui se détache de la membrane
Si elle est complete
Digérés par les cells environnantes
Ne déclenche pas d’inflammation
Caractéristiques biochimqiues de l apoptose
Clivage des protéines, plus actives, comme les lamines
Pontage protéique: association de prot ne devant pas le faire
Clivage de l ADN
Modification de la membrane plasmique, phosphatidylserine sur le feuillet ext de la membrane alors que normalement int
Étapes de l’apoptose
Signaux ext
Changement intracellulaire
Phase d’exécution
Disparition de la cell apoptique
Signaux ext entraînant l’apoptose
Signaux chimiques, pénètrent la cellule
Ligands récepteurs de mort
Changements intracellulaires apoptose ( mitochindrie )
Canaux de la membrane ext
Canaux sur la membrane interne
Changements irréversibles
Phase exécution
Caspase
Sous formes active coupent les protéines environnantes
Cible le cytosquelette mais aussi prot de l ADN
Disparition de la cell apoptique
Digérée par les cells environnantes, pas inflammation
Sida
Infection des lymphocytes CD4
Apoptose des globules blancs infectés et non infectés