C8

Question 1

Etapes Western blot

Answer 1

1° migration par électrophorèse sur gel agarose puis coloration
2° transfert sur une membrane: feuille de nitrocellulose par capillarité
3° hybridation marqueur spécifique en plaçant dans un sac plastique fermé avec le marqueur, épitope qq AA d’une prot
4° révélation indirecte marqueur spécifique

certains Ac ne peuvent se fixer que sur la partie phosphoryler d’une protéine donan t alors des informations sur la régulation de la actividad

Question 2

intérêt de western blot

Answer 2

biologie moléculaire, détéction de prot spécifiques

Question 3

critères de séparation des protéines

Answer 3

poids moléculaires, SDS détergeant rendant la prot linéaire

Question 4

southern and northern blot

Answer 4

first allows us to study ADN, nowadays we mostly use PCR instead

the second one help us to study ARN and it has also been switched with a new method called RTpcr

but eventually they both have the same way to work, first migration, transfer, hybridation, ondes nucléiques useuellement ADNc marqué

Question 5

Elisa

Answer 5

Etapas:
1° fixacion de un Ac
2° ajout de l’échantillon
3° lavage
4° 2eme Ac marqué
5° Révélation, quantitative indirecte, gamme de la prot de concentration connue

Question 6

test rapide sur papier buvard

Answer 6

revelacion sin quantificacion
Ja eller Nej

Question 7

test virologique test pcr

Answer 7

test fiable de reference , positif jusqu’à une semaine après , permet de savoir si le patient est malade au moment du test

1 isolement
2 rétrotranscription
3 amplification spé de l’ADNc viral par PCR

POINTS positifs: détection et quantification, très sensible et spécifique

inconvénient
prix temps pas d’indication du stade de la maladie

Question 8

test antigénique

Answer 8

detection des prot du virus , Ac qui recherche la présence d’un antigène
test rapide sur buvard réponse oui/ non auto test en 15minutes sensibilité inf à la pcr
positif jusquà 1week before and after the infection

Question 9

test sérologique

Answer 9

ces anticorps depuis le plasma du patient
elisa sur un prélèvement sanguin fixe une prot virale dans le fond de la boite, un anticorps dirigé contre l’anticorps primaire

Question 10

quel test choisir

Answer 10

tests de dépistage diagnostic: test virologique et antigéniques
immunité infection antérieure: tests sérologiques

Question 11

rôle du lysosome

Answer 11

nutrition cellulaire: recyclage et phagocytose
renouvellement du contenu cell
mécanisme de défense contre les pathogènes

Question 12

maladies du lysosomes

Answer 12

génétique: absence d’enzyme le substrat s’accumulent, entrainant alors de possible anomalies
acquise:
-accumulation de matériaux non hydrolysables,
-pneumoconioses

Question 13

autophagie

Answer 13

routage du matériel jusqu’aux lysosomes pour son recyclage , process physiologique

rôle
la maintenance programme constitutif de l’homéostasie
survie stimulée
si dégats trop important stimulation des mécanismes d’auto réparation, augmentant le risque qu’une d’elle ne fonctionne pas en suit une apoptose

Question 14

mécanisme de l’autophagie

Answer 14

-membrane se recourbe
-cette membrane dorme un -autophagosome
-celui ci va se lier à un lysosome recoit alors les hydrolases qu’il N’AVAIT PAS JUSQUE LA
- dégradation du contenu internalisé

Question 15

autophagosome

Answer 15

mammifères: multi lamellaire dans 15% des cas c’est à dire 2 membranes ou plus

-apparition après 15min sans nutriments
-contient des organites ou du cytoplasme
-pas d’activité d’hydrolyse acide
-membrane lisse presque exclusivement lipidique
-provient probablement des RER ou REL

Question 16

devenir du contenu de l’autophagosomes

Answer 16

fusion avec pré lysosome et endosome, acidification, acquisition d’hydrolase active
fusion avec lysosome en 30 à 60 minutes

Question 17

sars cov 2 et autophagie

Answer 17

augmentation de l’autophagie utilisation donc utilisation d’inhibiteurs de l’autophagie chloroquine
diminution de l’autophagie