VL 9 Antikörper Flashcards
Lateral Flow Assay
Schwangerschaftstest
Polyklonale Antikörper
stammen aus einer Line, haben aber unterschiedliche Epitope, für das gleiche Antigen.
Sind heterogene Serumantikörper
Monoklonale Antikörper
abgeleitet von einem einzelnen Klon, spezifisch für nur eine Epitope.
Hybridem Technologie
folie 13
1) Tier immunisieren (Maus oder Kanninchen)
2) Milzzellen isolieren (enthalten Antikörper- produzierende B-Zellen)
3) Milzzellen mit Myelomzellen fusionieren (z.B unter Verwendung von PEG – Polyethylen- glykol)
4) nicht fusionierte B-Zellen absterben lassen
5) HAT medium hinzufügen, um unfusionierte Myelomazellen abzutöten
6) Verbliebene Zellen klonieren (1 Zell pro Kavität zur Kolonie anwachsen lassen)
7) Überstand jedes Klons nach gewünschtem Antikörper durchmustern (ELISA)
8) Ausgewählte Klone in Gewebekultur beliebig lange kultivierbar
9) Antikörper wird aus Überstand geerntet
Hybridem Technologie
folie 13
1) Tier immunisieren (Maus oder Kanninchen)
2) Milzzellen isolieren (enthalten Antikörper- produzierende B-Zellen)
3) Milzzellen mit Myelomzellen fusionieren (z.B unter Verwendung von PEG – Polyethylen- glykol)
4) nicht fusionierte B-Zellen absterben lassen
5) HAT medium hinzufügen, um unfusionierte Myelomazellen abzutöten
6) Verbliebene Zellen klonieren (1 Zell pro Kavität zur Kolonie anwachsen lassen)
7) Überstand jedes Klons nach gewünschtem Antikörper durchmustern (ELISA)
8) Ausgewählte Klone in Gewebekultur beliebig lange kultivierbar
9) Antikörper wird aus Überstand geerntet
HAT-Medium
wird genutzt, um unfusionierte MyolomaZellen! abzutöten.
Werden Gentisch verändert, (HGPRT-)
nur nach Fusion mit B-Zellen, können die Myelomazellen im HAT-Medium überleben.
AK Aufbau
2 SchwereKetten (4 Domänen) 2 Leichte Ketten (2 Domänen)
zusammen gehalten, von Disulfidbrücken.
Fc(Fragment Constant ) immer das gleiche
Fab: Fragmente für Antigenbindung
Ein AK kann simultan an beiden Fab binden.
Antigenbindung
sowohl schwere, als auch leichte Ketten haben 3 Schleifen.
Bilden eine Bindestelle mit 6 Schleifen aus, die für jedes Antigen anders ist.
AK in der Therapie
Problem der Humanisierung
( Gene austauschen )
-Mäuse stellen keine eigenen AK mehr her.
- Mäuse haben menschliche AK-Gene bekommen.
Rekombination
Zufällig eine rote, grüne gelbe blaue.