virusologie 2 Flashcards
Ciclul infecțios
- Atașarea si intrarea particulei virale
- Traducerea informației genetice
- Replicarea genomului
- Asamblarea particulei virale
- Eliberarea particulei virale
O celulă susceptibilă
-are un receptor funcțional
pentru un anumit virus
- celula poate sau nu poate
suporta replicarea virală
O celulă rezistentă
-nu are receptor
- poate fi sau nu
competentă să susțină replicarea virală
O celulă permisivă
-are capacitatea de a replica
virusul
-poate fi sau nu susceptibilă (prin transfecție)
O celulă susceptibilă ȘI permisivă
este celula care
permite intrarea particulei virale și care permite
replicarea particulei virale
virusuri cultivare
- La început, virusurile nu au putut fi cultivate în culturi celulare
- Majoritatea virusurilor au fost cultivate utilizând animale de laborator
-Ouă de pui embrionate (10-12
zile)
Efectul citopatic (CPE)
si incluziunile
DEFINITIE
-Modificări morfologice induse în celule individuale sau grup de celule de infecția cu virus (rotunjire, contracție, fuziune, agregare, pierderea aderenței, liză)
-Incluziile: sunt modificări mai subtile ale arhitecturii intracelulare a celulelor individuale
Factori de care depinde observarea CPE la virusurile animale
tipul de virus, cantitatea de inoculum
CPE importanta
-este foarte important pentru monitorizarea infectiei virale și deci pentru diagnostic
-Este foarte important de precizat faptul ca nu toate virusurile cauzează un efect citopatic. In consecință, pentru diagnosticul unei infecții virale trebuie să se utilizeze o alta metodă (testul formării de placi etc).
Plaque Assay
-Una dintre cele mai bune analize de infectivitate
* Probabil că este cea mai elegantă, cea mai cantitativă și cea mai utilă analiză biologică pentru virusuri
- este încă utilizată pentru a purifica un stoc viral
PFU/mL
Plaque-forming units pe mililitru
in cazut testului plaque assay, care este scopul stratului de agar semi-solid care se pune peste stratul monocelular de celule infectate
Monostratul cellular acoperit cu un strat
de agar pentru a oprii difuziunea virusului
De câte particle virale avem
nevoie pentru formarea unei placi?
- One-Hit (o linie)
- Two hits: (o curba)
One-Hit (o linie) :
- o particula virala este suficienta pentru a forma o placa
- numărul plăcilor este direct proporțional cu numărul particulelor virale
Two hits: (o curba) :
- mai mult de o particula viral este necesara pentru a forma o placa
- numărul plăcilor este direct proporțional cu pătratul concentrației virusului inoculat (genomul este împachetat in doua particule si deci este nevoie cele doua particule pentru infecție (virusurile plantelor)