Brainscape's Knowledge GenomeTM

Browse over 1 million classes created by top students, professors, publishers, and experts.


See full index

virusologie > LP 3 > Flashcards

LP 3 Flashcards

1
Q

Ce este cultura celulară?

A

Cultura celulară este procesul prin care celulele sunt crescute în condiții controlate, cel mai frecvent în afara mediului natural.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Aplicațiile culturilor celulare

A
  • virusurile și producția de vaccinuri
  • fiziologia și biochimia normală a celulelor
  • efectele medicamentelor și compușilor toxici asupra celulelor, mutageneză și carcinogeneză
  • screeningul și dezvoltarea medicamentelor
  • producerea pe scară largă a compușilor biologici.
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

TIPURI DE CULTURI
CELULARE

A
  • Cultura primară
  • Cultură celulară secundară
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Cultura primară

A

Cultura primară conține celule obținute direct din țesutul gazdă și proliferate în condițiile adecvate până când ajung la confluență. Se poate divide până la 5- 20 de diviziuni.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Cultura celulară secundară

A

Cultură celulară secundară Este subcultura celulelor primare. Se poate divide până la 5-20 de diviziuni.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

CARACTERISTICELE
CULTURII CELULARE

A
  • conțin celule normale care își păstrează memoria îmbătrânirii, prin urmare se pot divide de un anumit număr de ori limitat ( sunt cunoscute ca fiind finite)
  • sunt utilizate în principal pentru producția și testarea vaccinurilor și mai rar pentru infecția experimentală cu un virus
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

LINIA CELULARĂ

A
  • Conține celule anormale (tumorale) care se pot replica la nesfârșit (nemuritoare);
  • sunt aneuploide (cu un număr anormal de cromozomi);
  • Sunt cunoscute ca fiind continue;
  • Sunt utilizate pentru infecțiile experimentale virale.
  • Cele mai cunoscute linii celulare: HeLa și VERO
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Sisteme de creștere a culturilor/
liniilor celulare

A
  • cultură aderentă în monostrat (celulele aderă la substratul recipientului în car cresc)
  • cultură în suspensie (celulele plutesc în mediul de cultură)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Exemple de recipiente utilizate
pentru creșterea celulelor

A

Cultură aderentă în monostrat: flascuri, placi
Cultură în suspensie: STICLE ROTUNDE

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Morfologia culturilor celulare
- 3 categorii de bază

A
  • Celule fibroblastice (alungite, aderente)
  • Celule epiteliale (poligonale, aderente)
  • Celulele limfoblaste (sferice; plutesc în mediu de cultură)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

CONDIȚII DE CULTIVARE

A
  • Laboratorul pentru culturi celulare trebuie să fie minim BSL-2;
  • Pentru cultivare sunt esețiale:
  • Mediu de cultură;
  • Ph-ul;
  • Cantitatea de CO2 ;
  • Temperatura .
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

MEDIUL

A
  • cea mai importantă componentă pentru cultivarea celulelor;
  • furnizează nutrienții necesari, factorii de creștere și hormonii pentru creșterea celulelor;
  • Conține:
    > aminoacizi, glucoză, săruri, vitamine și alți nutrienți;
    > Indicator de pH.
  • Se adaugă:
    > Ser fetal bovin: conține factori de creștere;
    > Antibiotice (penicillin+ stereptomicină pentru a evita contaminarea bacteriană)
    > Antigungice (Amfotericină pentru a evita contaminarea cu fungi)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Cele trei clase de bază de medii sunt:

A
  • medii bazale ( conțin aminoacizi, vitamine, săruri anorganice și o sursă de carbon, cum ar fi glucoza)
  • mediu cu ser fetal bovin redus (sunt formulări ale mediilor bazale îmbogățite cu nutrienți și factori de origine animală, care reduc cantitatea de ser necesară)
  • mediu fără ser fetal bovin (înlocuirea serurilor animale cu formulări nutriționale și hormonale adecvate )
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

pH-ul

A
  • Culturile celulare de mamifere: pH 7,4.
  • Liniile celulare : pH 7,0-7,4.
    *Galben: contaminare, se schimbă mediul imediat; Portocaliu (pH=7) : se schimbă mediul în 24h; Roșu: totul este în regulă; Fucsia : se verifică cantitatea de CO2
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

CO2

A
  • Deoarece pH-ul mediului este dependent de echilibrul dioxidului de carbon (CO2), respectiv al bicarbonatului (HCO3–), modificările CO2 pot modifica pH-ul mediului.
  • Cantitatea CO2 este în general între de 5-7%.
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Temperatura

A

Pentru o creștere optimă:
- linii celulare umane și de mamifere: 36°C până la 37°C.
- Linii celulare de insecte: 27°C; cresc mai lent la temperaturi mai scăzute și la temperaturi cuprinse între 27°C și 30°C. Peste 30°C, viabilitatea acestor celule scade, iar celulele nu se recuperează nici după ce sunt readuse la 27°C.
- Linii celulare aviare: 38,5°C (de asemenea, la 37°C, dar cu creștere mai lentă).
- Liniile celulare derivate de la animale cu sânge rece (amfibieni, pești) tolerează o gamă largă de temperaturi între 15°C și 26°C.

17
Q

Contaminarea

A
  • cu bacterii
  • cu mycoplasma
  • cu fugi
18
Q

pentru a evita
contaminarea bacteriană

A

Se dezinfectează absolut tot ceea ce ar putea constitui o sursă de contaminare și se lucrează doar în hotă microbiologică de clasă II.

19
Q

Pasajul= Subcultura
celulelor aderente

A

Pasajul celulelor aderente se realizează când celulele au ajuns la 70-80% confluență (se verifică confluența la microscopul ranversat);
- se aspiră mediul de cultură;
- se spală flasc-ul cu PBS (soluție tampon fosfat salin) pentru a îndepărta serul fetal bovin (SFB) ;
- se adaugă tripsină și se incubează 5 minute la 37°C;
- se adaugă mediul de cultură nou;
- dacă se schimbă recipientul se aspiră din recipientul vechi un anumit volum de mediu cu celule, se mută în unul nou și se completează cu mediu de cultură.

20
Q

Pasajul celulelor în suspensie

A
  • Nu se agită recipientul cu celule înainte de pasaj;
  • Se adaugă mediul de cultură în flascul nou;
  • Se aspiră o parte din mediul de cultură din flasc-ul vechi pentru a concentra celulele ;
  • După agitare se aspiră o cantitate de mediu cu celule și se transferă în flascul nou.
21
Q

Numărarea celulelor

A
  • Se realizează un amestec între cultura celulară și albastru tripan (0,1 ml de soluție stoc de albastru tripan la 1 ml de celule);
  • Se adaugă din amestecul de mai sus o cantitate în camera hemocitometrică și se numără celulele la microscopul optic
22
Q

Ghid pentru menținerea culturilor
celulare

A

Vizualizarea celulelor la microscopul ranversat

23
Q

CRIOCONSERVAREA

A

Se realizează când celulele sunt:
- sănătoase,
- au confluență de 80%.
* Crioconservarea la -80ºC
* Crioconservarea în azot lichid ( -196ºC)

24
Q

linia Vero

A

Celule epiteliale renale de maimuță verde africană

virusologie (18 decks)

Brainscape helps you reach your goals faster, through stronger study habits.
© 2024 Bold Learning Solutions. Terms and Conditions