LP 6 Flashcards
două tipuri de teste de cuantificare virală
- teste biologice
- teste fizice
- Testele biologice
Infectivitatea (cantitatea de virus care poate
genera un ciclu infecțios complet)
- Testele fizice
cantitatea totală de virus și componentele sale
Teste biologice
* Sunt reprezentate de:
- Metoda Plaq Assay
- Metoda End Point
Metoda Plaq Assay cu bacteriofagi
- este important de reținut că, deși un număr extrem de mare de bacteriofagi va fi prezent în fiecare placă, placa provine din infectarea unei celule bacteriene de către un singur bacteriofag.
- fiecare placă apărută pe placa Petri reprezintă un bacteriofag.
- nu trebuie să apară plăci pe plăcile Petri utilizate ca și control și sunt neinfectate.
Cuantificarea cantității de virus prin inocularea virusului în :
- culturi celulare infectate- doză infecțioasă a culturii tisulare 50 (TCID50).
- animale de laborator sau ouă embrionate- doză infecțioasă 50 (ID50) doză letală 50 (DL50) sau doza infecțioasă 50 la ou (dacă animalele/embrionii mor)
Metoda Endpoint
= experiment de titrare a virusului care pot fi utilizat pentru a cuantifica titrurile de virus prin investigarea efectelor citopatice ale unui virus asupra unei culturi de celule gazda inoculate
* Metoda Endpoint oferă avantajul că pot fi cuantificate chiar și virusurile care nu formează plăci.
metoda Reed-Muench
formula
Testele fizice
* Sunt reprezentate de:
- Numărarea particulelor virale la microscopul
electronic - Hemaglutinarea
- Teste imunologice (ELISA)
- Teste cantitative PCR
Hemaglutinarea
= capacitatea unor virusuri de a se atașa de globulele roșii, de a le agrega.
* este utilizată pentru identificarea unor virusuri anvelopate (virusul gripal).
* nu poate determina cu precizie numărul de particule virale prezente într-o probă (adică, particule de virus/mL)