Virologisk diagnostik Flashcards

1
Q

Vad menas med indirekta diagnostiska metoder?

A

• Serologi

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Vad menas med direkta diagnostiska metoder?

A
  • Påvisande av viruset självt genom
  • Antigendetektion
  • Elektronmikroskopi
  • NAAT/PCR
  • Virusisolering
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Vilka är principerna för antigendetektion?

A
  • Kan användas för snabbtester
  • Snabbt - billigt
  • Utförs ex med metoderna immunflourescens eller ELISA
  • Har lägre sensitivitet jämfört med PCR
  • Sensitivitet och specificitet kan påverkas av provmaterialets kvalitet och ex mikroskopistens skicklighet (vid IF)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Vilka är fördelarna med virusodling?

A
  • Enda sättet att påvisa levande virus!

* Relativt hög diagnostisk sensitivitet

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Vilka är nackdelarna med virusodling?

A
  • Många virus går inte alls att odla! = begränsad sensitivitet
  • Långsam metod
  • Dyrt
  • Variationer i kvalitet
  • Ålderdomligt
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Vad är NAAT?

A
  • NAAT = Nucleic acid amplification techniques

* Exempel Realtids-PCR

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Principer för NAAT/PCR?

A
  • Kvantifiering korrelerar ofta till allvarlighetsgrad - mängd virus i provet/mängd utsöndrat virus
  • Hög sensitivitet och specificitet
  • Högt negativt prediktivt värde
  • Snabb analysmetod
  • Låg kostnad
  • Resultat är enkla att tolka
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Viktig nackdel med PCR diagnostik/molekylärbiologisk diagnostik?

A

• Mutationer hos viruset kan störa/sänka sensitiviteten!

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Vad är konvalecentserum?

A
  • Serumprov för antikroppsanalys taget 3-4 veckor efter insjuknande
  • Kvantitativ skillnad i antikroppsnivåer av IgM och IgG klass mellan akutprov och konvalscentserum ger diagnosen!
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Varför tar man både ett akutprov och konvalescentserum?

A
  • För att man inte kan dra några slutsatser om infektionsförloppet med ett enskilt värde för IgG i ett enstaka prov - kan bara konstatera att ”personen har varit i kontakt med viruset någon gång i sitt liv”
  • Det är skillnaderna mellan akutprovet och konvalescentserumet som gör att vi kan säga om det är primärinfektion eller reaktivering
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Serologiskt mönster vid primärinfektion?

A
  • Låg eller ingen förkomst av IgG i akutprov
  • Mer än 3 gångers ökning av IgG i konvalescentprov
  • Förekomst och nivå av IgM i akutprov eller konvalescentprov vid primärinfektion beror helt på när i förloppet det är taget! (normalt ska IgM vara högt)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Hur mycket ska IgG öka mellan akutprov och konvalescentprov för att man ska säga att personen har infekterats?

A
  • Tre gånger ökning av IgG mellan akutprov och konvalescentprov
  • Gäller för både primärinfektion och reaktivering
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Hur kan man påvisa att en primärinfektion har skett?

A
  • Förekomst av höga IgM titrar OCH/ELLER
  • Serokonversion
  • Närvaro av viralt antigen
  • Låg eller ingen förkomst av IgG i akutprov + Mer än 3 gångers ökning av IgG i konvalescentprov
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Hur lång tid tar det innan IgM blir postivt?

A
  • Efter ca 5-10 dagars infektion

* Varierar stort beroende på virus! CMV kan dröja 3 veckor! (?)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Hur länge kan IgM vara positiv?

A
  • Kan vara posititv mellan 6-12 månader efter det akuta insjuknandet
  • Varierar stort beroende på virus!
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Hur lång tid tar det innan IgG blir positivt?

A
  • Kan påvisas ca 1-6 veckor efter insjuknande

* Varierar stort beroende på virus!

17
Q

Vad är serokonversion?

A
  • Uppkomsten av antikroppar mot orsakande mikroorganism i blodet hos en person under pågående infektion eller immunisering
  • Först finns det inga - sedan finns det = utveckling av antikroppar har skett!
  • Används oftast för jämförelsen i antikroppstitrar/förekomst av antikroppar mellan ett akutprov och konvalecentprov
18
Q

Hur kan man påvisa förekomst av antikroppar?

A
  • ELISA, kemiluniniscens - provet inkuberas med antigen och reaktionen mellan antikropp och antigen påvisas genom färgomslag
  • Immunflourescens - prov inkuberas med celler som är infekterade med virus, om antikropp är närvarande kommer de att binda till cellerna, kan avläsas i mikroskop och antikroppsreaktionens specificitet kan bedömas
19
Q

Vad letar man efter vid direktpåvisning av virusantigen?

A

• Närvaro av proteiner tillhörande virus/delar av virus påvisas

20
Q

Vad innebär realtids-PCR?

A
  • PCR-produkten detekteras samtidigt som analysen körs!
  • Detektion sker genom avläsning av flourescens
  • Genom att registrera vid vilken amplifieringscykel som flourescensen når ett tröskelvärde (jämfört med en känd kontroll) vet man hur stor viruskoncentrationen i provet är!
21
Q

Vilka är fördelarna med serologi?

A
  • Golden standard för att definiera infektionsstatus med virussjukdom!
  • Differentierar mellan immunitet/tidigare infektion, aktuell infektion eller frånvaro av dessa
  • Snabbt
  • Billigt
  • Enkelt att ta fram provmaterial/provta serum/CSV
22
Q

Vilka är nackdelarna med serologi?

A
  • Antikroppssvaret kräver tid för att utvecklas
  • Beroende av individens immunförsvar - förmåga att bilda antikroppar
  • Korsreaktioner mellan snarlika virusantigen kan ge falskt positiva svar - ex HSV/VZV och Japansk encefalit/Dengue
  • Ospecifika korsreaktioner som ger falskt positiva svar vid sjukdom hos patienten ex mononukleos, SLE
23
Q

Vad undersöker Monospot? Hur fungerar det?

A
  • Analys för heterofila antikroppar mot EBV = antikroppar mot icke virusspecifikt antigen
  • God träffsäkerhet vid riktad misstanke ffa hos individer >12 år
  • Fungerar genom att heterofila antikroppar aggluttinerar röda blodkroppar från andra djurarter
  • Serologi för EBV har högst specificitet och ska användas i oklara fall!
24
Q

Vad är heterofila antikroppar?

A
  • ”antikroppar som bildats av en annan art än vad antigenet kommer ifrån”
  • Antikroppar riktade mot ett stort antal antigen
  • Förekommer ofta vid mononukleos
  • Är inte riktade mot Epstein Barr virus men är typiska för mononukleos
25
Q

Vilka antikroppar får man mot EBV?

A
  • Anti-EBV-VCA = capsid antigen/viruskapsidantigen

* Anti-EBNA = nuclear antigen/kärnantigen

26
Q

Hur ser serologin ut vid akut EBV-infektion?

A
  • Postitv EBV-VCA IgM
  • Anti EBV-VCA bildas tidigt i förloppet - strax efter heterofila antikroppar
  • Positiv Anti EBV-VCA är diagnostiska för akut EBV infektion
  • Positivt VCA-IgM och VCA-IgG i avsaknad av EBNA IgG är förenligt med en aktuell EBV-primärinfektion
  • Sjunker sedan inom ett par månader
  • Ospecifika korsreaktioner för IgM från herpesvirusgruppen förekommer!
27
Q

Vad betyder det att EBV-VCA IgG kunnat påvisas?

A
  • Att personen någon gång i sitt liv varit infekterad med EBV
  • EBV-VCA IgG kvarstår livslångt
28
Q

Vad betyder det att EBNA är postitiv?

A
  • Positiv EBNA betyder genomgången EBV infektion
  • Påvisande av IgG mot kärnantigen EBNA talar emot aktuell infektion
  • EBNA IgM och IgG bildas flera månader efter insjuknandet
  • EBNA IgG kvarstår livslångt