Ultracentrifugation Flashcards
À partir de quand les macromolécules commence à sédimenter?
Lorsqu’elles sont assujetties à des accélérations énormes.
Qu’est-ce qui est suffisant à garder les molécules dispersées de manière homogène en solution?
L’agitation thermique.
Quelle vitesse est-il possible d’atteindre dans les ultracentrifugeuses?
80,000 rpm
La vitesse avec laquelle une particule sédimente dans une ultracentrifugeuse dépend de quoi?
Sa masse.
À quoi s’oppose la force de sédimentation?
La force de friction.
Quelle est la formule de la force de sédimentation?
Fsédimentation = mω2r - Vpρω2r
Quand atteint-on la phase stationnaire?
mω2r - Vpρω2r = v f ou Fsédimentaire-Ffriction
À partir de quoi serait-il possible de déterminer la masse d’une particule?
De son coefficient de sédimentation et de son coefficient de friction.
Qu’est-ce qui utilise toujours l’ultracentrifugation?
L’analyse des complexes de macromolécules.
En quoi exprime-t-on la masse des constituants de ces complexes?
Svedberg (S)
Pour quel type d’échantillons utilise-t-on la centrifugation préparative?
Pour la préparation d’échantillons possédant des volumes significatifs.
La sédimentation de la centrifugation préparative est faite dans quel type de solution?
Inerte comme le saccharose
ou de chlorure de césium (CsCl) dans lesquels la concentration et donc la densité
augmente du haut vers le bas du rotor.
Qu’est-ce qui augmente de façon significative le pouvoir de
résolution de la centrifugeuse?
L’utilisation de gradients de densité.
Quelle est l’action de l’utilisation de gradients de densité?
Minimise l’agitation d’une solution par convection.
Quelles sont les deux application des gradients de densité?
- Ultracentrifugation zonale ou en zones
- Ultracentrifugation en gradient de densité à l’équilibre
Qu’est-ce que l’ultracentrifugation en zones?
Séparation des particules selon leurs coefficients de sédimentation et ceux de forme similaire selon leur masse.
Comment la solution de macromolécules est déposée dans l’ultracentrifugation en zones?
Sous forme de couche en haut d’un gradient de densité préparé au préalable.
Nomme moi une molécule qui peut être utilisée pour former le gradient dans l’ultracentrifugation en zone?
Le saccharose.
Dans l’ultracentrifugation en zones, chaque molécule se déplace à travers le gradient à une vitesse déterminée par quoi?
Par leur coefficient de sédimentation.
Comment récolte-t-on les fraction dans l’ultracentrifugation en zone?
Par l’insertion d’une aiguille au fond du tube de centrifugation et on collectionne le contenu du tube par un collecteur de fraction.
Quel est l’autre nom de l’ultracentrifugation par densité d’équilibre?
Centrifugation isopycnique
Que fait l’ultracentrifugation par densité d’équilibre?
Elle sépare les macromolécules selon leur densité. ex. acide nucléique, ribosome, virus.
Dans quoi est dissout l’échantillon de l’ultracentrifugation par densité d’équilibre?
Dans une solution concentrée d’une substance dense qui
diffuse relativement vite, et qui est subie à des hautes vitesses de rotation.
Qu’est-ce que le fort champs centrifuge génère dans l’ultracentrifugation par densité d’équilibre.
Un gradient important de sel.
Que fait le gradient de sel dans l’ultracentrifugation par densité d’équilibre.
Les composantes de l’échantillon se retrouvent en zone de densités égales à celle de la solution de sel.
Comment utilise-t-on les ultracentrifugeuses?
Crées un vacuum dans la chambre du rotor pour permettre d’obtenir de très hautes vitesses de centrifugation sans avoir la friction de l’air.
Qu’est-ce que les hautes vitesses lors de l’utilisation des ultracentrifugeuses peuvent créées?
Un échauffement des échantillons.
Comment peut-on éviter un échauffement des échantillon en utilisant les ultracentrifugeuses?
La chambre du rotor est réfrigérée.
