Terapias génicas Flashcards
Em _ foi mapeado o 1 gene associado à doença de Huntington.
1983
Explique no que consiste a terapia génica de substituição
- Passa por adicionar uma cópia do egne mutado ( corrigido) de modo a que este seja transcrito e traduzido a proteína funcional
Em que ano pensou-se utilizar vírus como terapia g+enia de substiuição?
1990
Qual foi o primeiro caso de sucesso?
- Criança que possuia uma imunodeficiência combinada severa
- Causada por uma deficiência na enzima adenosina desaminase ( indispensável ao desenvolvimento do sistema imune)
Distingue terapia in vivo de terapia ex vivo
In vivo- Introdução direta dos genes modificados
Ex vivo- Tiramos as células do paciente, fazemos a modificação e depois voltamos a inserir
Indentifique um tipo de “doença” que fazemos terapia ex vivo
ue
- Imunodeficiência
- Aspiramos a medula óssea
O que é um transgene?
Gene que foi artificialmente inserido por nós
Dá um exemplo de terapia in vivo
- Cegueira
Que tipo de vetores utilizamos para as seguintes situações:
1. Células em divisão
2. Células que naõ se dividem
- Vetores virais ( para serem capazes de introduzir o transgene e este ser passado para as células filha)
- Plasmídeos ( mantêm a informação no interior da célula, sem alterar o genoma)
O DNA introduzido na célula fica sobre a forma de _ e o que isso é?
- Epissoma
- Mistura de DNA viral+ DNA humano
O que é preferível utilizar?
1. Epissoma
2. Vetores virais
Porquê?
- Epissoma
* Este não tem perigo de ativar oncogenes
Que tipo de vetores virais se utilizava antes e que tipo de utiliza agora?
- Antes- Adeno-vírus
- Depois- Adeno-associated- virus
Indique 2 tipos de vírus que realizem a integração do gene no genoma de forma natural
- Retrovírus
- Lentivírus
Quantos tipos de AAV existem e o que os diferencia?
- cerca de 100 tipos
- proteínas da cápsula ( alteram o tropismo do vírus- afinidade/ interação)
Certas partes dos AVV podem ser removidas, que parte NÃO PODE OBRIGATORIAMENTE ser? Porquê?
ITRS
O DNA do AVV é:
1. cadeia dupla
2. cadeia simples
- Cadeia simples
O que é um palindroma?
Uma sequência de DNA de cadeia dupla que se lê da mesma forma numa determinada direção
O que as estruturas palindrómicas das ITRS conferem?
- Estabilidade e integridade do genoma viral
- Permitem que se forme cadeia dupla dos AVV
Os AVV não consegue, ter um genoma muito grande. Assim o que devemos realizar para introduzir DNA neles?
- Remoção de intrões
- Introduzir apenas cDNA
Os AVV são capazes de realizar splicing?
- SIM
O quê que é ainda adiciona ao genoma do vírus?
- Sequência reguladoras
- Promotores
- Sinal de Poly-A completo
- Sequencias intronicas( de modo a amplificar, não é necessário!)
Porquê que adicionamos um sinal de poliadenilação?
- o CDNA é “feito” a partir de mRNA ja poliadenilado, logo, apenas vai ter 1 parte da sequência de clivagem ( não é suficiente para saber onde tem que clivar)
A Atrofia muscular espinal é uma doneça rara, sendo a doença genética com maior causa de mortalidade infantil. Esta, está associada a uma mutação em que gene?
SMN1
A proteína codificada pelo SMN1 é essencial para quê?
- Neurónios motores
