Introdução

Question 1

Quais os 3 pontos da Teoria celular?

Answer 1

-A célula é a unidade básica, estrutural e funcional dos seres vivos;
-Todas as células provêm de células pré-existentes;
-A célula é a unidade de hereditariedade, reprodução e desenvolvimento dos seres vivos.

Question 2

Qual dos dois, possui atividade catalítica?
1- DNA
2-RNA

Answer 2

RNA

Question 3

Qual o tipo de ligações entre os nucleótidos?

Answer 3

Ligações fosfodiéster ( + estáveis, + fortes)

Question 4

Qual o tipo de ligações entre as bazes azotadas?

Answer 4

Pontes de Hidrogénio

Question 5

O que confere polaridade à molécula de DNA?

Answer 5

Se polimeralizada de 5’ para 3’ ( fosfato para hidroxilo)

Question 6

Define Nucleosídeo

Answer 6

Nucleótido sem o agrupamento fosfato- foi hidrolisado

Question 7

Define Gene

Answer 7

-Segmento de DNA que codifica informação, levando á produção de uma proteína ou de um RNA não codificante

Question 8

Quantos genes aproximadamente existe num humano?

Answer 8

De 20 000 a 25 000

Question 9

Define cromossoma

Answer 9

DNA+ proteínas ( histonas e não histonas)
Eucromatina + Heterocromatina

Question 10

Eucromatina vs Heterocromatina

Answer 10

Eucromatina- menos condensada
Heterocromatina- condensada

Question 11

Cromossoma Interfásico vs Cromossoma Mitótico

Answer 11

• Interfásio- + estendido, acessível a fatores de transcrição
• Mitótico- toda a cromativa se torna altamente compacta
  -dificil de distingui eucromatina de heterocromatina

Question 12

Tecnica de Fish

Answer 12

Sonda complementar à sequencia de DNA, marcada com uma cor fluorescente

Question 13

Define genoma

Answer 13

Sequência nucleotídica presente nos 46 cromossomas ( todo o DNA)
- constituído por cerca de 3,2x10^5 nucleótidos ( quando haploide)

Question 14

Fármacos Convencionais vs Fármacos Biológicos

Answer 14

Fármacos convencionais- têm por base reações químicas, não envolvendo qualquer tipo de organismos biológicos: aspirina

Fármacps Biológicos- para sua formação, é nesscário recorrer a células/ organismos vivos: Insulina ( 1 farmaco biológico do mundo)

Question 15

3 tipos de Fármacos Biológicos

Answer 15

1. Proteínas Recombinantes
2. Terapias Génicas
3. Terapias Celulares

Question 16

Porque que as proteínas recombinantes não podem ser admnistradas via oral?

Answer 16

• São biomoléculas, logo, seriam rapidamente hidrolisadas pelas enzimas do trato digestivo

Question 17

Existem genes que nao codificam proteínas, codificam o que?

Answer 17

tRNA, rRNA, microRNA ( RNA funcionais)

Question 18

Descreve o processo retrovirus para produção das proteínas recombinantes

Answer 18

1. trasncriptase reversa+ mRNA- origina cDNA
2. Origina-se a cadeia complementar do cDNA
3. Incorporação do cDNA num cromossoma para não ser degradado pelas enzimas de restrição
4. plasmídeo é clivado com enzimas de restrição
5. Adicionamos cDNA+ plasmídeo
6. Adicionamos DNA ligases+ Nucleótidos + ATP para reestabelecer as ligações
7. Replicação- no plasmídeo ocorre independentemente do restante DNA bacteriano

Question 19

O que são e o que fazem as enzimas de restrição

Answer 19

1. são endonucleases
2. clivam as ligaçoes fosfodiéster entre os nucleótidos

Question 20

Como é que as bactérias se protegem das suas prórpias enzimas de restrição?

Answer 20

Adicionam grupos metil às suas próprias enzimas

Question 21

3 características dos plasmídeos

Answer 21

1. capacidade de auto replicação
2. DNA circular
3. funcionam como vetores

Question 22

Plasmídeos de expressão vs Plasmídeos de clonagem

Answer 22

Expressão- contêm um promotor antes do local de policlonagem( local com seuqencias de reconhecimento para as enzimas de restrição) e vai permitir a ligação de um RNA para haver eventual produção de proteína

Clonagem- apenas para copiar o segmento introduzido
- nao possuem promotores

Question 23

O que utilizamos para desastibilizar a membrana plasmática e introduzir os plasmídeos novamente dentro das bactérias?

Answer 23

Ca2+- abre poros na membrana

Question 24

2 técnicas para nos certificarmos que os plasmídeos foram introduzidos corretamente

Answer 24

1. Adminstrar antibióticos
2. Eletroforese

Question 25

Após fazermos lise da membrana como é que distinguimos a nossa proteína de interesse?

Answer 25

1. Cromatografia de afinidade

Question 26

Descreva o processo da cromatografia de afinidade

Answer 26

1- adicionamos uma tag de aminoácidos á proteína de forma a que esta adira às parededes da matriz da coluna de afinidade
2- é adicionado niquel á matriz
3-as proteínas com afinidade ao níquel ficam retidas na matriz e o restante sai
4- utilizamos algo com ainda maior afinidade do que o niquel
5- as porteínas saem
6- utilizamos uma protease para separar a tag

Question 27

De que geralmente é a tag?

Answer 27

Histidinas- afinidade ao níquel

Question 28

Como é que uniformizamos a carga das proteínas?

Answer 28

Detergente- SDS

Question 29

O que fazemos para confirmar se temos a nossa proteína isolada e purificada?

Answer 29

Eletroforese

Question 30

Porquê que é importante uniformizar a carga das proteínas?

Answer 30

Porque, numa eletroforese, estas deslocam-se do polo - para o polo +, portanto têm que ser negativas