TEMAS 2 Y 3. MÉTODOS Y TÉCNICAS DE BIOLOGÍA CELULAR I Y II Flashcards
Pasos en la obtención y preparación del material
Fijación
Deshidratación
Corte
Congelación
Seccionar
Qué se usa más para la fijación de de una muestra
Formaldehído 3,7% en PBS o Paraformaldehído al 4% en PBS
Qué otras sustancias se usan para la fijación del tejido (5)
Acetona o metanol o alcohol de 96º
Solución de Bouin
Solución de Clarke
Carnoy
Glutaraldehído y tetraóxido de osmio
Qué se usa para el corte de una muestra y qué grosor suele tener
- Vibratomo
- 20 -200 micrómetros
Qué se requiere en la congelación de una muestra y para qué se usa
Glucosa para evitar la formación de cristales
Qué dispositivos se usan para seccionar un tejido
Microtomo (mo) o ultramicrotomo (me)
Qué células sintetizan las Ig
Linfocitos b y células derivadas de ellos
A qué tipo de inmunidad pertenecen las Ig
Inmunidad humoral, adaptativa, específica
Dónde están presentes las gamma-globulinas
En plasma sanguíneo y otros fluídos
Técnicas en las que se basa la inmunodetección (2)
Inmunohistoquímica
Inmunocitoquímica
Donde tiene lugar en reconocimiento del antígeno en las Ig
En los extremos de la cadena ligera y pesada
Tipos de anticuerpos no purificados (3)
Antisuero
Sobrenadante de cultivo celular
Líquido ascítico
Pasos de la inmunohistoquímica (2)
Desenmascaramiento del antígeno
Anticuerpos secundarios
Qué se usa en el desenmascaramiento de la inmunohistoquímica
Claro o sustancia proteolíticas
Tipos de microscopios óptica convencional (4)
Campo claro
Contraste de fase
Campo oscuro
Contraste de interferencia y Normanski
Cómo funciona en microscopio de contraste de fase
- Retraso de la liz cuando incide sobre estructuras tisulares en función de su densidad
- Para ver muestras vivas sin técnicas de tinción
Cómo funciona en microscopio de campo oscuro
Objeto opaco debajo del condensador
La muestra solo puede ser atravesada por los haces de luz que incidan en sentido oblicuo.
Cómo funciona el contraste de interferencia y Normanski
Filtros que polarizan la luz
Solo pasan ondas que vibran en un determinado plano
Uso de la inmunofluorescencia
Conjunto de técnicas diagnósticas para detección de Ac o AG en cel o tej mediante fluorocromos
Tipos de anticuerpos en la inmunofluorescencia
Anticuerpos primarios y secundarios
Microscopía de fluorescencia de campo amplio: qué recoge y cómo es la imagen
- Recoge luz de múltiples planos focales enfocados y desenfocados
- Imagen en bloque completo
Microscopía de fluorescencia confocal: qué recoge, cómo es la imagen y qué tipo de espejo usa
- Recoge luz de planos enfocados
- Mejor calidad de imagen
- Espejo dicroico
Tipos de microscopía electrónica
- de transmisión
- de barrido
Cómo funciona la microscopía electrónica
Imanes que concentran los haces de electrones emitidos por un filamento
