Tecnicas histopatologicas avanzadas Flashcards

Question

Selección semifinas en ME

Answer 1

Se realizan secciones o cortes semifinas de espesor de 1 micra y se tiñen con azul de metileno o azul de toluidina.

Answer 2

Se realizan cortes para ver el examen ultraestructural, los cortes ultrafinos se cortan con un bisturí de diamante lara ser más preciso en los cortes. Con el fin de aumentar la densidad de los electrones, las secciones delgadas se pueden teñir haciendo inmersión de la rejilla en una solución de citrato de plomo y urinyl acetato.

Answer 3

● Dificultades en el muestreo, y que sólo una pequeña proporción de la neoplasia o del tejido a procesar, puede ser estudiado. ● La escasez de características ultraestructurales verdaderamente específicas, ya que el número de orgánulos u otras estructuras que son exclusivos de un tipo de célula o tejido es muy pequeña. ● Posible interpretación errónea de elementos no neoplásicos como pertenecientes al tumor. Ciertamente, esta posibilidad existe con cualquier técnica, pero es particularmente notable con microscopía electrónica debido a las dificultades en la evaluación de las relaciones espaciales en una pequeña muestra de tejido.

Answer 4

Esta generalmente se ocupa en las nefropatías por IgA donde se van a ver áreas del mesangio donde se pueden observar los depósitos que se ven en el mesangio.

Answer 5

Otro avance que se está haciendo actualmente es la microscopía virtual. En la cual se dan escaneados de los preparados histológicos los cuales utilizan un escáner de muestra automatizados de alta resolución podrá crear archivos virtuales que serán evaluados por la red de computadoras para su visualización remota.

Answer 6

es un estudio de los cromosomas. Por medio de este se puede diagnosticar enfermedades en los cromosomas. En genética los 5 síndromes más importantes de trastornos cromosómicos son: síndrome de Down, trisomía 21, trisomía 18, trisomía de los cromosomas sexuales como síndrome de Klinefelter y síndrome de Turner.

Answer 7

El cariotipo es el conjunto de cromosomas de una célula. Si cuando una célula está en metafase se realiza una preparación y se fotografían sus cromosomas y se ordenan, siguiendo determinados criterios, obtendremos el ideograma de un cariotipo. Al observar el ideograma de un cariotipo podemos ver que los cromosomas están por pares de homólogos. Esto es, tenemos dos juegos de cromosomas (2n cromosomas). Un juego aportado por nuestra madre en el óvulo y el otro por nuestro padre en el espermatozoide. Los cariotipos son muy útiles pues permiten detectar las mutaciones cromosómicas. Estas mutaciones pueden ser la causa de graves alteraciones o predisposiciones de cáncer.

Answer 8

● Se toma sangre periférica y se separan los glóbulos blancos. ● Se incuban en presencia de productos que inducen a la mitosis como la fitohemaglutinina. ● Se detiene la mitosis en la metafase (utilizando colchicina, que interfiere con los microtúbulos del huso). ● Se rompen las células por choque osmótico introduciéndolas en un medio hipotónico. ● Se deposita una gota de la preparación entre porta y cubre (sobre el cual se hace presión). ● Se fijan, colorean y fotografían los núcleos estallados. ● La foto se amplifica y los cromosomas se recortan y se ordenan para poder ver las bandas cromosómicas.

Answer 9

El tratamiento de los cromosomas con determinadas sustancias revela la presencia en estos de bandas, en ciertos lugares fijos para cada cromosoma, que sirven para reconocerlos e individualizarlos. De esta manera es más fácil ordenarlos y hacer un ideograma

Answer 10

Es una técnica que se utiliza para detectar y diagnosticar metástasis tumorales, diferenciar los subtipos o diferentes estirpes tumorales y sus etapas de diferenciación, también sirve para el diagnóstico de enfermedades infecciosas, para identificar microorganismos en la sangre y en los líquidos de los tejidos. En estudios clínicos también se ha utilizado anticuerpos monoclonales conjugados con inmunotoxinas, fármacos de quimioterapia o radioisótopos para administrar agentes terapéuticos a las células tumorales específicas en el cuerpo, como medicina de precisión. a inmunohistoquímica (IHQ), inmunocitoquímica, cuando se realiza en un estudio frotis o en un extendido citológico, es un método para localizar antígenos específicos en tejidos o células basados en el reconocimiento antígeno-anticuerpo. Esto corresponde a un grupo de técnicas de inmunotinción que permiten demostrar una variedad de antígenos presentes en las células o tejidos utilizando los anticuerpos marcados. Esta técnica se basa en la capacidad de los anticuerpos de unirse específicamente a los correspondientes antígenos, y esta reacción solamente será visible si el anticuerpo está marcado con una sustancia que va a absorber o emitir luz y produce una coloración que se observará bajo el microscopio óptico.

Answer 11

es una molécula que tiene la propiedad de combinarse específicamente con una segunda molécula, denominada antígeno. es una proteína de suero o inmunoglobulina que se forma en respuesta a la invasión de una sustancia ajena al cuerpo y al unirse a esta le confiere protección al organismo, ya sea una proteína extraña o un antígeno que esté dentro de nuestro cuerpo.

Answer 12

es cualquier sustancia que es capaz de inducir la formación de anticuerpos cuando se introduce en un organismo, relacionado específicamente con los anticuerpos que son formados.

Answer 13

es una molécula que tiene la propiedad de combinarse específicamente con una segunda molécula, denominada antígeno. es una proteína de suero o inmunoglobulina que se forma en respuesta a la invasión de una sustancia ajena al cuerpo y al unirse a esta le confiere protección al organismo, ya sea una proteína extraña o un antígeno que esté dentro de nuestro cuerpo

Answer 14

Los anticuerpos consisten en dos unidades básicas. Está constituido por: ● Cadenas pesadas, que pueden ser gamma, alfa, mu, delta o épsilon. ● Cadenas ligeras, que pueden ser kappa o lambda. Se tiene la fracción constante y la fracción variable.

Answer 15

Hay dos tipos de anticuerpos usados en la técnica de inmunohistoquímica: ● anticuerpos policlonales: son producidos por animales inmunizados. ● anticuerpos monoclonales: son producidos por líneas celulares, los cuales van a producir un único antígeno de una proteína.

Answer 16

KOHLER Y MILLSTEIN (1975) `

Answer 17

● POLICLONALES: mezcla anticuerpos contra diferentes antígenos de una misma proteína. ● MONOCLONALES: cuando mezcla anticuerpos contra un único antígeno de una proteína

Answer 18

- Los anticuerpos obtenidos son homogéneos - No se requiere de antígenos purificados para las inmunizaciones, a pesar de ello se obtienen antígenos de gran pureza. - Los cultivos permanentes pueden proporcionar el anticuerpo de manera ilimitada

Answer 19

El principio está basado en la presencia de sustancias antigénicas que se albergan tanto en la membrana citoplasmática, el citoplasma, como en el núcleo celular. Dependiendo de esto nos dará una tinción específica en el tejido evaluado al momento de que se esté observando la lámina bajo un microscopio óptico.

Answer 20

● Fluorocromo, en la inmunofluorescencia. ● Enzima, en la inmunohistoquímica por la inmunoperoxidasa. ● Metales pesados. ● Isótopo radiactivo, lo cual le da el color característico al tejido evaluado.

Answer 21

● Clasificación de neoplasias: linfoides/ hematológicas. Para determinar la estirpe de la neoplasia cuando no se logra reconocer simplemente,morfológicamente o por histología al evaluar una lámina teñida con hematoxilina-eosina bajo un microscopio, también para determinar si la neoplasia es un carcinoma, una neoplasia hematolinfoide, una neoplasia mesenquimal, o si es de una estirpe nerviosa. ● Identificación de neoplasias de origen primario desconocido. No se conoce el origen del cual nació o creció el tumor. Si se está evaluando un tejido metastásico y se quiere determinar el sitio primario o sitio de origen de la neoplasia, se mandan antígenos o anticuerpos específicos que nos darán una tinción en el tejido evaluado específico, y nos va a orientar que la neoplasia deriva de un órgano específico. ● Identificación de sobre-expresión de proteínas asociadas a translocaciones. ● Identificación de blancos terapéuticos. En esta era se utilizan muchos anticuerpos que están dirigidos para la inestabilidad microsatelital, la cual le sugerirá al oncólogo el tratamiento o un fármaco específico para este tipo de anticuerpo que se vio demostrado en las coloraciones de la histoquímica. ● Infecciones. Se demuestra la presencia de agentes infecciosos. ● Caracterización de sustancias extracelulares, como la presencia de amiloides que pueden ser demostrados por técnicas de inmunohistoquímica.

Answer 22

● Proteínas estructurales: ○ Citoesqueleto: citoqueratinas (CK), proteína ácida fibrilar glial (GFAP) ○ Uniones intercelulares (E-cadherina, B-catenina) ● Proteínas asociadas a vesículas secretoras: ○ Anticuerpo cromogranina A, sinaptofisina, CD68. ● Receptores: ○ HER2, factor de crecimiento epidérmico tipo 1(EGFR1), receptor de estrógeno (RE), receptor de progesterona(RP) ● Factores de transcripción/ ciclo celular: ○ P53, Ki67, factor de transcripción tiroideo (TTF1), PAX5, miogenina. Dependiendo de la marcación que presente el anticuerpo, este se verá en el tejido preparado bajo el microscopio óptico.

Answer 23

En el anticuerpo CDX2 se ve que están pintados de un marrón oscuro los núcleos. En el PAX-5 se mira la presencia de la tinción y el Ki-67 es un índice de proliferación donde vamos a ver la marcación nuclear de ese tipo de anticuerpo en la técnica de inmunohistoquímica.

Answer 24

La E-cadherina pintará solamente el borde de la membrana con la tinción de cromógeno desde color marrón oscuro. CD30 se puede presentar en las membranas y en el aparato de Golgi cuando se está evaluando las células de Reed-Sternberg (es un linfoma de Hodgkin).

Answer 25

Se miran marcaciones de mitocondrias con cromógeno, que es depositado en las reacciones de Ag-Ac. El CD68 tiene su marcación citoplasmática generalmente en histiocitos. El citoplasma y el núcleo como la proteína S-100 se van a depositar o servir para hacer diferenciación de estirpe nerviosa.

Answer 26

se emplea para localizar moléculas de antígeno en las células por el examen microscópico. Esto se hace mediante el uso de anticuerpos específicos contra la molécula antigénica, formando así un complejo antígeno-anticuerpo en el sitio antigénico específico que se hace visible mediante el empleo de un fluorocromo (generalmente la fluoresceína) que tiene la propiedad de absorber la radiación en la forma de luz ultravioleta de manera que sea visible dentro del espectro de la luz en el examen microscópico y se observará del color verde característico.

Answer 27

fluoresceina

Answer 28

1. Microscopio de fluorescencia 2. Fuente de luz 3. Filtros 4. Condensador

Answer 29

Se basa en el principio de que la radiación de excitación de la luz ultravioleta de longitud de onda más corta (360 m) o la de la luz azul (Longitud de onda 400 m) provoca la fluorescencia de ciertas sustancias y posteriormente re-emite luz de una longitud de onda más larga. ● Fluorescencia primaria: sustancias fluorescentes de forma natural, también llamado autofluorescencia. Siempre se requerirá de la luz ultravioleta para visualizar el color verde característico. Ejemplo: vitamina A, porfirina, clorofila. ● Fluorescencia secundaria: se utiliza el fluorocromo, que es una molécula capaz de absorber fotones y de emitir fotones de menor energía o de mayor longitud de onda, las cuales se van a ver con la luz ultravioleta de color verde. Es la producción de fluorescencia tras la adición de colorantes o productos químicos denominados fluorocromos.

Answer 30

Lámparas de vapor de mercurio y gas xenón

Answer 31

Los utilizados son el filtro de absorción de calor, filtro de stop de luz roja, filtro excitador. La luz excitadora es removida por otro filtro llamado filtro de barrera, el cual se encuentra entre el objetivo y el observador.

Answer 32

Se utiliza un condensador de campo oscuro de manera que la luz no cae directamente en el objeto y en cambio da fondo oscuro que hace contraste con la fluorescencia, lo que dará el color característico verde.

Answer 33

fluoresceína, rodamina, rojo Texas.

Answer 34

Metodo directo e indirecto

Answer 35

Introducido por primera vez por Coons (1941). El tejido produce directamente una reacción Ag-Ac, generalmente usando inmunofluorescencia. Se utiliza un anticuerpo específico frente al antígeno, siempre conjugado con un fluorocromo, y esto nos dará la reacción en el tejido.

Answer 36

Se aplica para detectar autoanticuerpos en el suero del paciente. Estos anticuerpos primarios específicos no marcados frente al antígeno humano cuando incitan la reacción, se añade después un segundo anticuerpo marcado con el correspondiente fluorocromo que reacciona de forma específica con el anticuerpo primario. Esta técnica es más sensible y permite utilizar un único anticuerpo secundario conjugado con fluorocromo frente a muchos antisueros primarios.

Answer 37

● Detección de autoanticuerpos en el suero, como en enfermedades como lupus eritematoso sistémico. ● En enfermedades renales para la detección de depósitos de inmunoglobulinas, complemento y fibrina, como en las glomerulopatías. ● En enfermedades de la piel para detectar depósitos de inmunoglobulina. ● Para el diagnóstico específico de los trastornos infecciosos, por ejemplo, el virus de la hepatitis. detección de agentes infecciosos, como las hifas de la ● Cándida albicans, el virus de la gripe H1N1, tripanosomas y Mycoplasma pneumoniae. ● biopsias de piel, para ver depósitos de IgG intercelular en el pénfigo vulgar, o también pueden observarse otros depósitos en las uniones en dermoepidérmicas o en la dermis superior, y así poder ver diferentes enfermedades de la piel, haciendo la correlación de la sustancia evaluada con un microscopio de fluorescencia.

Answer 38

pénfigo.`

Answer 39

TÉCNICAS DE HIBRIDACIÓN HIBRIDACIÓN IN SITU CON FLUORESCENCIA REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)

Answer 40

Es un método de biolocalización de ARN mensajero o ADN mediante la hibridación de las secuencias de interés con una sonda de nucleótidos acompañados de una secuencia complementaria. El término hibridación describe la capacidad de las moléculas monocatenarias de ARN o ADN para interactuar o hibridar con secuencias complementarias.

Answer 41

● En neoplasias: hematológicas y no hematológicas. ● En enfermedades agentes estudios e identificación de nuevos agentes infecciosos. ● En enfermedades genéticas heredadas: Prueba de portador, diagnóstico prenatal y diagnóstico directo de la enfermedad genética. ● Determinación de identidad: trasplante de tejidos, patología forense y test de parentesco.

Answer 42

Siempre utilizando un cromógeno como el fluorocromo, esto permite la detección y localización de secuencias de ácidos nucleicos en estructuras biológicas morfológicamente conservadas. En 1969, en la universidad de Yale desarrollaron un protocolo el cual llamaron hibridación in situ, y este se utilizó para la localización del ADN satélite. El término in situ hacer referencia al lugar o en el lugar, y se refiere al hecho de que el ADN del cromosoma se mantiene en el sitio mientras se permite que reaccione con una preparación particular de ADN marcado llamado sonda de ADN que se marcó de forma reactiva y se identificó por medio de una autorradiografía.

Answer 43

● Infecciones virales: herpes simple (HPV), Epstein Bar (EPB), virus de la inmunodeficiencia humana (VIH), citomegalovirus (CMV). ● En tumores humanos (detección de la expresión de genes y oncogenes). ● Desórdenes cromosómicos.

Answer 44

La PCR constituye un sencillo método para la clonación in vitro de cualquier segmento de ADN, sin necesidad de recurrir metodología convencional.

Answer 45

● Amplificación de DNA para clonación o análisis ○ Investigaciones criminales ○ Investigación fósil ○ Secuenciación de ADN ● Pruebas para la presencia de secuencias de DNA específicas. ● Comparación de moléculas ○ Trastornos hereditarios. ○ Enfermedades genéticas adquiridas. ○ Medicina forense y legal. ○ Detección de patógenos infecciosos. ○ Enfermedades monogénicas.

Answer 46

Se utiliza en células aisladas para cuantificar el ADN nuclear. Esta técnica utiliza instrumentos capaces de rastrear células individuales que fluyen ante un detector en un medio líquido. Esta técnica permitirá un análisis cuantitativo rápido de una célula individual sobre la base de una medición de la luz fluorescente que está emitirá. La técnica de citometría de flujo consiste en la medición de diversos parámetros, mientras que una suspensión de células fluye a través de un haz de luz detectores estacionarios últimos. El instrumento se enfoca hidrodinámicamente a una suspensión de células en una cámara de muestra y pasa a las células individuales a través de una fuente de luz, generalmente un láser. La luz dispersada en varios ángulos por las células es registrada por los detectores y se convierte en señales electrónicas, que luego son digitalizadas, almacenadas y analizadas por el ordenador para producir un histograma . Esta técnica permite el análisis de 5000-10000 células por segundo. La citometría de flujo puede ser utilizada para analizar la ploidía del ADN.

Answer 47

diploides y aneuploides.

Answer 48

índice de ADN (DI)

Answer 49

Tumores tetraploides

Answer 50

La fracción hiperdiploide

Answer 51

es que las células necesitan estar en una única suspensión de células con el fin de ser analizado. Este requisito se consigue fácilmente cuando la célula está en suspensión en sangre y otros fluidos. De hecho, el análisis de citometría de flujo de las leucemias y linfomas se ha convertido en rutina.

Answer 52

Para ser justos, es preciso señalar que el papel de la citometría de flujo en el diagnóstico inicial de los tumores es bastante limitado. Su función principal parece ser como un indicador pronóstico, ya que la vasta literatura sobre el tema indica. La categoría de tumores que han sido evaluados con mayor intensidad son el carcinoma de mama en las técnicas de citometría de flujo, el linfoma no Hodgkin, los carcinomas de vejiga, carcinoma de próstata, neoplasias endocrinas, sarcomas de tejidos blandos, y presuntos embarazos molares.

Answer 53

● Determina o corrobora la naturaleza de la enfermedad, así como su extensión. ● Investiga la causa principal o básica de muerte y aquellos procesos contribuyentes. ● Estudia los procesos secundarios o asociados y los accesorios. ● Correlaciona signos y síntomas clínicos de la enfermedad con los hallazgos morfológicos terminales. ● Comprueba los resultados de la terapéutica médica o quirúrgica. ● Investiga, en su caso, aquellas enfermedades contagiosas, hereditarias o transmisibles.

Answer 54

● Muertes en las que la autopsia pueda ayudar a explicar las complicaciones médicas existentes. ● Todas las muertes en las que la causa de muerte o el diagnóstico principal (padecimiento fundamental) no sea conocido con razonable seguridad. ● Casos en los que la autopsia pueda aportar a la familia o al público en general datos importantes. ● Muertes no esperadas o inexplicables tras procedimientos diagnósticos o terapéuticos, médicos o quirúrgicos. ● Muertes de pacientes que han participado en protocolos hospitalarios ● Muertes aparentemente naturales no esperadas o inexplicables, no sujetas a la jurisdicción forense. ● Muertes por infecciones de alto riesgo y enfermedades contagiosas. ● Todas las muertes obstétricas. ● Todas las muertes perinatales y pediátricas. ● Muertes por enfermedad ambiental u ocupacional. ● Muertes de donantes de órganos en los que se sospeche enfermedad alguna que pueda repercutir en el receptor. ● Muertes ocurridas en las primeras 24 horas del ingreso en el hospital y/o en aquellas que pudieran estar influidas por su estancia hospitalaria.

Answer 55

- CLINICA - JUDICIAL O MEDICO-LEGAL

Answer 56

Son las autopsias de pacientes que fallecen por causas naturales o por una enfermedad. La autopsia confirma o, en su caso, determina el padecimiento fundamental, las alteraciones secundarias al mismo y aquellas otras derivadas del tratamiento, describe los hallazgos accesorios asintomáticos, silentes clínicamente, e investiga la causa de muerte. Este tipo de autopsias las realiza un médico anatomopatólogo.

Answer 57

Las sometidas a un proceso judicial. El principal objetivo de la autopsia judicial es establecer la causa de muerte, muchas veces en circunstancias violentas, extrañas, poco claras, sospechosas de criminalidad. Este tipo de autopsias las realiza un médico forense, y el patólogo, a instancias de aquél, puede erigirse en consultor. Este tipo de informes o estudios forman parte, pues, de los denominados genéricamente "interconsultas".

Answer 58

- Letulle - Mata - Virchow - en T

Answer 59

Técnica de Letulle:

Answer 60

Técnica de Mata:

Answer 61

Técnica de Virchow:

Answer 62

Técnica en T:

Answer 63

● Informe provisional: 48 horas. ● Informe final: 1 mes.

Answer 64

● Método de Virchow: Se basa en la extracción de órganos de forma individual lo cual requiere elevados conocimientos anatómicos. ● Método de Rokitansky: Se basa en la extracción de órganos en bloque lo cual requiere un examen previo in situ.

Answer 65

Debe de incluir portada, descripción macroscópica de los hallazgos, exámenes de laboratorio postmortem, descripción microscópica con interpretación de tinciones de histoquímica e inmunohistoquímica requeridas si el caso aplica, y por último un listado de diagnósticos anatomopatológicos.