Técnicas de secuenciación Flashcards
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Hibridación
Unión de dos moléculas de dna debido a su COMPLEMENTARIEDAD de bases.
Secuenciación de Sanger (1977)
Nucleótidos terminadores (ddNTPs) con marcadores irradiados y fluorescentes.
Pirosecuenciación (1996)
Pirofosfatos (Ppi) fluorescentes que brillan cada que se unen a la cadena, tienen colores específicos para cada base. Los nucleótidos que no se unan serán degradados por apirasas. En esfera.
Illumina Solexa
Se fragmenta el ADN, luego se colocan adaptadores en una lámina para formar la librería de nucleótidos. Se van amplificando en forma de PUENTE y se detecta mediante fluoróforos y lasers.
IonTorrent
Se fragmenta el ADN, se coloca en microesferas mediante adaptadores y se amplifica por PCR. El pH y voltaje determinará que nucleótido se agrega.
Métodos para fragmentación del ADN
Sonicación (ondas), Enzimático (enzimas de restricción)
Definición de secuenciación
Metodología basada en métodos bioquímicos para la determinación del orden de bases nitrogenadas en la cadena de ADN.