T7 Flashcards
cycle de t7
lytique
L’ARN polymérase de T7 a été utilisée pour diriger l’expression dans de nombreux vecteurs d’expression de protéines
ok
4
ok
-les virus de type T7 sont des virus classifiés dans la famille _____ dans l’ordre ____
Podoviridae
Caudovirales
tous les podovirus codent pour
une ARN polymérase à une seule sous-unité
on n’a jamais trouvé un phage de type T7 qui infecte des bactéries à Gram positif
ok
La capside a un diamètre de ___ , est de forme icosaédrique et est composée principalement de la protéine ___
~60 nm
gp10
Le génome de T7 occupe ___ du volume de la tête et est ___
~45%
enroulé
autour du noyau central
La queue se rattache à la capside par ___
l’un des sommets icosaédriques
____ est un canal ouvert qui permet à l’ADN viral de quitter la capside
au cours de l’infection
Le portail
Le diamètre interne du portail fait environ
le même diamètre qu’un brin d’ADN double brin
Les virus T7 ont des queues courtes (20nm x 8nm), non contractiles et qui
sont moins complexes que celles de T4
ok
Les _____ , composées de la protéine __ , sont attachées à la partie supérieure de la queue
six fibres caudales
gp17
Le génome de T7 est plus petit que celui des Myoviridae ____
(~40 000 pb)
Le génome code pour ___ genes connus ou potentiels
60 gènes
Le génome contient aussi des séquences de paires de bases répétées à chaque extrémité, mais
beaucoup plus courtes que chez le T4 (~160 pb)
Le génome ne _____ pas
L’ADN de T7 ne contient pas ___
se circularise
de bases nucléotides modifiées
13
ok
_____ de T7 reconnaît les LPS des
bactéries à Gram négatif.
L’extrémité C-terminale des fibres caudales
15-16-17
OK
Une fois que le canal est formé, seulement___ du génome viral
pénètrent dans la cellule
Cette partie du génome contient ___
850 pb
des promoteurs forts qui sont reconnus par l’ARN polymérase de l’hôte
l existe 2 types de promoteurs:
Ceux qui sont reconnus par l’ARN polymérase d’E. coli. Ceux qui sont reconnus par l’ARN polymérase virale
21-22
OK
Il existe 3 classes de gènes durant la synthèse des protéines T7:
Gènes de classe I:
-
sont synthétisés de 2 à 8 minutes après le début de l’infection
- servent à créer des conditions favorables dans la cellule pour le développement des phages
- sont transcrits par l’ARN polymérase d’E. coli
Les premiers transcrits codent pour:
- des protéines qui inhibent certaines enzymes de restriction cellulaires («cellular restriction enzymes»)
- l’ARN polymérase T7
arn pol de t7
Enzyme à une seule sous-unité de 883 acides aminés
Le taux de synthèse d’ARNm par la polymérase de T7 est ____ que celui de l’enzyme d’E. coli.
5 fois plus rapide
Gènes de classe II:
- sont synthétisés 6 à 15 minutes après le début de l’infection
- sont impliqués dans le métabolisme de l’ADN
- sont transcrits par l’ARN polymérase de T7
- codent pour les protéines qui dégradent l’ADN de l’hôte
28
ok
La transcription des gènes de classe II est provoquée par
l’entrée graduelle de l’ADN viral et l’accumulation de l’ARN polymérase de T7
La réplication du génome de T7
- a une seule origine de réplication (contrairement à T4)
- est bidirectionnelle, avec synthèse de fragments d’Okazaki
ok
29-30-31
ok
Gènes de classe III:
- sont synthétisés de_____ après le début de l’infection
- ont des fonctions dans _____
- sont transcrits par ____
8 à 25 minutes
l’empaquetage de l’ADN,
l’assemblage du virion et la lyse
l’ARN polymérase de T7
noter qu’il est important de synthétiser les protéines structurales à la fin du cycle de multiplication, pour éviter ____
de former des capsides vides
34-35
ok
L’ADN pénètre toujours la procapside par la même extrémité comment ca se fait
e
Il y a une affinité entre les nucléotides d’une extrémité du génome viral et les protéines de la capsid
libération des virions : La première étape est
Ces trous permettent aux ____ de s’échapper du cytoplasme et de ____
Les ____ perturbent ensuite la membrane externe, permettant aux virions de quitter la cellule
la perforation
de la membrane interne par l’enzyme virale «holine»
endolysines virales
dégrader la paroi de peptidoglycane
spanines