STUDIO CELLULE/ Istologia- BIOLOGIA CELLULARE

Question 1

Fluorescenza

Answer 1

Proprietà di assorbire la luce ad una particolare lunghezza d’onda e rilasciare con una lunghezza d’onda differente.

Question 2

Microscopio ottico in campo chiaro

Answer 2

microscopio nel quale la luce che attraversa la cellula vivente non colorata viene alterata leggermente quando attraversa le parti più dense della cellula (poco contrasto)

Question 3

Microscopia

Answer 3

Insieme di tecniche legate all’osservazione di organismi e strutture cellulari microscopiche

Question 4

Preparazione dei campioni biologici di istologia: tappe

Answer 4

1. Fissazione tessuti
2. Disidratazione
3. Diafanizzazione
4. Infiltrazione ed inclusione
5. Taglio e montaggio
6. Fissazione e colorazione

Question 5

Fissazione dei tessuti

Answer 5

Per preservare la morfologia delle cellule e dei tessuti bloccando i processi biologici: processi di autodistruzione o autolisi (dovuto a enzimi lisosomiali) e di putrefazione ad opera di batteri. Si usano molecole che creano dei reticoli tra le varie strutture del tessuto.

Question 6

Disidratazione (istologia- studio cellule)

Answer 6

Acqua viene eliminata rendendo il tessuto duro

Question 7

Diafanizzazione

Answer 7

3- viene introdotto lo xilolo (xilene), un solvente che diventa intermedio tra il tessuto e paraffina e che permette a quest’ultima di inserirsi nel tessuto.

Question 8

Infiltrazione ed inclusione

Answer 8

4- si aggiunge una paraffina o resina (idrofobiche) che non penetrerebbe con la presenza dell’acqua, ma che è permesso tramite utilizzo dello xilolo

Question 9

Taglio e montaggio

Answer 9

5- si fanno delle sezioni sottilissime tramite il microtomo (lama tagliente)

Question 10

Fissazione e colorazione

Answer 10

Il preparato viene fissato ma per rendere visibile il tessuto è importante che sia colorato per aumentare il contrasto tra le varie componenti tissutali.coloranti con affinità per componenti cellulari e tissutali possono essere combinati per la stessa sezione istologica.

Question 11

Basofili

Answer 11

Acidi nucleici carichi negativamente

Question 12

Ematossilina

Answer 12

Colorante che da info anche sulle varie funzioni. Colora di blu i componenti cellulari carichi negativamente (detti basofili)

Question 13

Eosina

Answer 13

Colorante per eccellenza che da info anche sulle varie info. Colora in rosso rosato i componenti carichi positivamente (tutte le sostanze basiche)

Question 14

PAS

Answer 14

Rosso: matrice extra cellulare o sostanze zuccherine

Question 15

Impregnazione argentica

Answer 15

Strutture nervose

Question 16

Tricromica

Answer 16

Tessuto connettivo

Question 17

E&E

Question 18

condensatore

Answer 18

mette a fuoco un cono di raggi luminosi su ciascun punto del campione

Question 19

obiettivo

Answer 19

raccoglie un cono di raggi luminosi per creare un’immagine primaria

Question 20

microscopio ottico

Answer 20

sfrutta la luce visibile, lunghezza d’onda 400-700 nm

Question 21

obiettivo

Answer 21

una lente che fornisce un’immagine reale ingrandita, e si trova all’altra estremità del tubo, in corrispondenza dell’oggetto da osservare.

Question 21

oculare

Answer 21

lente su cui appoggiamo l’occhio

Question 21

ingrandimento a vuoto

Answer 21

gli oggetti risultano + grandi ma sfuocati e non interpretabili

Question 22

ingrandimento (magnificazione)

Answer 22

rapporto tra le dimensioni oggetto originale e le dimensioni dell’immagine ottenuta. L’ingrandimento di un microscopio è il prodotto dell’ingrandimento dell’oculare e dell’obiettivo. E’ limitato dal potere di risoluzione.

Question 23

Potere di risoluzione

Answer 23

capacità di distinguere come separati 2 punti molto vicini.

Question 24

Limite di risoluzione

Answer 24

distanza minima alla quale 2 punti si vedono come distinti.
occhio umano: 75-100 micrometro
microscopio ottico: 0,22 micrometri (200nm)
microscopio elettronico: 0.2-2 nm
Controllato da:
lunghezza d’onda della luce incidente, apertura angolare, indice di rifrazione (n)

Question 25

apertura angolare

Answer 25

semiangolo alfa del cono di luce che dal campione penetra nell’obiettivo del microscopio (capacità della lente di raccogliere luce).

Question 26

indice di rifrazione (n)

Answer 26

caratteristico del mezzo in cui si svolge l’osservazione (in generare aria ad olio) che separa il campione dall’obiettivo (in aria= 1, in olio= 1,4)

Question 27

AN

Answer 27

Apertura numerica dell’obiettivo (indica potere di risoluzione dell’obiettivo).

Question 28

microscopio a contrasto di fase

Answer 28

amplifica la differenza di fase fra le onde che attraversano gli oggetti trasparenti e quelle che viaggiano direttamente attraverso il vetrino, determinando delle variazioni di coloro e luminosità percepibile dall’occhio umano. Idea per l’osservazione di campioni in vivo.

Question 29

Nomarski o contrasto interferenziale (DIC)

Answer 29

fornisce un immagine con aspetto 3d

Question 30

Obiettivo a magnificazione

Answer 30

Rapporto tra le dimensioni dell’oggetto originale e le dimensioni, prodotto dell’ingrandimento dell’oculare (10X) e dell’obiettivo (4C, 25X). Limitato dal potere di risoluzione (la capacità di distinguere come separati 2 punti che si trovano vicini).

Question 31

Microscopia in fluorescenza

Answer 31

I preparati sono trattati con reagenti speciali in grado di assorbire la luce e di emetterla (la luce emessa ha una lunghezza d’onda + lunga). In alcuni casi lo stesso campione presenta una propria fluorescenza. Aspetto negativo: interferenze con altre molecole fluorescenti.

Question 32

Specchio dicroico

Answer 32

Divide il raggio, riflette i raggi di una certa lunghezza d’onda e lascia passare inalterati raggi con lunghezza d’onda maggiore.

Question 33

Immunofluorescenza

Answer 33

Tecnica immunolocalizzata di identificazione delle componenti cellulari in cui si utilizza la marcatura dell’anticorpo con fluorocromi che identifica la struttura cellulare (utilizzo anticorpo è una molecola fluorescente).

Question 34

Immunoistochimica

Answer 34

Tecnica immunolocalizzata di identificazione dei componenti cellulari in cui l’anticorpo marcato con un enzima, a cui aggiungo il suo substrato per trasformarlo in un prodotto colorato.

Question 35

Microscopio confocale

Answer 35

Basa uno specifico punto di luce laser focalizzato sul campione ad una particolarità profonda e la luce fluorescente emessa viene raccolta dal rilevatore. Prima di raggiungere il rilevatore deve passare nell’apertura confocale che permette il passaggio solo della luce emessa dal campione.

Question 36

Microscopio elettronico a scansione (TEM)

Answer 36

Utilizza un fascio di elettroni, che permette di andare oltre la visione superficiale del microscopio ottico.

Question 38

Immunogold

Answer 38

Tecnica tramite la quale lanticorpo viene legato a qualcosa che contrasta il passaggio degli elettroni e si tratta di atomi di oro colloidale (rivestito anche da argento per aumentarne le dimensioni)