Seminário ONCO Flashcards
O que é o cancro?
Uma doença, ou conjunto de doenças, genética que resulta de alterações ao nível do DNA.
Que tipos de mutações podem ocorrer nas células, para produzir células cancerígenas?
- Mutações Somáticas - ocorrem no organismo já formado e normalmente no tipo celular, sendo os descendentes não admitem essa mutações (a não ser que a mutação ocorra nos gâmetas, assim será uma mutação somática hereditária).
- Mutações Germinativas - um ou os dois gâmetas parentais admitem a mutação, logo todas as células do organismo têm a mutação, sendo esta passada aos descendentes (pelo menos 50% admitem mutação).
A que se devem as mutações nas células?
Principalmente à incapacidade da célula reparar os danos do seu DNA, produzindo instabilidade genética.
(Também permite diversidade)
Quais os pontos principais da tumorogénese?
Sinalização de proliferação prolongada; Silenciamento de supressores de crescimento; Imortalidade replicativa; Angiogénese; Resistência à morte celular.
Que genes estão associados à tumorogénese?
- Proto oncogenes: ao serem ativados tornam-se oncogenes e levam a uma proliferação anormal das células;
- Supressores tumorais: controlam o crescimento e proliferação celular - mutações causam proliferação descontrolada (necessários 2 alelos mutados)
- Gatekeepers - regulam o crescimento celular por paragem do ciclo ou indução da apoptose (TP53)
- Caretakers - reparam o DNA, mas estando mutados levam a instabilidade genética (BRCA1)
Quais as caraterísticas etiológicas do cancro?
- Esporádico (70% a 80%)
- Familiar (15% a 20%)
- Hereditário (5% a 10%)
Quais as caraterísticas do cancro esporádico?
- Sem história familiar da doença
- Idade de diagnóstico esperada
- ‘Acontece por acaso’
Quais as caraterísticas do cancro familiar?
- Múltiplos familiares afetados com vários cancros
- Idade de diagnóstico esperada
- Processo de transmissão indefinido (pode dever-se ao mesmo fator de risco)
Quais as caraterísticas do cancro hereditário?
- Apresentação precoce da doença
- Vários casos de cancro na família
- Diversos tipos de tumores primários num indivíduo
- Neoplasias caraterísticas de síndromes
O que acontece na transmissão autossómica dominante com penetrância incompleta?
Ocorrem saltos geracionais e alguns indivíduos herdam genes alterados, mas não o cancro.
Quais os genes supressores ou de reparação genética que são alterados no Síndrome de Lynch?
MLH1, MSH2, MSH6 e PMS2.
Qual a função dos genes MSH e MLH/PMS?
Os MSH2 e 6 reconhecem os erros no DNA (substituição, deleção e inserção).
Os MLH e PMS2 corrigem os erros.
Que caraterísticas tem a Síndrome de Lynch?
Autossómica dominante com elevada penetrância;
Germinativa;
Mutações em genes associados à reparação do tipo Mismatch;
Desenvolvimento precoce de cancro de colorretal e incidência aumentada de outras neoplasias como endométrio, intestino, estômago, ovários…
Quais os genes mais mutados na Síndrome de Lynch?
MSH2 em 50% dos indivíduos e MLH1 em 30% a 40%
Com que métodos podemos rastrear o Síndrome de Lynch?
Imunohistoquímica (análise de perda de expressão proteica) e Identificação de instabilidade por microssatélite (IMS)
Apenas existe potencialidade para cancro, se as mutações ocorrerem no gene MSH2?
Não. Deleções na zona EPCAM (promotor de MSH2), leva a que não haja um mRNA funcional, pois o transcrito não é produzido devido à falta de promoção da transcrição.
Quais as guidelines para estudar a propensão genética dum indivíduo ter Síndrome de Lynch?
Tem-se os critérios de Amesterdão mais restritos:
- 3 ou mais indivíduos parentes (de 1º grau) devem admitir cancro confirmado histologicamente;
- 2 ou mais gerações devem ser afetadas;
- Um parente deve ser diagnosticado antes dos 50 anos.
Tem-se Guidelines Bethesda revistos:
1. Basta um dos critérios se verificar, sendo esses os graus de parentesco podem ser de 2º ou 3º, não importa a idade do diagnóstico do tumor e este pode ser dos tipos relacionados com colorretal.
Qual a principal estratégia de diagnóstico de Síndrome de Lynch?
- Análise dos critérios de Amesterdão (se forem válidos, pode-se passar para a análise genética)
- Análise dos critérios de Bethesda (se não forem válidos não vale a pena testar geneticamente)
- a. Seguir para IHQ/MSI
- b. Se o anterior for positivo, então testar geneticamente.
Qual a importância do diagnóstico pré-assintomático?
Identificar portadores de mutações e conduzi-los para programas de rastreio ou profilaxia adequados (colonoscopia a cada 1-2 anos depois dos 20 anos ou mais espaçado e antes dos 20 anos, caso o diagnóstico mais recente seja de alguém muito mais novo - polipectomia no caso de ser adenoma ou colectomia segmentar se for adenocarcinoma no cancro colorretal).
O que é o CMMRD?
É síndrome rara de predisposição hereditária para crianças ou jovens adultos com um espetro alargado de neoplasias (deve-se a um indivíduo ter mutações nos 2 alelos provenientes dos pais com LS).
O principal sintoma é aparecimento de manchas café com leite.
Como se pesquisam as variantes dos genes MMR?
Por NGS que inclui um painel de 113 genes (é capaz de identificar variantes pontuais, muito comum no gene MSH2, e rearranjos exónicos, muito comum no gene PMS2).
Quais as etapas de NGS?
- Preparação da biblioteca (fragmentação do DNA e ligação a adaptadores)
- Formação dos clusters
- Sequenciação (amplificação paralela de DNA - PCR)
- Análise de dados (alinhamento das reads do genoma de referência)
Que tipo de classificação pode ser dada às variantes génicas?
- Patogénica - acionar métodos clínicos preventivos
- Potencialmente patogénica - a.m.c.p.
- Variante de significado incerto
- Potencialmente benigna - sem intervenção clínica
- Benigna - sem intervenção clínica
Qual a etiologia do cancro mamário?
E do ovário?
70% a 80% é esporádico e 5% a 10% é hereditário.
75% a 90% é esporádico e 10% a 25% é hereditário.
Quais as caraterísticas do cancro hereditário da mama e ovários?
Trata-se dum síndrome - HBOC e é uma doença autossómica dominante com penetrância incompleta associada a mutações na linha germinativa dos genes BRCA 1 e 2.
Estes genes relacionam-se com a reparação dos danos no DNA e admitem caraterísticas de genes supressores tumorais (caretakers), mantendo a estabilidade genética.
Quando deve ser dado aconselhamento genético relativamente ao cancro mamário/do ovário?
- Pessoas com históricos de família onde os cancros da mama, ovário e próstata já tenham sido diagnosticados;
- Diagnóstico do cancro da mama antes dos 50 anos;
- Diagnóstico de TNBC antes dos 60 anos;
- Histórico pessoal de cancro do ovário ou mamário (feminino ou masculino).
Se o indivíduo estiver integrado nestes critérios será calculado o risco de predisposição (BRCAPRO) e caso este dê superior a 10%, testes genéticos devem ser efetuados para as mutações BRCA1/BRCA2.
Qual a mutação de novo já estabelecida nas famílias portuguesas relativamente ao HBOC?
Mutação no codão Alu no gene de BRCA2 - mutação fundadora e do tipo de deleção.
Que ações devem ser tomadas segundo os critérios que foram validados (HBOC) e as novas mutações fundadoras das famílias portuguesas?
- Testagem a mutações fundadoras positiva - intervenções clínicas segundo as recomendações para a síndrome HBOC;
- Critério BRCAPRO < 10% e testagem negativa - monitorização própria e de familiares segundo o histórico;
- Critério BRCAPRO > 10% e testagem negativa - análise dos genes BRCA1/BRCA2.
Qual o tipo de terapia normalmente usada em cancros derivados de mutações BRCA1 e 2?
Usa-se inibidores PARP (olaparib e talazoparib) que vão anular a reparação do DNA e desta forma levar a que a célula entre em apoptose, tratando-se duma morte sintética. Pode ser usado tanto em mutações da linha germinativa como somáticas.
Quais as principais desvantagens de usar FFPE na análise de tumores?
- Baixa qualidade e material muito fragmentado
- Amostras heterogéneas (células tumorais e normais)
- O DNA das amostras pode conter artefactos de alterações genéticas;
- Deteção pouco precisa por NGS.
Descreva quais as variantes maioritárias das famílias com HBOC e do gene BRCA1.
BRCA2 c.156_157insAlu + BRCA1 c.3331_3334del + BRCA1 c.2037delinCC representam 52% das variantes patogénicas dos genes BRCA1/BRCA2 nas famílias com HBOC;
BRCA1 c.3331_3334del + BRCA1 c.2037delinCC representam 73% das variantes de linha germinativa do gene BRCA1
Quais os biomarcadores que podem prever alguma sensibilidade à terapia por PARPi?
- Metilação dos genes de HR (recombinação homóloga);
- Mutações somáticas ou germinativas nos genes de HR.
Analisados por Genomic scar assays e functional assay.
Em que gene de HR ocorrem as principais mutações (somáticas ou linha germinativa) no caso de cancro dos ovários?
BRCA1 (54%)
