Section 1.4 Flashcards

1
Q

Les gènes sont-ils seulement régulés à la transcription?

A

Non, la traduction est elle aussi régulée.

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Q

Nommez un avantage de contrôler la traduction par rapport à la transcription.

A

L’abilité de répondre très rapidement à un stimuli externe : le temps requis pour altérer l’ARNm est plus long, alors que ce n’est pas le cas pour altérer la synthèse des protéines.

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3
Q

À quelle étape fonctionne généralement la régulation de la traduction et pourquoi?

A

À l’étape de l’initiation de la traduction, et parce que :
* Il est plus efficace de réguler un sentier le plus tôt possible, plutôt que de l’arrêter après l’avoir commencé.
* Dans le cas de la traduction, la régulation à l’initiation élimine aussi la production de protéines incomplètes

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4
Q

Quelle est la première cible des régulateurs de l’initiation chez les bactéries?

A

Interférer avec la reconnaissance du site de liaison du ribosome (RBS) par la sous-unité 30S

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Q

Expliquez le méchanisme général de régulation au niveau du site de liaison du ribosome (RBS) chez les procaryotes.

A

Les régulateurs s’associent avec des séquences près du RBS et inhibent physiquement le pairange entre le RBS et l’ARN 16s : les protéines sont assez larges pour empêcher la sous-unité 30S d’acceder au RBS.

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6
Q

Est-ce que les protéines régulatrices de l’initiation se lient directement au RBS? Pourquoi?

A

Non, ils se lient près du RBS mais pas directement dessus.

La raison pour cela est que ces répresseurs risquerait d’inhiber la traduction d’une très large proportion de protéines de la cellules.

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7
Q

Quelles autres molécules (que les protéines) peuvent agir de régulateurs en se liant près du RBS?

A

Des molécules d’ARN (par exemple lorsque l’ARNm se paire avec lui-même pour masquer un RBS ou plus).

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8
Q

Comment un ARNm lié avec lui-même pour masquer un RBS est-il “disrupté” (délié)?

A

Souvent, lorsqu’un autre gène est traduit dans l’opéron. Le passage du ribosome délie le pairage et permet à un autre ribosome de reconnaître le RBS qui n’est plus masqué.

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9
Q

Quel est le problème de la régulation des protéines ribosomales (coordination)?

A
  • Chaque ribosome contient plus de 50 protéines distinctes qui devraient être produites à la même vitesse que les ARNr auxquels elles se lient.
  • La vitesse de productions des protéines et le nombre de ribosomes qu’une cellule contient sont lié à sa vitesse de croissance
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10
Q

Comment la coordination des gènes de protéines ribosomales est-elle effectuée (expliquez le mécanisme de régulation)?

A
  • Leur organisation est simplifiée par plusieurs opérons qui contiennent des gènes pour 11 protéines ribosomales
  • Les opérons sont régulés au niveau de la synthèse d’ARNm, mais de manière plus importante à la traduction de l’ARN
  • Une protéine ribosomale (ou un complexe de deux protéines) se lie à l’ARNm de chaque opéron près de la séquence d’initiation de la traduction : inhibiation stérique de l’association de la petite sous-unité avec le RBS.
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11
Q

Comment les gènes situées en aval (souvent avec leur propre RBS) sont-ils régulés (2 mécanismes)?

A
  1. Couplage translationnel peut arriver quand le codon STOP est localisé près d’un codon START : cela crée une situation où la traduction du gène en amont doit être effectuée pour traduire le gène en aval.
  2. Exploitation des structures particulières de l’ARNM : reconnaissance de RBS internes seulement reconnus si l’ARNm est traduit (délie ainsi les structrures de l’ARNm).
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12
Q

Comment l’expression des protéines ribosomales est-elle couplée avec le nombre d’ARNm dans la cellule?

A

La protéines ribosome régulatoire se liant à l’ARNm reconnait aussi un site de liaison très fort dans le bon ARNr:
* Si le site n’est pas occupé, la protéine ribosomale se lie à cet endroit
* Si tous les sites sont occupés, alors les protéines vont se lier aux sites de liaisons de plus faible affinité sur son propre ARNm

Cela veut-dire que c’est seulement lorsque la protéine ribosomale est en excès dans l’ARNr qu’il se lient seulement à l’ARNm

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13
Q

Expliquez le mécanisme d’inhibition de la traduction par la protéine S8

A
  • Les deux sites de liaisons ont des similarités (séquences primaires et structures secondaires)
  • Site de liaison sur ARNm inclut le codon d’initiation AUG
  • Lorsque la protéine S8 est en excès sur l’ARNm, l’ARNm ne peut pas attacher le ribosome pour initier la traduction
  • S8 se lie plus fortement à ARNr qu’ARNm, donc la traduction est réprimée seulement lorsque la cellule satisfait ses besoins en protéines S8
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14
Q

Nommez deux cas d’inhibition de l’initiation de la traduction chez les bactérie.

A
  • aaRS régulent leur expression en se fixant sur leur propre ARNm (comme protéines ribosomales)
  • ARNm forme différentes structures favorisant/inhibant la traduction en fonction des conditions de températures/concentrations de métabolites.
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15
Q

Lorsque les cellules eucaryotes sont en déficit de nutriments (ou en stress cellulaire), que font-elles et quelles sont les étapes?

A

Elle réduisent la traduction globalement :
* Inhibition de la reconaissance de l’ARNm
* Inhibition de la liaison entre l’ARNt initiateur et la sous-unité 40S

L’inhibition d’un seul de ces deux éléments élimine la synthèse protéique

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16
Q

Quel mécanisme d’inhibiton est utilisé afin de réduire la traduction globalement chez les eucaryotes (2 mécanismes)?

A

La phosphorylation
* Mécanisme 1 : Dans eIF2 (qui a besoin d’un GTP pour délivrer l’ARNt initiateur au site P), des kinases phosphorylent la sous-unité alpha d’eIF2. Cela inhibe l’action d’un facteur d’échange GTP (eIF2B), ce qui réduit la quantité de complexes eIF2-GTP. Cela limite l’initiation de la traduction comme il y a moins de eIF2-GTP.
* Mécanisme 2 : eIF4E se lie à la coiffe en 5’. Après, il y a liaison avec eIF4G : cependant, il existe des protéines (4E-BPs) qui ont le même domaine de reconaissance et qui agissent compe compétiteurs à eIF4G. Si les 4E-BPs sont phosphorylés, ils ne peuvent plus se lier avec eIF4E et permettent donc la traduction

17
Q

Par quoi est régulé la phosphorylation de 4E-BP? Expliquez le mécanisme.

A

Une kinase appelée mTor, qui est activée par des facteurs de croissance/hormones/facteurs qui permettent de stimuler la division cellulaire.

La kinase permet d’accroitre la capacité traductionnelle de la cellule.

18
Q

Expliquez le mécanisme du contrôle de traduction effectuée par les 4E-BP sur la protéine Oskar chez les drosophiles.

A

Inhibition des ARNm Oskar lors de leur transport du pôle antérieure vers la région postérieure de l’ovocyte :
* Protéines bruno : se lient à la région 3’ non traduite d’ARNm Oskar
* Cup : 4E-BP qui se lie à Bruno sur l’ARNm
* Avec la présence de Cup, l’ARNm fait compétition à eIF4G et donc la traduction est inhibé.
* Cup effectue cette inhibition seulement lorsqu’il est lié L’ARNm

19
Q

Quelle est la protéine agissant comme le régulateur majeur des niveaux de fer dans le corps humain?

A

La Ferritine est la protéine qui maintient l’homéostasie des niveaux de fer.

20
Q

Pour quelle raison la Ferritine doit elle être régulée au niveau de la synthèse des protéines?

A

Parce qu’il s’agit d’une protéine qui a besoin de répondre rapidement aux changements de niveaux de fer dans le corps.

21
Q

Comment est régulée la Ferritine?

A
  • Par des protéines qui se lient au fer: IRP (iron regulatory proteins)
  • Les IRP se lient aussi à l’ARN (à une structure “hairpin” particulière située à l’extrémité 5’ de l’ARNm de la Ferritine (iron regulatory element, IRE)
  • L’abilité de ces protéines de reconnaître l’IRE est contrôlée par les niveaux de fer dans la cellule
  • Fer insuffisant : les protéines se lient fortement à l’ARNm et empêche eIF4A/B de dénouer la structure “hairpin” de l’IRE (par blocage stérique)
  • Fer plus élevé : les protéines préfèrent la liaison au fer, donc se libère de l’ARN et n’inhibent plus la traduction
22
Q

Qu’est-ce que Gcn4 et comment fonctionne son mécanisme de régulation (en général, sans entrer dans les spécificitées)?

A

Un activateur de la transcription chez des levures qui régule l’expression des gènes d’enzymes de biosynthèses d’acide aminé.

Gcn4 est seulement traduit en bas niveaux d’acides aminés, et n’est pas traduit en haut niveaux d’acides aminés.

23
Q

Expliquez le mécanisme de Gcn4 (spécifiquement).

A

ORF (4) = Cadres de lecture situé avant la séquience codante

TC = Complexe eIF2-ARNt initiateur requis pour initier la traduction d’un ORF

  • Quand les acides aminés ne sont pas limitants : TC se lie rapidement à s-u 40S, ce qui permet de reconnaître un ORF qui fait que le ribosome se dissocie complètement de l’ARNm après la traduction de l’ORF.
  • Quand les acides sont limitants : phosphorylation d’eIF2 par kinase Gcn2 cause une réduction d’eIF2-GTP, et donc réduit la vitesse de fixation de CT à 40S, donc ribosome dépasse les uORF suivant (2 à 4) et la séquence codant pour Gcn4 est donc traduite.

(Voir figure 15-49a/b du livre)

24
Q

Pourquoi est-il nécessaire d’éliminer les ARNm défectifs (brisés ou mutants)?

A

Les ARNm ont la possibilité de synthétiser des protéines incomplètes ou incorrectes qui auraient un effet négatif dans la cellule.

25
Q

Quel processus est utilisé pour détecter les ARNm défectifs et les éliminer?

A

La traduction

26
Q

À quoi sert la molécule ARNtm?

A

Il s’agit d’un ARN à la fois messager et de transfert, qui peut libérer les ribosomes qui demeurent attachés à l’ARNm à cause de l’absence d’un codon stop (causé par une transcription incomplète ou par une nucléase).

27
Q

Expliquez l’action de l’ARNtm SsrA.

A

L’ARNtm SSrA peut être chargé l’alanine et se lier à EF-Tu-GTP.
* Quand un ribosome est bloqué à l’extrémité 3’ : complexe SsrA^ala-EF-Tu-GTP se lie au site A du ribosome et participe dans la réaction peptidyl-transferase comme n’importe quel autre ARNt, qui libère le ribosome.

28
Q

Qu’arrive-t-il quand l’ARNm défectueux est relâché du ribosome?

A

La protéine encodée par l’ARNm est fusionnée à un tag peptidique de 10 acides aminés qui est reconnue par des protéases qui dégradent la protéine en question.

29
Q

Comment l’ARN SsrA se lie-t-elle seulement aux ribosomes bloqués?

A

La taille des SsrA est très grande (4x plus grosse qu’ARNt normal), elles ne peuvent pas se lier au site A pendant l’élongation, mais peuvent se lier lorsque le ribosome est au 3’ de l’ARNm car il y a l’espace supplémentaire.

30
Q

Comment se nomme le processus dégradant ARNm contenant un codon stop prématuré?

A

Nonsense-mediated mRNA decay (processus de dégradation de l’ARNm par induite par non-sens)

31
Q

Expliquez le processus de dégradation de l’ARNm induit par un codon non-sens.

A

Reconaissance des codons stops prématurés par des complexes protéiques dans l’ORF de l’ARNm (lors de l’épissage, situés à chaque frontières exon-exon).

Les complexes prématurés et eRF3 lié au codon stop activent des enzymes qui clivent l’ARN, enlèvent la coiffe en 5’ de l’ARNm OU enlèvent la queue poly-A en 3’ (qui servent de protection contre la dégradation)

32
Q

Comment se nomme le processus dégradant l’ARNm ne contenant pas de codons stop?

A

Nonstop-mediated decay (processus de dégradation de l’ARNm induit par absence de codon stop)

33
Q

Expliquez le mécanisme du processus de dégradation de l’ARNm induit par absence de codon stop.

A

Quand un ARNm sans codon-stop est traduit, le ribosome traduit à travers la queue de poly-A (car il n’y a pas de codon stop pour l’arrêter avant), ce qui rajoute des lyhsines à la protéines et bloque le ribosome.

2 protéines reliées à eRF1 et eRF3 (Dom34 et Hbs1) stimulent la dissociaiton du ribosome et libèrent l’ARNt-peptidyl et l’ARNm.

Ski7 (aussi relié à eRF3), recrute un exonucléase 3’->5’ qui dégrade l’ARNm non-stop, et l’ARNm est aussi coupé par un endonucléase.

La protéine qui contient la polylysine sont instable et sont dégradés.