Questions pré-analytique Flashcards

1
Q

Quels sont les 2 types de variations biologiques ?

A

Interférents (HIL, médicaments, paraprotéines) et influençant (cycle circadien, stabilité, température, etc…)

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2
Q

Comment détecter une hémolyse in vivo

A

-Haptoglobuline sanguin
-Hémoglobine libre urinaire

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3
Q

Quelle est la conséquence d’un ictère sur les analyses ?

A

-interférence spectro de 400 à 540 nm
-Interférence direct sur des tests (ALT, CK, lipase)

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4
Q

Quels sont les mécanismes de l’interférence par paraprotéines?

A

-interférence par précipitation ou agrégation
-Liaison à des composants de l’essai
-Déplacement de volume
-Changement dans la viscosité

Les différentes propriétés physico-chimiques peuvent changer en fonction des clones sécrétés

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5
Q

Ordre des tubes

A

1) Hémoculture
2)tubes à jeter
3)tube sodium citrate
4)tube sérum (rouge ou or)
5)tube héparine
6)tube EDTA
7)tube fluorure de sodium (pour glucose)
8) etc.

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6
Q

Quelle est la différence entre sérum et plasma ?

A

-Le sérum ne contient pas de protéines ou cellules de la coagulation pendant que le plasma en contient

-Délais supplémentaire pour le sérum puisque nécessite 30 minutes pour coaguler

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7
Q

Décrire différences entre sang capillaire, veineux ou artériel, et les analyses communes de labo qui sont affectées ?

A
  • Entre le sang capillaire et artériel, il n’y a pas vraiment de différences cliniques au niveau du pH, PCO2, mais le PO2 est pas mal plus bas.

-Le PCO2 veineux est jusqu’à 77 mm HG plus élevé que les autres et le PO2 et PH est plus bas comparativement au sang artériel.

-Au niveau veineux, la bilirubine, le calcium, le chlore, le sodium et les protéines totaux sont plus élevés que les capillaires.

-Les capillaires, quant à eux, possèdent des taux plus élevés de glucose et de potassium.

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8
Q

Quelles interférences induisent les additifs héparine et EDTA dans les tubes de prélèvement ?

A

Héparine :
-l’héparine de lithium et sodium peuvent interférer avec lithium ou Sodium
-Interférence lorsqu’on veut faire une amplification d’ADN par PCR
-Interférence dans certaines analyses immuno en se liant à l’anticorps et l’antigène

EDTA :
-L’EDTA est un agent chélateur de Ca2+ et Mg2+. Pas bon pour analyse calcium, magnésium, fer, alcaline phosphatase et CK.
-ne peut pas analyser le sodium ou le potassium (puisque sels de sodium ou potassium)
-Si trop grande concentration, interférences dans les immunoessais chimiluminescence qui utilise la phosphatase alcaline comme enzyme secondaire

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9
Q

Deux causes d’hémolyse in vivo :

A

-Augmentation d’haptoglobine à cause d’une réaction inflammatoire.
-Déficience en glucose-6-phosphate déshydrogénase rend les érythrocytes plus sensibles à la destruction suite à la présence de stress oxydatif
-Maladies autoimmunes

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10
Q

Deux causes d’hémolyse in vitro :

A

-Calibre trop petit
-Contact avec de l’alcool
-Trop mélanger/mélange trop fort le sang avec l’anticoagulant

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11
Q

À quoi servent les additifs dans les tubes de prélèvement

A

Chaque additif à son rôle spécifique et permets de déterminer le type d’analyse que l’on veut faire, tout en préservant l’intégrité de l’échantillon.

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12
Q

Mécanismes d’interférence par l’hémolyse ?

A

-Couleur interfère à 415, 540 et 570 nm
-augmente les interférences possibles en relâchant de composants dans l’échantillon (ex:potassium)
-Dilution de l’échantillon
-Potentielles interférences chimiques (compétition entre adénylate cyclage et CK pour ADP)

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13
Q

Quels sont les mécanismes d’interférence par lipidémie ?

A

-Couleur interfère entre 300 et 700nm.
-une déplétion du volume (effet d’exclusion des électrolytes)
-une répartition de l’échantillon (phase liquide vs lipides)
-Mécanismes physico-chimiques (ex: pattern électrophorèse)

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14
Q

Quels sont les mécanismes de l’interférence par ictère ?

A

-Interfère entre 400 et 540 nm.
-interfère avec beaucoup de tests comme ALT, CK, lipase et TG
-Interfère avec le peroxyde d’hydrogène qui est beaucoup utilisé dans des tests enzymatiques

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15
Q

Qu’est-ce qui est plus élevé dans le plasma que dans le sérum ?

A
  • Évidemment facteurs et protéines de coagulation (ex : fibrinogène)

-Protéines totales plus élevé

-calcium (utilisé par les facteurs de coagulation)

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16
Q

Qu’est-ce qui est plus élevé dans le sérum que dans le plasma ?

A

-Le glucose
-le phosphore
-le potassium

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17
Q

Qu’est-ce qui est plus élevé dans le plasma que dans le sang total

A

-érythrocytes, leucocytes et plaquettes (FSC)
-Hba1c
-Potassium et autres éléments retrouvés dans les globules rouges et sécrétés dans le sang

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18
Q

Pourquoi il y a plus de K+ dans le sérum que dans le plasma

A

-Le potassium est libéré par les plaquettes lors de la coagulation.

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19
Q

Quels sont les analyses affectées par l’activité physique

A

-Augmentation du potassium
-élévation de biomarqueurs cardiaques et de dommage musculaire
-agrégation de plaquettes
-leucocytose
-élévation des niveaux d’activation de plasminogène
-activation du système fibrinolytique
-diminution de la capacité à faire des caillots sanguins
- augmente thrombine
-augmente CK, CK-MB, ALT, LDH, Troponine
-Affecte l’homéostasie des hormones

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20
Q

Donnez des exemples d’analytes de biochimie générale affectés par une interférence aux paraprotéines

A

-Cholestérol
-bilirubine totale et directe
-CRP
-ferritine

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21
Q

Quels sont les principaux analytes influencés par le cycle circadien

A

Avant midi : LH, FSH ACTH, Cortisol

Après-midi : TSH, PTH

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22
Q

Quels sont les analytes affectés par la prise d’un repas

A

-médicaments lors de TDM
-TG sanguins
-le glucose
-le phosphate
-bilirubine
-l’AST
-Augmente pH sanguin à cause d’une augmentation du HCO3-

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23
Q

Quels sont les analytes affectés par l’alcool

A

-Augmentation de la vasopressine en augmentation la diurèse
-Affecte les fonctions des glandes surrénales et de l’hypophyse.
-Affecte le métabolisme lipidique
-Augmentation d’acétate apporte à augmenter la formation d’acide urique
-Inhibition de la sécrétion urée, causant une accumulation d’acide urique dans le plasma
-acidose suite à une diminution du bicarbonate plasmatique par l’acétate et lactate
-Augmente l’activité du GGT et d’autres enzymes
-Augmente TG

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24
Q

Quels sont les analytes affectés par le stress

A

-ACTH
-Cortisol
-Catécholamines

25
Q

Décrire l’effet de matrice

A

L’effet de matrice est l’influence de composés de la matrice (environnement chimique comme le sang, urine, etc..) sur l’intensité du signal qui est émis par l’analyse d’intérêt.

26
Q

Choisir 3 couleurs de tube et donner 1 exemple de tests pouvant être fait et 1 exemple ne pouvant pas être réalisé sur ceux-ci

A

Tubes sérum : On peut regarder la lipase. One ne peut pas regarder la fibrinogène ou HB1c (puisque se retrouve dans les érythrocytes)

Tubes Vert : On peut faire le Cholestérol total. On ne peut pas extraire l’ADN et faire ensuite une PCR sur les échantillons héparines.

Tubes lavande : peut faire Hémoglobine glyquée. Ne peut pas faire la majorité des électrolytes comme sodium

27
Q

Les agents de contraste viennent interférer sur quels analytes?

A

-Osmolarité
-Interférence spectrale
-Cause insuffisance rénale
-Cause hypo ou hyperthyroïdie

28
Q

Quel type d’eau est utilisé en biochimie

A

LSQ Type 1 et 2

29
Q

Décrire les conditions préanalytiques pour les cathécolamines plasmatiques

A

-Diète spécifique : diète spécifique (pas de cafféine, bannane, nicotine 24 heures avant)
-Médicaments : Certains tu peux arrêter ou d’autres.
-Position de prélèvement (30 mins assis dans la pratique avant de faire l’analyse. Préférable coucher)
-État de patient stable, sans stress.

Urine :
-Acidification pour l’ensemble à l’exception de la métanéphrine (pas d’additif)

Sang:
-tubes héparine ou EDTA. Isolation plaquette avant 1 heure et mettre à -20 avant 2 heures

30
Q

Quel est la définition de :

Patients admis
Patient inscrit
Patient inscrit-urgent
Patient enregistré

A

-Patients admis : hospitalisé occupe un lit

-Patient inscrit : Patient ambulatoire

-Patient inscrit-urgent : à l’urgence

-Patient enregistré : Centre de prélèvement

31
Q

Nommer 2 des 5 erreurs pré-analytiques les plus fréquentes.

A

-Manque de volume – plus important
-Erreur d’identification du patient
-Mauvais tube ou contenant de collecte
-Erreur de test prescrit sur la requête
-Tube vide ou tube manquant

32
Q

Quels sont les 4 tubes qui peuvent être demandés pour analyse de liquide synovial ?

A

-Tube bleu pour les cristaux
-Flacon stérile pour la bactériologie
-Tube héparine (vert) pour regarder les électrolytes et certaines
-Un tube EDTA (mauve) indispensable pour la cytologie leucocytes, formule, etc.
-Un tube fluoré (gris) est souhaitable pour la glycémie

Souvent utilise 1 tube puisque pas assez grand volume. Souvent tube héparité

33
Q

L’indice de lipémie est une mesure de la transparence du sérum. Quel lipide est le plus lié à l’augmentation de la turbidité du sang ?

A

Les triglycérides

34
Q

Quelles notions pré-analytiques sont importantes pour la FSC ?

A

-Utilisation d’un tube EDTA
-Ne pas mettre trop longtemps le tourniquet.
-4 à 6 heures pour échantillons à température pièce ou sinon frottis sanguins
-état du patient (bien hydraté avec aucun stress physique ou émotionnel)
-formation caillots, hémolyse, lipidémie et ictère
-Cycle circadien pour les leucocytes (plus élevé le matin)
-aggrégation de plaquettes, agglutinines froids, globules rouges résistants à la dégradation

35
Q

Quel est le mécanisme de l’EDTA ajouté dans les tubes lavandes ?

A

Agent chélateur de Ca2+ et Mg2+ :

Va empêcher le Ca2+ d’être utilisé par les facteurs de coagulation pour faire la coagulation.

36
Q

Lequel des types de tubes suivants doit être spécifiquement évité lors de la réalisation de tests basés sur la PCR?

A

Les tubes héparines ne doivent pas être utilisés pour des tests passés sur la PCR. L’héparine interfère avec les résultats puisqu’il inhibe les étapes de transcription inverse et d’amplification

37
Q

Les nouveau-nés ont généralement un hématocrite de 60 à 70%. Comment cela affecte-t-il la collecte de sang pour les tests cliniques ?

A

Diminue le volume de sérum ou plasma donc effet d’exclusion des électrolytes si méthode indirect

38
Q

Nommer un inhibiteur de protéase ajouté dans les tubes de certains dosages.

A

Aprotinine

39
Q

Dans quelles situations est-ce qu’un prélèvement veineux est acceptable pour une analyse de gaz sanguins ?

A

Il n’est pas recommandé de faire des analyses de gaz sanguins sur le sang veineux. Il est préférable de le faire sur le sang artériel ou capillaire. Il est possible de regarder le pH et PCO2, mais les résultats d’oxygène ne seront jamais satisfaisants.

40
Q

Quels spécimens sont irremplaçables ?

A

Biochimie :
- les gaz artériels
-les calculs rénaux
-les liquides obtenus par ponction : LCR, liquide pleural, péritonéal, péricardique et articulaire.

Hématologie :
-sang de cordon
-moelle osseuse

En microbiologie :
-plusieurs spécimens comme les hémocultures

41
Q

Quel est l’effet sur le glucose et le potassium si un échantillon de sang total est mis à 4°C versus 25°C avant la centrifugation ?

A

Potassium : augmentation de la sécrétion par les globules rouges lorsque mis à 4 degré

Glucose : Diminution de l’utilisation par les globules rouges à 4 degré (concentration donc plus élevé dans le sang)

42
Q

Quels analytes sont le plus affectés par la non-centrifugation d’un tube ?

A

-Glucose
-Potassium
-Présence de protéases par les GRs donc, toutes les protéines vont être un peu affectées

43
Q

Qu’est-ce qu’un indice sérique ?

A

Quantification des interférences sanguines (hémolyse, lipides, et ictères)

44
Q

Pourquoi l’EDTA vient sous forme de disodium, dipotassium ou tripotassium ?

A

On y retrouve différentes formes puisque l’EDTA sous sa forme normale n’est pas soluble.

-Les sels de potassium sont plus solubles que les sels sodiques.
-pH dépend du nombre d’ions qui y sont liés
-Le tripotassium est sous forme liquide pendant que les di sont sous forme solide.

Dipotassique et disodique = cellules moins affectés (pH), donc préférable en hématologique

45
Q

Décrivez la procédure utilisée pour recueillir les échantillons d’urine de 24 h et les problèmes liés à cette procédure.

Nommez les analytes qui sont collectés sans additifs, avec HCl et avec Na2CO3 comme additif.

A

1) Lorsqu’on se lève, uriner dans la toilette
2) Ensuite, notez l’heure.
3) Recueillir ensuite toute la journée, soir, nuit jusqu’au lendemain matin ou il y a eu la première urine
4) Conserver la cruche des urines au froid pendant toute la collecte.
5) Ne pas uriner directement dans la cruche. Utiliser un contenant propre et transvider lentement dans la cruche.
6) Faire attention à ne pas mettre de savon dans l’urine

Additifs :

HCL : Très utile pour déterminer le Calcium, les stéroïdes, l’adrénaline, la noradrénaline, et l’acide vanillylmandelique

Na2CO3 : Base pour préserver certains analytes comme les porphyrines, l’urobilinogène et l’acide urique. pH 8 à 9

iii. Sans additif : Sodium, Chlore, Cortisol, Magnésium, Cathécholamines, Oxalate, Urée. Important pour la majorité d’entre eux de ne pas avoir un pH en bas de 4.

46
Q

Donner la liste des critères utilisés dans votre laboratoire clinique pour refuser d’analyser un spécimen.

A

i. Présence d’échantillons irremplaçables
ii. Mauvais type d’additif ajouté
iii. Volume insuffisant
iv. Effet de la température sur la stabilité de l’échantillon
v. Effet du temps avant et après stabilisation
vi. Présence d’hémolyse, de lipidémie ou d’ictère élevé.
vii. Cela doit être le bon type de spécimen : sang veineux vs artériel vs capillaire vs urine vs LCR, etc..
viii. Heure de la prise de l’échantillon
ix. État du patient (ajeun vs postprandial, suite à un exercice très fort, stress, prise d’agents de contraste…)

47
Q

Qu’est-ce que l’eau de type 1 ? Discuter de la préparation de l’eau de type 1 (grade réactif). Donnez un exemple d’une application qui nécessite l’eau de type 1.

A

Type I : L’eau purifiée de type I doit être traitée au charbon actif et filtrée à l’aide d’un filtre de 0,2 µm dans le but d’enlever les matières organiques dissoutes et les particules (bactéries et autres) de taille supérieure à 0,2 µm. Eau pas stérile et utilisé après production. Pour minimum d’interférences comme cultures cellulaires, préparations d’étalons, etc…

Application de l’eau de type 1 :
-Cell and Tissue Cultures
-Liquid Chromatography, including High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
-Gas Chromatography
-Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry (ICP-MS)
-Molecular Biology

48
Q

Décrire la procédure utilisée pour prélever un échantillon de gaz du sang artériel, pour son transport au laboratoire et pour la manipulation de l’échantillon dans le laboratoire. Quelles préoccupations avez-vous concernant les additifs utilisés ?

A

Pour l’artère radiaire :
1- Il est en premier lieu possible de déterminer si la circulation est assez élevé grâce au test modifié d’Allen
2- Aseptiser le site de ponction
3- Prendre la seringue dans une main et placer pousse de l’autre main sur l’artère ou devrait être la ponction.
4. Faire la ponction avec un angle de 30 à 45 degré avec une profondeur de 5 à 10 mm.
5. Dès que tu rentres dans l’artère, le sang devrait commencer à couler dans la seringue
6. Lorsque quantité nécessaire prise, appliquer un gaz à l’endroit de la ponction et retirer tranquillement l’aiguille
7. Compresser l’artère avec une pression assez forte 3 à 5 minutes
8. Regarder pour la présence d’air et inverser l’échantillon plusieurs fois
Transport :
le port par la main est la technique de choix puisque cela a peu d’effet sur les gaz sanguins et les pH, même s’il y a des bulles d’air

Additif : il est recommandé d’utiliser du Li-Héparine comme anticoagulant (saturé et en poudre.

49
Q

Donner les étapes d’un prélèvement veineux chez un adulte

A
  1. S’assurer qu’il n’y a pas d’allergies aux latex - Bien avoir des gants
  2. Faire une double vérification
  3. Identifier l’état du patient /S’assurer qu’il soit confortable et assis/couché
  4. Bras étendu
  5. Sélection bon tube et bonne aiguille (20 adulte et 23 bébés)
  6. Veine cubitale médiane préféré. Potentiellement utiliser veine sur main ou cheville.
    Plus jeune de 2 ans : veines superficielles tels que veine dorsale de la main.
  7. Désinfecter avec isopropanol 70%
  8. Faire une occlusion veineuse grâce à un brassard de pression à 4 pousses de l’endroit (tourniquet)
  9. Utilisation tubes différentes couleurs avec gel
  10. Mettre aiguille dans la veine. Si sang coule dans le tube, retirer le tourniquet.
  11. Bien remplir le tube
  12. Mettre tampon de gaz sec sur bras levé après avoir fini de récolter le sang.
  13. Bien mélanger, respecter le tube 30 minutes pour sérum
50
Q

Décrire la méthode de prélèvement capillaire chez un nouveau-né

A
  1. Vérifier l’ordonnance, préparer les formulaires et s’assurer que les exigences d’analyse ont été respectées
  2. Double identification
  3. Se laver les mains et enfiler les gants;
    4.Choisir le point de ponction; (Doigt : partie centrale et légèrement sur le côté, pas l’indexe)(Talon : S’assurer de ne pas toucher l’os du talon, Partie médiale ou latérale de la surface plantaire)
  4. Aseptiser le point de ponction
  5. Effectuer la ponction
  6. Essuyer la première goutte de sang
  7. Effectuer la collecte de l’échantillon
  8. Appliquer une pression sur le point de ponction
    10.Identifier l’échantillon et suivre les étapes pré-analytiques recommandées pour stabilisation et transport au laboratoire
51
Q

Indiquez des avantages et inconvénients de la ponction capillaire

A

Avantages :
-Récolte lors de volume limitée
-Possible de récupérer du sang lorsqui’il n’est plus possible par ponction veineuse
-Possible de récolter chez grands brûlés ou personnes avec bandages
-Moins de possible contamination entre les anticoagulants.

Désavantages :
-petite quantité de sang limité qui peut être prélevée
-sang peut s’accumuler sur l’entrée du tube et cela peut obliger à forcer leur entrée causant de l’hémolyse
-le flux de sang coagule plus rapidement et le niveau des plaquettes diminue avec la coagulation
-Ordre des tubes différents que veines (commence par tube EDTA)

52
Q

Étapes prélèvement liquide synovial

A

-Application d’une crème anesthésiante
-Installer confortement le patient sur le dos
-Dépiler si nécessaire
-Lavage des mains et désinfection de la place
-Enfiler des gants
-repérer zone de ponction
-Désinfection
-Ponction articulaire
-retrait du mandrin
-aspiration du liquide
-Répartir le liquide dans les flacons
-Réinsertion du mandarin dans l’aiguille
-Désinfection après ponction
-Mettre pensement
-2e vérification des identités du patient
-Étiqueter et envoyer au lab.

53
Q

Qu’est-ce qu’un HAMA et que va-t-il faire sur des tests immunologiques?

A

Se sont des anticorps humains anti-murines développées par certaines personnes qui ont subis des traitements anticorps, qui vont réagir avec les immunoglobulines de souris.

La présence de ces anticorps vont élevés les résultats des tests qui utilisent des anticorps monoclonaux de souris donc, causant des faux positifs.

54
Q

Donner les différents éléments qui sont analysés sur les bandelettes urinaires.
Donner pour 3 des ces analytes une cause de faux positif et négatif

A

-Protéines totales
-glucose
-corps cétoniques
-pH
-densité relative (concentration urine)
-leucocytes
-nitrites
-Érythrocytes et hémoglobine libre
-bilirubine
-urobilinogène

55
Q

Qu’est-ce qui réduit l’hémolyse au minimum?

A
  • Utiliser des aiguilles de diamètre approprié (pas d’ailettes)
  • Ne pas agiter trop violemment les échantillons sanguins
  • Laisser les tubes se remplir totalement
  • Eviter la pose trop prolongée d’un garrot, ne pas le serrer trop fortement
  • En cas de prélèvement difficile, utiliser en premier un tube de purge
56
Q

Préanalytique : Lequel mettre sur glace?
K+
NH3
ACTH
Catécholamines

A

ACTH

57
Q

Interférences calcium ionisé

A

Tubes sérum
-Hémolyse
-Concentrations élevée de Na+, MG2+ et Li+
-pH

58
Q

Donner des exemples d’interférence de type endogènes et exogènes

A

Endogène : Lipidémie, hémolyse, ictère

Exogènes : Médicaments, molécules de plantes, et traitement de l’échantillon (type de tube, anticoagulant, lubrifiant, etc..)