Protocole E: Transfection

Question 1

Explique une transfection stable ou complète

Answer 1

ADN pénètre dans noyau et s’intègre dans génome

-Il faut gène de résistance antibio

-Processus de sélection et limite nb d’échantillons à analyser

Question 2

Explique la transfection transitoire

Answer 2

-Matériel génétique pas dans génome de la cellule: éliminé par division cellulaire

-Forte expression gêne intérêt

-Étudier plrs type d’échantillon

Question 3

QU’est ce que la formation d’un complexe ADN-liposome

Answer 3

-Interaction ionique entre lipide chargé positif et la charge négative du gr PO4 de le l’ADN

-Forme un complexe qui adhère et se fusionne à la membrane

Question 4

Quel est la 1re génération de lipide cationique

Answer 4

Mono-cationique–»transfection moins efficace

Question 5

Pk polycationique sont plus favorables

Answer 5

moins toxique

facile à transfecter

Question 6

Nomme les 3 plasmides transfectés

Answer 6

AP1/Luciférase de mouche à feu (expression forte_

sans site AP1/Luciférase de mouche à feu

pRL-TK/Luciférase de Renilla

Question 7

L’incubation des 2 microtubes différents se font comment

Answer 7

30 min à T pièce

Question 8

Quelles sont les composantes des solutions de transfections?

Answer 8

-Opti-MEM sans FBS
-Témoin sans site ou lui avec site
-pRL-TK/Renilla
-Lipofectamine