proteinas recombinantes Flashcards
molecula de DNA formada por la union de dos secuencias de DNA de diferentes organismos
DNA recombinante
si se introduce un DNA recombinante en un organismo se produce una:
modificacion genetica de rasgos existentes o de nuevos rasgos
produccion de una proteina no presente en un organismo determinado y producidas a partir de un DNA recimbinante
proteinas recombinantes
las proteinas recombinantes son proteinas:
quimericas o heterologas
proteinas que se obtienen al expresar un gen clonado en una especie o una linea celular original
proteinas recombinantes
V/F: las proteinas recombinantes son especificas contra un padecimiento
verdadero
los microorganismos que expresen la proteina recombinante pueden ser:
- procariotes (bacterias)
- eucariotes (levaduras)
bacteria utilizada para el 30% de las proteinas terapeuticas
escherichia coli
ventajas del uso de la escherichia coli
- mayor velocidad de división
- su genoma es conocido
- crecimiento rápido
- fácil manipulación genética
- existencia de vectores de expresion estables
desventajas del uso de la escherichia coli
- tiene proteasas que destruyen a las proteínas recombinantes
- no realiza modificaciones postraduccionales
- produce endotoxinas
proceso del sistema de expresion de proteinas recombinante
- diseño del vector (plasmido)
- seleccion de la cepa productora (de la bacteria)
- seleccion de un cultivo bacteriano
- purificacion (reparacion)
ventajas del uso de la saccharomuces cerevisiae (levadura)
- alta velocidad de crecimiento
- adaptabilidad a los cambios
- puede alcanzar grandes concentraciones celulares
- no produce endotoxinas
- glicosilan proteínas
desventajas del uso de la saccharomuces cerevisiae (levadura)
- produce hiper glicosilaciones
- baja eficiencia en la secreción de proteínas
ventajas del uso de celulas de riñon de hamster bebe
- proteínas de manera bien plegada
- modificaciones postraduccionales
desventajas del uso de celulas de riñon de hamster bebe
muy costosos
proceso de las proteinas recombinantes
- selección e identificación del gen responsable de la producción de la proteína de interés
- introducirlos en plásmidos
- insertarlos en una bacteria, levadura o célula animal
- se seleccionan las células transformadas y aquellas que producen proteína de interés en grandes cantidades
- colocan en crioviales y son guardadas en refrigeración a -80ºC
existen dos metodos para el diseño de proteinas recombinantes:
- diseño racional
- evolucion dirigida
metodo donde se hace un analisis estructural de proteina, se diseña la proteina mutante, se hace ma mutagenesis dirigida, se purifica y se comprueba su funcion
diseño racional
metodo donde se hace una mutacion aleatoria del gen que codifica la enzima de interes y se evaluan las proteinas
evolucion dirigida o mutagenesis al azar
consiste en obtener la mayor cantidad de producto con respecto al inicial, con el menor desperdicio posible y con la pureza exigida como minima para el producto
purificacion de proteinas
la purificacion de proteinas recombinantes se realiza mediante:
metodos cromatograficos
ejemplos de proteinas recombinantes
- factores de coagulación
- insulina
- hormona de crecimiento
- hormona folículo estimulante
- eritropoyetina
- interferón alfa
- vacuna antihepatitis B
- anticuerpo monoclonales recombinantes
sustancia formada por un microorganismo completo atenuado o muerto capaces de inducir una respuesta inmune protectora y duradera, previenen y controlan futuras infecciones
vacuna
proteina recombinante que es tratamiento para virus de hepatitis B y C
interferon alfa
