DNA recombinante Flashcards
formas de reproduccion parasexual en bacterias
- transformacion
- conjugacion
- transduccion
reproduccion donde la celula receptora capta del medio DNA libre procedente de otra celula
transformacion
reproduccion donde se realiza contacto fisico entre la celula donante y la receptora transmitiendo un plasmido
conjugacion
pequeños DNA que no son esenciales para la vida de las bacterias pero le dan propiedades extras como la resistencia a antibioticos
plasmidos
reproduccion donde el vector de transferencia genetica es un bacteriografo
transduccion
virus que afecta a la bacteria
bacteriografo
las secuencias de DNA recombinante se corta gracias a:
enzimas de restriccion
secuencias de DNA derivadas de mas de una fuente
DNA recombinante
las enzimas de restruccion son:
endonucleasas
mecanismo de defensa de las bacterias que degradan el DNA extraño que entra a la bacteria y no degradan el ADN propio
enzimas de restriccion
las enzimas de restriccion son un complejo enzimatico formado por:
- endonucleasas
- enzimas del sistema de modificacion (metilasas)
degradan el DNA extraño, reconocen una secuencia y cortan el ADN
endonucleasas
modifican el ADN propio de la bacteria para que no sea degradado mediante metilaciones
enzimas del sistema de modificacion (metilasas)
cortan enlaces fosfodiester del DNA en secuencias especificas, reconocen secuencias palindromicas y son producidas por bacterias
endonucleasas
secuencias de DNA que se leen igual al derecho y al reves
secuencias palindromicas
tipos de endonucleasas de restriccion
- tipo I
- II
- III
- IV
endonucleasas que reconocen secuencias cortas de 6 a 7 pb, el sitio de corte esta lejos del sitio de reconocimiento y el sitio de corte es aleatorio
tipo I
endonucleasas que reconocen secuencias cortas de 4 a 8 pb, el sitio de reconocimiento es igual al sitio de corte
tipo II
endonucleasas que tienen dos secuencias de reconocimiento, hace un corte asimetrico, corta lejos de la secuencia de reconocimiento, de 20 a 30 pb
tipo III
endonucleasas que reconocen el DNA metilado
tipo IV
endonucleasas utilizadas para el DNA recombinante
tipo II, donde reconocen hacen el corte
tipos de corte de las endonucleasas
- cohesivo
- romos
cortes en diferente posicion, de 3 a 5 nucleotidos de diferencia
cohesivo
cortes simetricos en ambas cadenas
romos
V/F: los fragmentos generados por la misma enzima de restriccion son complementarios
verdadero
moleculas de dsDNA con capacidad de albergar un fragmento de DNA exogeno
vectores
tipos de vectores
- para clonacion
- para expresion
vectores que almacenan secuencias, obtienen grandes cantidades de DNA, pueden ser plasmidos, bacteriofagos, fagemidos o cosmidos
vectores para clonacion
vectores que producen un transcrito o proteina, pueden ser plasmidos o bacteriofagos
vectores para expresion
los vectores de clonacion tienen:
- origen de replicacion
- sitio multiple de clonacion
- marcador de seleccion
secuencia especifica que es reconocida por las enzimas de restriccion para poder insertar el DNA complementario
sitio multiple de clonacion
los vectores para expresion tienen:
- origen de replicacion
- sitio multiple de clonacion
- marcador de seleccion
- promotor
- IRES (sitio de entrada a ribosoma)
- secuencia de poliA
formados de dsDNA, circulares, separados del DNA cromosomico, proveniente de bacterias o levaduras
plasmidos
los plasmidos estan formados por:
- origen de replicacion
- gen de resistencia antibiotica
- region de DNA exogeno
virus que infecta a las bacterias, se modifica geneticamente y elimina genes que no se requieren para la replicacion y empaquetamiento
bacteriofagos
vectores hibridos, se combina el DNA de un plasmido con el de un bacteriofago
cosmidos
para formar un cosmido se toma _ del plasmido y _ del bacteriofago
del plasmido se toma el gen de resistencia a antibioticos y el sitio ORI y del bacteriofago se toma el Cos-empaquetamiento
plasmido al que se le incorpora el origen de replicacion de un fago, no tienen sitios cos
fagemidos
cromosomas artificiales
- BAC (bacterias)
- YAC (levaduras)
se da mediante el DNA recombinante donde el material genetico se incorpora de manera extracromosomica y se replica, transcribe y traduce
clonacion molecular
proceso de clonacion
- cortar el pedazo de DNA con la enzima de restrccion
- cortar el plasmido con la misma enzima de restriccion
- ligacion del inserto y del vector mediante una ligasa
enzimas modificadas geneticamente que reconocen secuencias especificas de un dsDNA, formadas por un monomero que reconoce la secuencia y una nucleasa, corrigen y editan defectos geneticos
nucleasas programables
