Práctica 4: Salmonella enterica – pruebas rápidas y método clásico – parte II Flashcards
Bioquímica bacteriana – ¿cómo se visualizan/detectan las acciones de MO?
Las enzimas y reacciones pueden ser detectadas en un medio de cultivo y se usan indicadores de pH (coloración)
¿Con qué pruebas cuenta la batería química para detectar Enterobacterias?
TSI, SIM, Urea y Citrato
Prueba TSI - principio
Diferencia géneros mediante la capacidad de fermentar glucosa, lactosa y/o sacarosa
Prueba TSI - medio
Forma de pico de flauta con un fondo y bisel
Prueba TSI - azúcares
Tres:
- Lactosa
- Sacarosa – 10 veces más concentrada
- Glucosa
Prueba TSI – indicador de pH
Rojo de fenol
Acido – Amarillo
Básico – Rojo
¿Qué otro compuesto contiene el medio?
Sulfato de hierro II – permite detectar la producción de gas sulhídrico – Precipitado negro de FeS
K/A
Bisel alcalino, fondo ácido
Fermentación de glucosa – la pequeña cantidad de ácido es neutralizada por la degradación de peptonas que se encuentran en el medio – pH mayor
Ejemplo: Salmonella
A/A
Bisel ácido, fondo ácido
Fermentación de sacarosa y lactosa
Altas concentraciones, sirven de sustrato y generan metabolitos ácidos
Ejemplo: Grupo coliforme
K/K
Bisel básico, fondo básico
Ningún azúcar se fermentó
Fuente de energía: peptonas que producen NH3 que alcaliniza el medio
Ejemplo: Pseudomonas
Producción de H2S
Producción de gas sulfhídrico se evidencia por la formación de precipitado negro
Ejemplo: Salmonella
Prueba INDOL - principio
Se basa en la hidrólisis del triptófano por la acción de la triptofanasa, que produce la liberación de indol
Indol + aldehído (reactivo de Kovak) = color rojo
Prueba de la UREA - principio
Se basa en la capacidad del MO de hidrolizar la urea, que da la formación de dos moleculas de NH3 por la acción de la ureasa
Esto alcaliniza el medio y hace cambiar a la fenolftaleína a un rosa intenso
Prueba del CITRATO - principio
Se basa en que solamente algunas enterobacterias utilizan al citrato como fuente de C
Prueba del CITRATO - proceso
Citrato permeasa facilita el transporte de citrato al interior de la célula
- La citrasa degrada al citrato a través del TCA = oxalacetato y piruvato
- Piruvato + medio alcalino = ácidos orgánicos = carbonatos y bicarbonatos alcalinos