Polymorphismes et marqueurs moléculaires Flashcards
Qu’est ce qu’un polymorphisme?
Variation phénotypique ou génétique considérée comme normale chez une espèces (dépend de la fréquence de cette variation dans la population étudiée)
Qu’est-ce qu’un polymorphisme moléculaire?
Variation détectable par des techniques moléculaires, comme l’hybridation, le clivage par enzymes de restriction, l’amplification par PCR ou le séquençage de nucléotides
Qu’est-ce qu’un marqueur moléculaire?
Locus démontrant un polymorphisme moléculaire. Il est localisé à un endroit précis du génome, facilement détectable et varie dans la population étudiée.
Peut-on calculer la distance génétique entre un marqueur et un gène particulier?
Oui, ils sont soumis aux mêmes règles génétiques que les allèles des gènes étudiés sur une base phénotypique plus classique :
- On croise une lignées avec yeux rouge et le marqueur 1 avec un lignée avec yeux blancs et marqueur 2, puis on fait un croisement test
- Si autant de parentaux que de recombinants, marqueur pas sur le même chromosome
- Si plus de parentaux que de recombinants, marqueur est sur le même chromosome (% de recombinaison = distance entre gène et marqueur)
Comment utilise-t-on un marqueur moléculaire en relation avec un gène d’intérêt?
Exploite une séquence d’ADN identifiable qui est située près du gène d’intérêt ou liée à celui-ci.
Quel est un avantage d’analyser les marqueurs plutôt que le phénotype (d’un trait dominant par exemple)?
- Les marqueurs peuvent être détectés dès les premiers stades de développement, bien avant que le phénotype ne soit visible.
- Possibilité de distinguer les porteurs (marqueur lié au trait dominant)
- Plus grande précision
Que signifie l’acronyme RFLP?
Restriction fragment length polymorphism = Polymorphisme de longueur de fragments de restriction = Analyses de restriction
Que signifie les acronymes VNTR et STR?
VNTR = Varaiable numbre of tandem repeats
STR = Short tandem repeats (mini- et microsatellites)
Que signifie l’acronyme SNP?
Single nucleotide polymorphism = Polymorphisme mononucléotidique
Que signifie l’acronyme Indels?
Courtes insertions ou délétions
RFLP : Qu’est-ce qu’un site de restriction?
Une séquence d’ADN qui est reconnu par une enzyme qui digère cette séquence pour donner des fragments de restriction (morceau d’ADN digéré par enzyme)
Qu’arrive-t-il si une variation génétique survient dans un site de restriction?
L’enzyme qui coupe au site de restriction ne reconnait plus le site de restriction = change la taille des fragments d’ADN
Que fait-on avec l’échantillon d’ADN après avoir digéré avec une enzyme de restriction?
Pour faire l’analyse, il faut détecter un fragment spécifique parmi les milliers de fragments produits suite aux coupures des sites de restriction par une endonucléase :
- Dénaturation et transfert sur une membrane (Southern blotting)
Dans un Southern blot, pourquoi doit-on utiliser une sonde (probe)?
Southern blot = hybridation avec un sonde moléculaire (morceau d’ADN simple brin marqué qui va s’hybrider avec un morceau d’ADN du génome) :
- Permet de retrouver des marqueurs
Dans une approche par PCR, pourquoi n’a-t-on plus besoin d’une sonde?
On amplifie le fragment, il y a donc un abondance assez grande pour observé le fragment sans sonde sur un gel électrophorèse.
