Pemeriksaan glukosa dalam darah Flashcards
Karbohidrat
perbandingan karbon dan air = 2 : 1
- memiliki gugus OH (ikatan hidrogen)
- monosakarida, oligosakarida jika ikatan glikosida 2-10
- turunannya bisa mengandung nitrogen, fosfat, sulfur, glikolipid, glikoprotein.
Pengujian lab untuk pemantauan/skrining/diagnosis (karbohidrat/DM)
- glukosa puasa
- glukosa 2 pp
- albuminuria sewaktu/urin 24 jam
- HbA1C
- glycated albumin
- 1,5-anhydrogulsitol
- C-peptida
- lainnya: insulin antibodi, islet cell antibody, anti glutamic acid decarboxylase
Metode analisis gula
harus punya batas deteksi rendah karena konsentrasi senyawa gula kecil dalam plasma terutama fruktosa dan galaktosa. Untuk kadar glukosa di plasma, urin, dan CSF (cerebrospinal fluid) dapat digunakan tiga kelompok metode: reduktometri, furfural, enzimatik.
Metode reduktometri
- metode ion ferisianat: hagedorn-jensen, hoffman, folin
- metode ion iodomerkurat: baudoin-lewin
- metode ion kupri: folin-wu, nelson-somogyi, brown
- penyidikan glukosa dalam urin
Metode furfural
antron, anilin, o-toluidin
metode enzimatik
glukosa oksidase (GOD), glukosa dehidrogenase (GDH), heksokinase (HEX)
Metode enzimatik yang sekarang umum digunakan
GOD-peridochrome (Werner)
GOD-PAP (Trinder)
Hexokinase
Glukosa dehidrogenase
Metode pereaksi heksokinase
menggunakan HEX dan glukosa 6 fosfat dehidrogenase (G6-PDH) yang katalisis reaksi Glukosa dan ATP dan Glukosa 6P dan NADP+. Serapan diukur di 340 nm setelah tercapai kesetimbangan reaksi; menyatakan konsentrasi glukosa di spesimen. Hasil sangat spesifik karena reaksi glukosa 6P dan NADP+ katalisisnya spesifik glukosa
GOD-PAP (metode trinder)
POD (peroksidase) katalisis reaksi H2Os dan 4-AAP dan fenol jadi pewarna quinoneimine dan air. Absorbansi diukur di 500 nm.
Reagen dan sampel GOD-PAP
reagen: glukosa oksidase mikrobial 12000 u/l, peroksidase > 1000 u/l, 4-AAP > 0.3 mM, fenol 4 mM, buffer ph 7.4 +- 0.1, stabiliser nonreaktif, pengawet.
sampel:
- serum atau plasma heparin dari darah tidak hemolisis.
- serum harus dipisah dari sel darah karena mempengaruhi hasil; kadar glukosa turun dalam kecepatan 7% per jam
- glukosa serum stabil 1 hari, di suhu 2-8
- tambahin NaF untuk hambat glikolisis 5-7%
GOD-PAP: notes
linieritas sampai 500 mg/dL. Kalau lebih, encerkan serum dengan NaCl 0.86% dan ulang pemeriksaan, terus hasil dikali 2.
Hasil gak dipengaruhi kreatinin, fruktosa, galaktosa dalam darah, dan EDTA
bilirubin gak pengaruh sampai 10 mg/dL
vit c (asam askorbat) kalau banyak bisa bikin hasil pemeriksaan rendah
Metode cepat di darah kapiler
digunakan dalam kondisi darurat atau pemantauan mandiri pada pasien diabetes. dilakukan dengan darah kapiler, diambil di ujung jari. diletakan di pita pereaksi yang mengandung glukosa oksidase, peroksidase, kromogen. Hasil lebih rendah dari hasil lab sampai 20%.
Pengambilan darah dan pengawetan spesimen
glukosa akan stabil kalau sudah dipisah dengan sel darah. kalau tidak, ditambah antiglikolitik NaF atau Na-monoidoasetat, atau 3 mg K-oksalat dan 1 mg NaF per ml darah. kalau NaF > 5 mg/ml bisa menghambat glukosa oksidase dan mempengaruhi reaksi o-toluidin.