Enzimometri Klinik

Question 1

Pengukuran aktivitas enzim

Answer 1

dinyatakan dalam international unit (IU). IU adalah jumlah enzim yang mengubah satu mikromol substrat setiap menit dalam kondisi optimum terdefinisi (suhu, ph, jumlah substrat). Penentuan dilakukan dengan metode kinetika reaksi atau end point method.

Question 2

Pengukuran enzim plasma

Answer 2

Pengukuran ini penting dicermati karena kadar enzim dalam plasma sangat rendah. Bisa terjadi saat terjadi organ atau jaringan mengalami kerusakan sehingga enzim dilepas bebas ke darah. Dilakukan untuk diagnosis kerusakan organ/jaringan, lebih mudah dari biopsi organ/jaringan.

Question 3

Asal enzim plasma

Answer 3

sel hati, jantung, pankreas, prostat, dan jaringan otot rusak.

Question 4

Manfaat pemeriksaan enzim plasma

Answer 4

Mengetahui awal penyakit sebelum ada gejala klinik, mengetahui tingkat kerusakan, indikator evolusi penyakit (untuk enzim tertentu). Digunakan untuk diagnosis molekuler dan bisa untuk konfirmasi defisit enzim genetik.

Question 5

Enzim plasma spesifik

Answer 5

senyawa yang berfungsi di plasma, kadar tetap karena diatur oleh sistem produksi aktif organ.

Question 6

Ceruloplasmin

Answer 6

Enzim oksidasi, mengandung tembaga terikat kuat yang hanya terpisah lewat denaturasi. punya 8 atom tembaga, jadi biru (garam tembaga) kalau dimurnikan. Kadar naik cepat saat inflamasi; IL-1 stimulasi transkripsi-transduksi gen pengkode utama saat fase parah.

Question 7

Lipoprotein lipase

Answer 7

diproduksi di permukaan kapiler oleh sel endotel. mengkatalisis hidrolisis trigliserida dari kilomikron dan VLDL, lepas asam lemak. Faktor penyebab jernihnya plasma

Question 8

Enzim koagulasi dan fibrinolisis

Answer 8

Disintesis oleh hati jadi kalau sintesis hati turun aktivitas enzim akan rendah. Pengukuran dilakukan untuk diagnosis fungsi hati.

Question 9

Enzim plasma nonspesifik

Answer 9

Hanya lewat di sirkulasi darah, tidak punya fungsi jelas di plasma dan kadarnya biasanya rendah

Question 10

Enzim eksresi

Answer 10

SIntesis di kelenjar eksokrin, seperti fosfatase asam (prostat), fosfatase basa (hati), amilase (pankreas), lipase (pankreas)

Question 11

Enzim sel

Answer 11

Berperan di jalur metabolisme; kadar di serum berubah-ubah tergantung aktivitas organ penghasilnya. Fase parah penyakit biasanya ditemukan setelah diagnosis dengan membandingkan pengukuran enzim yang bergerak cepat dalam plasma dan masa hidup pendek (CK, GOT) dengan enzim lambat dan masa hidup panjang (GPT, a-HBDH)

Question 12

AST/GOT (glutamic oxaloacetic transaminase) urutan organ dengan konsentrasi terbanyak

Answer 12

• jantung
• hati
• otot skelet
• ginjal
• otak
• pankreas
• limpa
• paru
  -serum

Question 13

Kondisi yang menyebabkan AST/GOT naik: kardiak

Answer 13

Serangan jantung/myocardial infarction: 20-200
pericarditis: < 100
cardiac arrythmia: < 200
acute rheumatic fever: < 100
habis operasi cardiac dan kateterisasi: < 100
Gagal jantung: < 100

Question 14

Kondisi yang menyebabkan AST/GOT naik: penyakit hati

Answer 14

hepatitis akut (viral, toksik): 500-4000
mononukleosis infectious: 50-800
sirosis: < 100
penyumbatan hati: < 100
lesi yang memakan tempat (granuloma, carcinoma metastatic) < 200
obstructive jaundice < 200

Question 15

Kondisi yang menyebabkan AST/GOT naik: penyakit lainnya

Answer 15

Shock 20-1000
pulmonary infarction < 50
pankreatitis akut 20-1000
renal infarction (berdasarkan hasil di hewan) < 200
cerebral necrosis < 50
dermatomyositis < 200
progressive muscular dystrophy < 200
delirium tremens < 100
slight hemolisis < 50
slight gangrene < 50

Question 16

kondisi dimana AST turun

Answer 16

kehamilan: 0-6

Question 17

Isoenzim

Answer 17

enzim yang mengkatalisis reaksi yang sama, tapi bentuk dan efisiensinya beda. Biasanya dibedakan berdasarkan pergerakan elektroforetiknya.

Question 18

Pengukuran aktivitas enzim

Answer 18

Dilakukan dengan menghitung hilangnya substrat, munculnya produk, atau penggantian kofaktor. Merupakan pengukuran kinetika reaksi/kecepatan reaksi.

Question 19

ALT

Answer 19

Diukur dengan SGPT. Normalnya konsentrasi rendah, dan naik jika ada kerusakan jaringan. Disebabkan kerusakan hati akut, trauma otot skelet, atau gagal jantung yang disertai shock, hypoxia, infark jantung, kelainan hemolitik.

Reaksi: alanin dan alfa ketoglutarat jadi piruvat dan glutamat

Question 20

Dasar pemeriksaan ALT

Answer 20

ALT katalisis transter amino dari L-alanin ke alfa ketoglutarat, terbentuk piruvat dan L-glutamat. L-laktat dehidrogenase katalisis reduksi piruvat dan oksidasi NADH jadi NAD. Hasilnya absorbansi turun berbanding lurus dengan aktifitas ALT. (Metode IFCC kinetik)

Question 21

Yang perlu diperhatikan dalam pemeriksaan ALT

Answer 21

• ALT serum stabil 4 hari di suhu 18-30, seminggu dalam 4.
• pengukuran berdasarkan penurunan absorbansi NADH di 340 nm diukur terhadap blanko air
• Reagensia: 5 bagian R1, 1 bagian R2. Abs harus dekat 0.8, stabil 2 hari di suhu 18-30 atau dua minggu di 2-8 tergantung brosur kit
• spesimen terbaik serum tidak hemolisis
• kalau kadar > 500 harus diencerkan

Question 22

AST/SGOT

Answer 22

normalnya konsentrasi rendah, naik jika kerusakan jaringan. Banyak di jantung, hati, otot skelet, ginjal, eritrosit. Umumnya ALT lebih tinggi pada hepatitis virus/toksik akut, kalau kronik AST lebih tinggi

Question 23

Reaksi enzimatik AST

Answer 23

aspartat dan alfa ketoglutarat jadi oxaloacetate dan glutamat. AST katalisis transfer amino dari L-aspartate ke alfa ketoglutarat dan menghasilkan oksaloasetat dan L-glutamat. Oxaloacetate mengaalami reduksi bersamaan oksidasi NADH jadi NAD di reaksi indikator malat dehidrogenase. Ditambah LDH untuk mencegah gangguan dari piruvat endogen. Metode modifikasi IFCC, kinetik

Question 24

Yang diperhatikan untuk pemeriksaan AST

Answer 24

• stabil selama 4 hari di suhu 18-30 dan 10 minggu di suhu 2-8
• spesimen baik serum tidak hemolisis
• pengukuran dengan metode kinetik, penurunan abs NADH di 340 nm dan blanko air
• reagensia: 5 bagian R1 dan 1 bagian R2, abs 0.8, stabil 2 hari di 18-30 atau 2 minggu di 2-8
• kadar lebih dari 500 diencerkan

Question 25

GGT

Answer 25

Diukur untuk diagnosa dan pemantauan terapi penyakit hati (sirosis alkoholik, tumor). Naik paling awal saat kasus ikterus obstruktif dan metastasis tumor

Question 26

Prinsip pemeriksaan GGT

Answer 26

GGT katalisis transger glutamyl dari L-glutamyl 3 carboxy 4 nitroanilide ke glisigliserin. Banyak 5-amino-2-nitrobenzoat yang terbentuk berbanding lurus dengan GGT dan diukur kinetik pada 405 nm berdasarkan warna kuning yang terbentuk. Metode kinetik soluble substrate, modifikasi Szasz

Question 27

Yang harus diperhatikan di pemeriksaan GGT

Answer 27

• di serum tanpa antikoagulan.
• stabil 7 hari di suhu 2-25, 1 tahun di -20
• Reagensia: larutkan diengan akuades sesuai volume, abs harus < 0.85, stabil 2 hari atau 2 minggu
• kalau kadar > 1000 harus diencerkan

Question 28

Creatinine kinase (CK)

Answer 28

kreatin dan fosfokreatin hidrolisis menjadi kreratinin. PCr ke Cr sebenarnya lebih bagus, tapi reagennya lebih mahal. Semua cara perlu ngukur ATP atau ADP

Question 29

Gangguan pada reaksi CK

Answer 29

• glutathione (glutathione reduktase juga pake NADPH sebagai kofaktor)
• Adenosine kinase phosphorylates ADP ke ATP; ion flor menghambat aktivitas AK.
• kalsium bisa jadi menghambat aktivitas CK karena enzimnya dependen Mg 2+