PCR Flashcards
1
Q
Que significa PCR?
A
Reacción en cadena de la polimerasa
2
Q
Para qué se usa la PCR?
A
Para obtener un gran número de copias de fragmentos de DNA
3
Q
Pasos de una PCR
A
- Secuencia molde
- Sintetiza
- Secuencia complementaria
4
Q
Qué se requiere para una PCR?
A
- Secuencia de DNA
- Enzima DNA polimerasa (Taq)
- Desoxiribonuleótidos (dNTP)
- Primers
5
Q
pH adecuado para una PCR
A
8.4
6
Q
Cofactor de la Taq polimerasa
A
Cloruro de magnesio
7
Q
Para qué se usan los iniciadores?
A
Para reconocer secuencias blanco en el DNA molde
- Proporcionan un extremo 3’
8
Q
Proceso
A
- Desnaturalización
- Se separan las cadenas de DNA con una temp de 95 grados C - Hibridación
- Los primers se alínean al extremo 3’
- 50-60 grados C - Extensión
- Taq actúa sobre el complejo de los primers
- Agrega dNTP’s complementarios para crear cadenas completas
- 72 grados C
9
Q
PCR en tiempo real
A
- Detecta los productos amplificados y sucede en cada ciclo de la reacción
- Cuantificación del DNA
