DNA recombinante Flashcards
Para qué se usa el DNA recombinante?
- Diagnóstico
- Prevención
- Tratamiento
Cómo funciona?
- Se necesita el gen de una célula. Esta se corta
- Se corta un plásmido
- El gen externo se inserta en el plásmido = DNA recombinado
- El DNA recombinado se inserta en otra bacteria = Se expresa
Enzimas de restricción qué son?
- Endonucleasas
- Mecanismo de defensa de la bacterias
Cómo se deben de usar las enzimas de restricción para cortar?
Se debe de usar la misma enzima de restricción para hacer los cortes para que sean complementarios
Tipos de cortes
I: Corte aleatorio(lejos del sitio de reconocimiento)
II: Secuencias palindrómicas: (Sitio de corte igual al de reconocimiento)
III: Asimétrico, lejos de la zona de reconocimiento
IV: DNA metilado
- Cohesivos: Cortes en diferente posición (3-5 nt de diferencia)
- Romos: Cortes simétricos en ambas cadenas
Qué es un vector?
Es una molécula de dsDNA que puede albergar un fragmento de DNA exógeno
tipos de vectores
- Bacteriófagos
- Plásmidos
- Cósmidos
- Fagémido
- BAC/YAC
Bacteriófagos
Virus que infecta a bacterias
- Se modifican geneticamente para insertar el DNA en una bacteria
- Capacidad de 25 pares de bases
Plásmidos
- Se corta y se le inserta DNA
- Capacidad de 20 pares de bases
Cósmido
- Vectores híbridos: Combinación de bacteriófago y plásmido
- Capacidad de 50 pares de bases
Fagémido
- Plásmido al que se le incorpora el origen de replicación de un fago
BAC/YAC
- BACterias
- Levaduras (YAC)