Partim Viro - Virustiter bepalen Flashcards
1
Q
Plaque forming unit assay PFU
A
- Virusoplossing wordt gebracht op monolaag gevoelige cellen.
- Als de virussen gebonden zijn op de cellen wordt een viskeus medium toegevoegd (zorgt dat virus zich enkel kan spreiden naar omliggende cellen) –> plaque forming
- Een plaque komt overeen met 1 viruspartikel dat initieel 1 cel heeft geinfecteerd.
- De virusverspreiding kunnen we dan gaan bestuderen door een indirecte immunokleuring
- Er wordt een verdunning gemaakt om het virus te kwantificeren.
2
Q
Tissue culture infective dose (TCID50)
A
De tweede manier om virussen te kwantificeren is het bepalen van de TCID50.
- Ook voor bRSV.
- Geeft de theoretische verdunningsgraad weer om 50% van de geïnoculeerde wells te infectereren.
- Wordt meestal gebruikt als virussen geen plaques aanmaken (kan wel voor plaque vormende).
- Na incubatie wordt gekeken naar percentage celdood (visueel - Giemsa kleuring) en wordt de TCID50 berekend.
