Partim Bacterio - Kleurtechnieken Flashcards
De microscoop
Oh kom op, dit kennen we nu wel hoor…
Factoren die het kleuringsproces kunnen beïnvloeden
- De temperatuur
- De concentratie van de kleurstof
- De aanwezigheid van bijtmiddelen of solventen
- De inwerkinge van zuren, alcohol of water om te ontkleuren
Eenvoudige kleuringen
Hierbij wordt gekleurd met een verdunde waterige oplossing van kleurstoffen, meestal een zure of basische kleurstof, zodat de delen met de sterkste affiniteit voor de kleurstof het sterkst gekleurd worden en de rest eerde ongedifferentieerd blijft
Differentiële kleuringen
Deze kleurmethode is gebaseerd op de eigenschap dat sommige micro-organisme kleurvasten zijn dan andere, zodat na ontkleuren en tegenkleuren een onderscheid kan gemaakt worden tussen verschillende soorten. Voorbeelden zijn de gramkleuring of de zuurvaste kleuring. De micro-organismen die kleurvast zijn en dus na ontkleuring hun heerste kleurstof vasthouden, noemt men positief. De andere die de eerste kleurstof uitspoelen noemt men negatief
Speciale kleuringen
Deze kleuringen worden gebruikt om welbepaalde bacteriële structuren specifiek aan te tonen. De kapselkleuring en de flagelkleuring zijn voorbeelden van specifieke kleuringen
GramKleuring Algemeen
De gram-kleuring is tot op heden een van de meest gebruikte kleurtechnieken in de microbiologie. Het is een differentiële kleuring, waardoor bacteriën verdeeld worden in twee groepen: de gram-positieve (paars) en gram- negatieve (roze/rood)
Onderdelen Gram kleuring
- Algemene kleurstof:(kristalviolet) alle bacteriën worden paars gekleurd door deze basische kleurstof, die zicht hecht aan negatieve groepen
- Kleurfixerende oplossing (lugol): het joodcomplex bind met kristalviolet en vormt een KV-I complex.
- Ontkleurder (alcohol-aceton): Het KV-I wordt bij sommige bacteriën weggewassen, terwijl het bij andere blijft
- Contrasterende kleurstof (saffranine): De basische kleurstof (binding aan negatieve groepen) kleurt de ontkleurde bacteriën roze
