Partim bacteriologie - Basisprincipes Flashcards
Voorbeelden vloeibaar medium
Bouillon, TSB
Voorbeelden Vast medium
Agar, TSA
Inoculum
Een aantal cellen voor het laten groeien van een bacteriecultuur, dit wordt vaak overgebracht (inoculeren) op of in een medium.
Wanneer een entnaald of entlus/oog
De overentin van vast of visceus materiaal gebeurt met een entlus of entoog. Bij fungi maken we gebruik van een entnaald.
Het beënten of inoculeren
Bij het beënten van voedingsbodems dient een speciale techniek gevolgd te worden om alle nodige manipulaties in steriele omstandigheden te kunnen uitvoeren met beide handen. Wie rechtshandig is neemt het te enten materiaal met de rechterhand en de voedingsbodem met de linker.
Het beënten van boullions
- Houdt de pipet of het entoog vast tussen duim en wijsvinger of middelvinger
- Breng met de linkerhand de stop van het buisje tussen de pink en de pinkmus van de rechterhand en maak door een draaiende beweging met de linkerhand het buisje los van de stop
- De rand van het buisje wordt nu afgevlamd in de bunsenbrander
- Beënt de bouillion
- Vlam de rand van het proefbuisje opnieuw af
- Breng met de linkerhand het buisje naar de rechterhand toe om het te sluiten
Het beënten van een agarplaat
Het beënten van vaste boedingsbodems in petriplaten laat toe kiemen te isoleren en in reincultuur te brengen. Een veel gebruikte methode is deze van de vijfhoek.
Methode van de vijfhoek
- Trek met het entoog, na het opnemen van kiemen, een zestal evenwijdige lijnen op het agaroppervlak.
- Entnaald flamberen en afkoelen door even in de agar te steken aan de kant van de plaat
- Vertrekkende vanuit de eerste zone opnieuw een zestal evenwijdige lijnen trekken
- Entnaald flamberen en afkoelen
- Telkens herhalen tot de vijfhoek volledig is
- De laatste lijnen zigzag uitstrijgen tot in het midden van de agar, waarbij geen contact optreed met de eerste entzone
Homogeen uitplaten van een kiem suspensie
Een druppel kiemsuspensie kan ook homogeen worden uitgeplaat door de kiemen centripetaal met een entoog zigzag te verspreiden over de vaste voedingsbodem of door de druppel homogeen uit te spreiden met een gebogen pasteurpipet.
Het beënten van een schuine agar.
Bij het beënten van een schuine agar zal de enting spiraalvorming uitgevoerd worden beginnende vanuit de stomp en dan naar boven toe over de schuine helling.
Wat is een pasteurpipet
Dit is een glazen pipet zonder markeringen. Hiermee kan je een vloeistof opzuigen en druppel per druppel verspreiden. Wordt gebruikt voor het overbrengen van een gekend volumen naar een plaat. GEEN VERDUNNINGEN.
Een druppel bevat ong. 50 uL vloeistof
Gegradueerde pipet
Nooit gebruikt voor beënten. Wordt gebruikt voor onder andere verdunningsreeksen.
Wanneer is de gemeten CFU-waarde betrouwbaar
Als er tussen de 20 en 200 CFU’s op een volledige agarplaat geteld worden
