Partim viro - Diagnostiek Flashcards
1
Q
ELISA - Algemene achtergrond
A
Enzyme-linked immunosorbent Assays.
- Maakt gebruik van antilichamen waaraan een enzym gebonden is om deze te detecteren –> enzym zorgt voor gekleurd product.
- Vaak gebruikt om viruspartikel te detecteren in sera van dieren.
- Verschillende soorten: Sandwich ELISA
2
Q
Sandwich ELISA
A
- Bestaat uit twee antilichamen specifiek voor een antigen. Het eerste antilichaam (capture antilichaam) dient als anker. Antigen wordt toe gevoegd (als deze aanwezig is), deze zal binden aan het capture antilichaam.
- Tweede antilichaam (met enzym) wordt toegevoegd en deze kan alleen binden als er een antigen aanwezig is. Als het bindt zorgt het enzym voor een gekleurd substraat wat te zien in met spectrofotometer. (concentratie antigen zorgt voor intenere verkleuring)
- Wasstappen tussen elke stap!
- Bij bRSV
3
Q
Multiplex PCR
A
- PCR verwijst naar het amplificeren van een specifieke DNA sequentie, door specifieke primers.
- DNA-polymerase, Nucleotides, DNA-staal en primer zijn nodig
- Stappen: 1. Denaturatie van DNA op hoge temp. 2. verlaging van temp voor aanhechting primers = annealing. 3. Verhoging temp voor DNA-polymerase = elongatie stap.
In Multiplex PCR worden er verschillende DNA sequenties geamplificeerd naast elkaar. Onderscheid tussen de verschillende DNA-sequenties is mogelijk door een verschil in aantal base baren in het amplicon (gel-elektroforese)
Onderscheid tussen : FHV, FCV en CF (Chlamydia felis)
