Označevanja!! Flashcards

1
Q

mikrotubuli

A

imunooznačevanje na alfa in beta tubulinu

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

intermediarni filamenti

A

imunooznačevanje proti keratinu

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

aktinski filamenti

A

imunooznačevanje proti G-aktinu
faloidin

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

jedro (9)

A

hematoksilin (modro)
azansko (rdeče)
feulgenova rkc
barvanje po giemsi
barvanje z acetokarminom
in situ hibridizacija
tripansko modrilo
imunooznačevanje
ISH

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

jedrna ovojnica

A

podaljšano osmiranje
imunooznačevanje

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

plazmalema

A

osmijev tetroksid za lipide, imunooznačevanje za proteine
PAS za glikokaliks

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

citoplazma

A

eozin (roza)
azansko (rumeno)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

ER

A

podaljšano osmiranje
encimska histokemija (dokaz za KDEL)
imunooznačevanje (dokaz za KDEL)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

GA

A

imunooznačevanje rezidencnih proteinov,
genski konstrukti z GFP

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

cis mrežje

A

podaljšano osmiranje
avtoradiografija (označimo monosaharide)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

cis cisterne

A

podaljsano osmiranje
avtoradiografija (označimo monosaharide)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

medialne cisterne

A

encimska histokemija (dokaz za NADPazo)
avtoradiografija

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

trans cisterne

A

encimska histokemija (dokaz za TPP)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

trans mrežje

A

encimska histokemija (dokaz za KF)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

mitohondrij

A

encimska histokemija (sukcinska dehidrogenaza, ATPaza)
imunooznačevanje za proteine dihalne verige, sukcinsko dehidrogenazo ali ATPazo
Janusovo zelenilo
Feulgenova rkc
In situ hibridizacija
citokrom oksidaza

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

peroksisom

A

encimska histokemija ali imunozonačevanje (dokaz aktivne katalaze)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
17
Q

lizosom

A

encimska histokemija za dokaz KF ali imunooznačevanje za dokaz KF
transfekcija celic z rekombinantno DNA

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
18
Q

kisli proteoglikani

A

alciansko modrilo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
19
Q

nevtralni proteoglikani in enostavni polisahardi

A

PAS

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
20
Q

nenasičene maščobne kisline

A

osmijev tetroksid

21
Q

maščobne kaplje

A

sudan, sudan barvila

22
Q

DNA

A

Feulgenova rkc
In situ hibridizacija
avtoradiografija (timidin, za podvojevanje)
imunooznaevanje proti Brdu, za podvojevanje)

23
Q

kromosomi

A

barvanje po Giemsi (g proge), acetokarmin, reverzno barvanje (r proge), barvanje s kvinakrinom (q proge)
in situ hibridizacija (DNA sonde na celoten kromosom)

24
Q

nekroza

A

tripansko modrilo (jedra celic s poškodovano plazmalemo se obarvajo modro)

25
Q

apoptoza

A

metoda TUNEL, imunooznačevanje proti aktivnim hidrolitičnim encimom kaspaz

26
Q

jedrna lamina

A

imunooznačevanje proti lamininu

27
Q

bazalna lamina

A

PAS reakcija
imunooznačevanje proti kolagen IV, laminin, perlekan, nidogen, GAG, proteoglikani

28
Q

encimska histokemija + kakšna fiksacija

A

substrat za encim, nastane primarni rkc produkt (neobarvan), po rkc z reagentom nastane končni rkc produkt ki je obarvan
šibka fiksacija z formaldehidom ali glutaraldehidom, poveča permeablinost membran)

29
Q

imunooznačevanje, kaj so označevalci

A

protitelesa se vežejo na antigen
inkubiramo v primarnih protitelesih in nato še v označnih sekundarnih protitelesih
fluorokrom, encim, koloidno zlato pri el. mkr.
fiksacija

30
Q

avtoradiografija (kako pri dna)

A

molekule z radioaktivnimi izotopi
tkivo fiksiramo, narežemo, fotografksa emulzija
beta delci ki se emitirajo reducirajo srebrove ione v elementarno srebro
dna podvajanje, označen timidin (čeprav boljše IO proti BrdU)

31
Q

in situ hibridizacija

A

verigi se ločita, inkubacija v mediju z enojnimi verigami, sonda, na sondi označevalec (radioaktivni izotop, encim, fluorokrom, antigen)

32
Q

TUNEL

A

pri apoptozi pride do fragmentacije DNA, označimo proste konce
s TdT vežemo molekule označene s fluorokromom, biotinom ali digoksigeninom na proste konce dna, potem to pokažemo z IO

33
Q

rekombinantna DNA

A

izoliran gen vnesemo v celico, sestavljena iz reporterskega gena GreenFluorecenceProtein in regulatorne regije

v celici se izrazi fluorescenlni protein
lahko vnesemo tudi siRNA ali protitelesa

34
Q

kemijska fiksacija + barvanje

A

fiksacija
izpiranje s pufrom
dehidracija v etanolih
ksilol
tekoč parafin
rezanje z mikrotomom
prenos v ksilol, odstranitev parafina
prenos v etanol
hidracija
barvanje
izpiranje z destilirano vodo
ksilol
kanadski balzam ali smola
krovnik

35
Q

fizikalna fiksacija

A

rahla kemijska fiksacija
prekritje z OCT
zamrznjene rezine (kriomikrotom)
dotaknemo z objektnikom na sobni T

36
Q

debelina parafinske rezine

A

3-10 mikrometrov

37
Q

debelina poltanke rezine

A

1 mikrometer

38
Q

debelina ultraranke rezine

A

50-100 nanometrov

39
Q

priprava ultratankih rezin

A

ultramikrotom, kadička z vodo
1. primarna fiksacija (glutaraldehid ali formaldehid)
2. izpiranje s pufrom
3. sekundarna fiksacija s osmijevim tetroksidom
4. dehidracija z etanoli
5. vklop v epon

40
Q

feulgenova rkc

A

NUKLEINSKE KISLINE
inkubacija v HCL, proste aldehidne skupine, veže se gor schiffov reagent
jedra in mitohondriji so rdeče vijolični

41
Q

PAS

A

OGLIJIKOVI HIDRATI
jodova kislina, nastanek prostih aldehisnih skupin, schiffov reagent
proteoglikani, glikogen, škrob, celuloza so rdeče vijolični

42
Q

alciansko modrilo

A

OGLJIKOVI HIDRARI
kisli proteoglikani v modro

43
Q

osmijev tetroksid

A

LIPIDI
dvojne vezi nenasč mašč kislin, reducira se na nižje črno obarvane osmijeve okside
tudi fiksira, težka kovina

44
Q

sudan

A

LIPIDI
bolje se topijo v maščobah kot v etanolu, zato difundirajo v mašč kaplje

45
Q

ABC

A

vrsta IO, biotin ima afiniteto do vezave na acvidin na avidin je vezana tudi peroksidaza, potem to z substratom DAB obarvamo, prej je treba se inkubirat v Hcl

46
Q

kaj se sintetizira na gER

A

proteini gER, GA, lizosomov in plazmaleme

47
Q

kaj se sintetizira na prostih ribosomih

A

citosol, citoskelet, mitohondrij, peroksisom

48
Q

toluidinsko modrilo obarva

A

kisle strukture, nukleinske kisline z modro, polisaharidne z vijolično, barvanje kromosomov

49
Q

debelina zamrznjene rezine

A

100-500nm