2.7 - gojenje celic in vitro Flashcards
Kje lahko gojimo celice in vitro?
Kaj vsebujejo?
v hranilnih medijih, v CO2 inkubatorjih
Vsebujejo:
- hranilne snovi - glukoza, aminokisline, vitamine, soli
- rastne faktorje
- hormone
- sredstva, za preprečevanje rasti bakterij in plesni
Kateri so pogoji, da lahko celice rastejo v hranilnih medijih?
- pH 7,4
- temperatura 37°C
Kaj dodamo hranilnim medijem?
fetalni kravji serum -> vsebuje mešanico rastnih faktorjev
Kje menjamo hranilne medije?
- v zaščitni mikrobiološki komori - laminarij
- zagotavlja sterilno okolje
Kdaj se celice delijo v kulturi?
Kako jim to omogočimo?
- če se pritrdijo na podlago
- za lažje pritrjevanje prevlečemo dno gojilne posode s plastjo sestavin medceličnine, npr. kolagen IV, laminin, fibronektin
Katere 4 osnovne vrste modelov in vitro poznaš?
- tkivne kulture
- primarne in sekundarne celične kulture
- trajne celične linije normalnih ali rakavo spremenjenih celic
Kako drugače imenujemo tkivno kulturo in kako jo pripravimo?
- kultura eksplantata
- majhen košček tkiva prenesemo v hranilni medij
-> košček majhen -> difuzija
Kdaj je tkivna kultura primerna?
Kaj lahko pripravimo iz nje?
- če imamo na voljo zelo malo vzorca
- lahko pripravimo sekundarno kulturo
Kako pripravimo celično kulturo?
- tkivo odvzamemo iz organizma
- prekinemo celične stike s pomočjo proteolitičnih encimov
- v laminariju nasadimo suspenijo ločenih celic v sterilne gojilne posode s hranilnim medijem
- celice gojimo v CO2 inkubatorjih in menjavamo hranilni medij na 2-3 dni
Iz katerih celic lahko pripravimo celično kulturo?
- iz embrionalnih celic
- iz še ne diferenciranih celic
- iz celic odraslega organizma
Katere so primarne celične kulture?
tiste, ki jih pripravimo neposredno iz tkiva
Katere so sekundarne celične strukture?
tiste, ki jih pripravljamo s presaditvijo primarnih celičnih kultur
Ali imajo primarne in sekundarne celične strukture omejeno število delitev?
da,
z vsako presaditvijo izgubljajo specifične lastnosti
Kaj je konfluentna kultura?
- sklenjena plast celic čez celotno površino
- gibanje in delitve celic se zmanjšajo -> kontaktna inhibicija
Kakšne so celice v trajni celični liniji?
- ohranjene imajo le osnovne lastnosti, ki celici omogočajo preživetje v kulturi (rast, delitve, gibanje)
- izgubile so večino specifičnih lastnosti
Katere trajne celične linije poznaš?
- trajne celične linije normalnih celic (netransformiranih)
- trajne celične linije rakavih celic (transformiranih)