Nutrition et croissance des microorganismes Flashcards

1
Q

Qu’est-ce que la croissance des microorganismes?

A

La croissance est définie par un accroissement du nombre de cellules ou de la masse cellulaire totale.

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2
Q

Chez la plupart des procaryotes, jusqu’où la croissance d’une cellule se poursuit-elle?

A

Chez la plupart des procaryotes, la croissance d’une cellule se poursuit jusqu’à sa division en deux nouvelles cellules par fission binaire (scissiparité).

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3
Q

Comment est la courbe de croissance microbienne?

A

La courbe de croissance d’une population bactérienne se développant dans un milieu de culture liquide (système fermé; en ‘batch’ ou discontinue) peut être représentée par le log 10 de la concentration bactérienne (bact./ml) en fonction du temps d’incubation (heures).

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4
Q

Quelles sont les 4 phases observables dans une courbe de croissance microbienne?

A

4 phases de croissance :

-latence
-exponentielle
-stationnaire
-de mortalité

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5
Q

Décrire la phase de latence. Sa durée dépend de quoi (2)?

A

-Phase d’adaptation dans laquelle il n’y a aucune division cellulaire

-La durée de la phase de latence varie en fonction :
—>de l’âge des bactéries
—>de l’origine (composition, température du milieu)

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6
Q

Décrire la phase de croissance exponentielle (log) (ce que c’est, la population, la durée, relation existante).

A

-Accélération de la croissance des bactéries ainsi que de la division cellulaire

  • Les microorganismes se développent et se divisent à la vitesse maximale
  • La population est uniforme (propriétés chimiques et physiologiques)
  • La phase de croissance exponentielle est de courte durée…
  • Relation entre la concentration des nutriments et la croissance
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7
Q

Décrire la phase stationnaire (comment varie le nombre de microorganismes + causes (2)).

A
  • Le nombre total de microorganismes viables reste constant (Équilibre entre division et mort cellulaire) (109 cellules/ml)

Causes :
-Limitation des nutriments
-Accumulation de déchets toxiques, acidité

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8
Q

Décrire la phase de mortalité (comment varie le nombre de microorganismes + causes (3)).

A

-Arrêt de la division cellulaire

-Le nombre de bactéries viables ou cultivables diminue de façon constante en fonction du temps

Causes :
- Dommages irréparables conduisant à une perte de viabilité
- Réponse génétique déclenchée (Mort cellulaire programmée)
- Formation de cellules viables non cultivables (VNC) (dormance)

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9
Q

Quelles sont les méthodes directes de mesure de la croissance des microorganismes (3)?

A

-Décompte total des microorganismes (dépend de la taille)

-Décompte des unités viables (capable de se reproduire)

-Méthode des filtres de cellulose

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10
Q

Lors de la méthode décompte total des microorganismes, quels sont les outils utilisés (2) et quels microorganismes sont observés à l’aide de quoi?

A

-Compteur de cellules Coulter et Cytomètre de flux (protistes, levures et cellules mammifères)

  • Chambre de comptage observée au microscope
    • Hémocytomètre : Les levures et cellules mammifères
    • Cellule de Petroff-Hausser : Les bactéries
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11
Q

Qu’est-ce qu’un hémocytomètre vs une cellule de Petroff-Hausser (dimensions, cellules/ml)?

A

Hémocytomètre :
-Dimensions: 0.1cm x 0.1cm x 0.01cm = 1/10000 cm3
-Cellules/ml: 10000 x cellules comptées x facteur de dilution

Cellule de Petroff-Hausser :
-Dimensions : 10 fois plus petit que l’hémocytomètre -Cellules/ml: 100000 x cellules comptées x facteur de dilution

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12
Q

Par rapport au décompte total des microorganismes, quels sont les avantages de cette méthode (4)? Et ses inconvénients (2)?

A

Avantages :
- facile à utiliser
- rapide
- peu coûteux
- informations sur la taille/morphologie des microorganismes

Inconvénients :
- densité microbienne élevée (petit volume)
- décompte des cellules mortes et vivantes

  • Il existe maintenant des kits commerciaux permettant de distinguer les cellules mortes et vivantes (Live/Dead BacLight Bacterial Viability Kit)
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13
Q

Quel est le principe de la méthode décompte des unités viables? Quels sont les deux types d’unités que l’on peut retrouvé avec cette méthode?

A

-Méthode de dilutions en milieu liquide et d’étalement sur gélose
- Méthode des filtres de cellulose

Types retrouvés :
- Unités Formant des Colonies (UFC)
- cellules Viables Non Cultivables (VNC)

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14
Q

Par rapport au décompte des unités viables, quels sont les avantages de cette méthode (1)? Et ses inconvénients (1)?

A

Avantages :
- les colonies proviennent seulement des cellules vivantes capables de se reproduire

Inconvénients :
-Amas de cellules = 1 colonie

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15
Q

Quels nombres est un résultats significatifs quand la méthode utilisée est le décompte des unités viables?

A

Résultat significatif entre 30-300 colonies

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16
Q

Qu’est-ce que la méthode des filtres de cellulose?

A

L’échantillon est passé sur un filtre de cellulose dont la porosité retient les micro-organismes.

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17
Q

Quelles sont les méthodes indirectes pour la mesure de la croissance des microorganismes (2)?

A

-Mesure de l’activité

-Mesure de la masse cellulaire

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18
Q

Qu’est-ce que la méthode de mesure de l’activité?

A

En mesurant la consommation de substrats (C, N2, O2 ou d’un facteur spécifique de croissance), la concentration des constituants cellulaires (ATP, FAD ou FMN, ADN, protéines) ou l’excrétion de certains produits (CO2 ou NH3), il est possible d’évaluer la concentration microbienne d’un échantillon.

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19
Q

Quelles sont les deux façons d’utiliser la méthode de la mesure de la masse cellulaire?

A
  • Poids sec :
    • Récolte des micro-organismes (filtration sur membrane)
    • Lavage + dessiccation (100 à 110oC)
    • Pesée (toutes les bactéries, mortes ou vivantes sont pesées)
    • Valeurs exprimées en g/L
    • Valeurs exprimées en cellules/ml (nécessite un décompte
    cellulaire avant de récolter les bactéries)
  • Turbidité par la densité optique (D.O.) : Turbidimétrie
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20
Q

Qu’est-ce que la turbidimétrie?

A

Évaluation de la concentration cellulaire à l’aide de sa densité optique [D.O.] (absorption lumineuse) à une certaine longueur d’onde (Ex 600 nm).

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21
Q

Vrai ou faux : Dans une certaine limite (106/ml < [ ] < 108/ml), la D.O. d’une suspension microbienne est inversement proportionnelle à sa concentration cellulaire.

A

Faux : Dans une certaine limite (106/ml < [ ] < 108/ml), la D.O. d’une suspension microbienne est directement proportionnelle à sa concentration cellulaire.

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22
Q

Que doit-on faire pour évaluer la concentration microbienne d’une suspension inconnue?

A

On doit préalablement établir à l’aide d’un spectrophotomètre une courbe de référence pour des concentrations microbiennes connues.

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23
Q

Qu’est-ce que le temps de génération ou de doublement (g)? Quelle est son expression mathématique?

A

Intervalle de temps entre deux divisions cellulaires successives.

g = t/n
—> t = temps
—> n = nombre de générations

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24
Q

Qu’est-ce que le taux de croissance (k)? Quelle est son expression mathématique?

A

Nombre de générations par unité de temps (inverse du temps de génération).

k = n/t
—> n = nombre de divisions
—> t = temps

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25
Q

Qu’est-ce que le nombre de générations (n)? Quelle est son expression mathématique?

A

n = (logNt - logNo)/log2
—> Nt = nombre de cellules au temps t
—> No = nombre initial de cellules de la population

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26
Q

Quelles sont les caractéristiques de la culture continue/ouvert (5)?

A

• Apport de nutriments

• Élimination des déchets

• La phase de croissance exponentielle est maintenue sur une longue période

• Concentration constante de la biomasse

• Il y a 2 types : Chémostat et turbidostat

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27
Q

Chémostat vs turbidostat

A

– Chémostat : Apport constant de nutriments à la même
vitesse que le milieu est éliminé

– Turbidostat : vitesse de dilution déterminée par la densité

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28
Q

À quoi servent les milieux de culture?

A

Préparations utilisées pour réaliser la croissance, le transport ou la conservation des microorganismes.

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29
Q

Quelles sont les caractéristiques des milieux de culture (3)?

A

• Leurs compositions varient à l’infini

• Doivent respecter les exigences nutritives des micro-organismes

• La composition précise d’un milieu de culture dépend de l’espèce à cultiver

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30
Q

Quels sont les 2 types de milieux de culture? Leur composition?

A

1) Liquides: bouillons de culture (produisent une suspension microbienne)

2) Solides:
- Même composition que les bouillons, sauf qu’on ajoute de l’agar à 1-2% (produisent des colonies microbiennes)

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31
Q

Qu’est-ce que l’agar?

A

Polysaccharide extrait d’une algue rouge et utilisé comme agent gélifiant (non métabolisé par les microorganismes).

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32
Q

Les types de milieux de culture sont classés selon quoi (2)?

A

1) Classés selon la composition :
-synthétique ou empirique

2) Classés selon l’usage :
-sélectif ou différentiel (ou les deux)

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33
Q

Expliquer les milieux synthétiques/définis vs empiriques/complexes.

A

1) Synthétiques ou définis :
-composition chimique entièrement connue
-Milieux pauvres permettent la croissance de seulement certains microorganismes (source de C, N, S, etc…)

2) Empiriques ou complexes :
-composition chimique indéterminée (peptone, extrait de levure)
-Milieux riches permettent la croissance d’une grande variété de microorganismes

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34
Q

Quels sont les types de milieux selon l’usage (3)?

A

-Milieux de base ou de propagation

-Milieux sélectifs

-Milieux différentiels

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35
Q

Décrire les milieux de base ou de propagation.

A

Permettent la croissance de la plupart des microorganismes.

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36
Q

Décrire les milieux sélectifs.

A

Contiennent des composés qui inhibe de façon sélective la croissance de certains microorganismes sans en affecter d’autres.

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37
Q

Décrire les milieux différentiels.

A

Contiennent de substances spécifiques permettant de distinguer différentes bactéries par la couleur de leurs colonies.

38
Q

Quels sont les besoins nutritifs des microorganismes (3 types)?

A

-Macroéléments :
—>Eau (H, O)
—>Molécules organiques (glucides lipides, protéines, acides nucléiques) (C, H, O, N, P, S)
—>Ions (cofacteurs d’enzymes) (K, Mg, Ca, Fe)

-Microéléments :
—>Éléments traces (Mn, Co, Cu, Zn)

-Besoins spéciaux :
—>Éléments restreints (B, Al, V, Mo, I)

39
Q

Que sont des nutriments?

A

Substances utilisées pour la biosynthèse et la conversion de l’énergie, et donc requises pour la croissance microbienne.

40
Q

Combien y a-t-il d’éléments nécessaire en grande quantité (macroéléments) pour la synthèse de macromolécules?

A

10 (C, H, O, P, K, N, S, Ca, Fe, Mg)

41
Q

De quoi ont besoin les êtres vivants pour subsister (3)? Pour chaque besoin, nommer les deux types d’organismes possibles.

A
  • Source de carbone (Unité structurale de base de toutes molécules organiques)
    •Autotrophes: CO2 seul ou principale source
    •Hétérotrophes: Molécules organiques préformées (Ex. glucides, lipides…)
  • Source d’énergie
    •Phototrophes: Lumière
    •Chimiotrophes: Oxydation des composés organiques (Ex.
    glucose) et inorganiques (Ex. H2S,NH4+,Fe2+,…)
  • Source d’électrons (H/e-)
    •Lithotrophes: Molécules inorganiques réduites (H2S, NH4+, Fe2+,…)
    •Organotrophes: Molécules organiques réduites (Ex. glucose)
42
Q

Quelles sont les 3 types de sources d’énergie des microorganismes?

A

1-Phototrophie = lumière

2-Chimiorganotrophie = composé organique réduit —> composé organique oxydé

3-Chimiolithotrophie = composé inorganique réduit —> composé inorganique oxydé

*Résultat = énergie chimique —> travail

43
Q

Quels sont les principaux types nutritionnels chez les microorganismes (4)? Nommer leur source d’énergie, électrons et carbone.

A

Autotrophe photolithotrophe
—> Énergie lumineuse
—> Donneur inorganique d’électrons
—> CO2 comme source de carbone

Hétérotrophe photoorganotrophe
—> Énergie lumineuse
—> Donneur organique d’électrons
—> Source organique de carbone (CO2 peut aussi être utilisé)

Autotrophe chimiolitotrophe
—>Source chimique d’énergie (inorganique)
—> Donneur inorganique d’électrons
—> CO2 comme source de carbone

Hétérotrophe chimioorganotrophe
—> Source chimique d’énergie (organique)
—> Donneur organique d’électrons
—> Source organique de carbone

44
Q

Quelles sont les 8 exigences nutritionnelles?

A

1) Carbone (C)

2)Azote(N)

3) Phosphore (P)

4) Soufre (S)

5) Ions inorganiques (Na+, K+, Mg2+, Fe2+, Ca2+, Co2+, Cu2+, Mn2+, Zn2+)

6) Facteurs de croissance

7) Eau

8) Oxygène

45
Q

Qu’est-ce que le carbone?

A

Unité structurale de base de toutes molécules organiques

46
Q

Quelle est la source de carbone pour les autotrophes?

A

Inorganique
—> Les chimioautotrophes et les photoautotrophes peuvent utiliser le CO2 comme seule source de carbone pour la biosynthèse de leurs macromolécules.

47
Q

Quelle est la source de carbone pour les hétérotrophes?

A

Organique
—> Substances hydrocarburées (glucides, protides, lipides, hydrocarbures, acides organiques, polyalcools,…)

48
Q

Vrai ou faux : Presque toutes les substances carbonées peuvent être dégradées.

A

Vrai

49
Q

Dans quelle condition est-ce qu’une substance est considérée comme non-biodégradable?

A

Lorsqu’aucun chimiohétérotrophe ne peut dégrader une substance, cette dernière est considérée non-biodégradable.

50
Q

D’où provient l’azote (pour nos besoins nutritionnels)?

A

Synthèse des acides aminées (protéines), bases azotées (purines, pyrimidines), certains glucides/lipides, cofacteurs enzymatiques,…

51
Q

Quelle est la forme de l’azote qui est le plus utilisée pour les microorganismes?

A

La forme organique
—> Composés azotés tels les acides aminées, les bases azotés, phospholipides,…

52
Q

Quelles sont les formes inorganiques d’azote utilisées pour certains microorganismes (4)?

A
  • Azote atmosphérique (N2): Fixation de l’azote atmosphérique (besoin de nitrogénases) certaines bactéries seulement (Ex: Rhizobium, Azotobacter)
  • Ammoniaque (NH3): Oxydation de l’ammoniaque en nitrites (nitrosation)
    Ex: Nitrosomas
  • Nitrites (NO2): Oxydation des nitrites en nitrates (NO3) (nitration)
    Ex: Nitrobacter (Nitrification = nitrosation + nitration)
  • Sels d’ammonium (NH4 +): Plusieurs espèces
    Ex: E. coli, Pseudomonas aeruginosa
53
Q

Pourquoi le phosphore est essentiel pour nos besoins nutritionnels? Comment est-il absorbé?

A

Élément essentiel des acides nucléiques, phospholipides, de nombreux coenzymes et de l’ATP.

  • Absorbé sous forme inorganique (PO4 2-)
54
Q

Pourquoi le soufre est-il essentiel pour nos besoins nutritionnels? Comment est-il absorbé?

A

Élément essentiel de certains acides aminés (cystéine, méthionine).

-Principalement absorbé sous forme de sulfate (SO4 2)- ou de composés soufrés organiques (cystéine)

55
Q

Pourquoi les ions inorganiques sont essentiels pour nos besoins nutritionnels?

A

Essentiels pour l’équilibre physicochimique de la cellule (constituants des enzymes et des coenzymes, constituants des structures cellulaires, cofacteurs enzymatiques.

56
Q

Qu’est-ce qu’un facteur de croissance?

A

Composés organiques essentiels à la croissance que la bactérie ne peut synthétiser elle-même (doivent être préformés).

57
Q

Quels sont les 3 types de facteur de croissance?

A

1) acides aminés
2) vitamines
3) bases azotées (purines/pyrimidines)

58
Q

Qu’est-ce qu’un prototrophe?

A

Microorganisme de type sauvage du point de vue nutritionnel; autonome, pouvant croître sur un milieu minimal

59
Q

Qu’est-ce qu’un auxotrophe?

A
  • Perte de capacité à synthétiser certains métabolites essentiels (comparé au type sauvage)
  • Incapable de croître sur un milieu minimal (il faut l’enrichir avec la substance)
60
Q

Pourquoi l’eau est un besoin nutritionnel essentiel (2)?

A
  • Principal constituant cellulaire des microorganismes
  • Indispensable comme solvant et dans les réactions biochimiques
61
Q

Quels sont les 2 états de l’eau?

A

Eau liée: liée aux macromolécules, ions ou toute surface hydrophile

Eau libre: suffisamment éloignée d’une surface et libre de ses mouvements, propriétés physico-chimiques normales

62
Q

Vrai ou faux : Seule l’eau libre du milieu est disponible pour les microorganismes.

A

Vrai

63
Q

Qu’indique l’activité de l’eau libre?

A

Donne un indice de la disponibilité de l’eau pour les microorganismes.

64
Q

Vrai ou faux : La plupart des microorganismes exigent une faible quantité d’eau libre pour leur croissance.

A

Faux : La plupart des microorganismes exigent une grande quantité d’eau libre pour leur croissance.

65
Q

Pour quel type d’organisme, l’oxygène est presque toujours essentiel?

A

Eucaryotes

  • Certaines levures peuvent croître en absence d’oxygène (fermentation)
66
Q

Pourquoi l’oxygène est essentiel? Pourqui il ne l’est pas?

A
  • Accepteur final d’électrons dans la chaîne respiratoire des organismes AÉROBIQUES
  • Toxique pour les bactéries ANAÉROBIQUES
  • Procaryotes : L’oxygène est soit nécessaire, toléré ou toxique
67
Q

On distingue 5 groupes de bactéries selon leur réponse à l’égard de l’oxygène, quels sont-ils?

A

1-Aérobie stricte
2-Microaérophile
3-Anaérobie stricte ou obligatoire
4-Anaérobie facultatif
5-Anaérobie aérotolérants

68
Q

Décrire le groupe de bactéries aérobies strictes (2).

A

• Bactéries qui exigent obligatoirement l’oxygène libre pour se multiplier

• L’oxygène libre est utilisé comme accepteur final d’électrons dans la chaîne respiratoire.

69
Q

Décrire le groupe de bactérie microaérophiles (2).

A

• Bactéries qui ne se développent qu’en présence d’une faible pression d’oxygène libre, inférieure à celle de l’atmosphère (21%)

• Pression d’oxygène libre de 2 à 10 %

70
Q

Décrire le groupe de bactéries anaérobies strictes ou obligatoires (3).

A

•Bactéries qui ne peuvent se multiplier qu’en absence totale d’oxygène libre

•L’oxygène libre ne peut être utilisé comme accepteur final d’électrons dans la chaîne respiratoire

•Elles utilisent d’autres substances oxydatrices comme des nitrates, des sulfates ou des carbonates comme accepteur final d’électrons; c’est la respiration anaérobie

  • Si l’accepteur final est un composé organique on parle alors de fermentation
71
Q

Décrire le groupe de bactéries anaérobies facultatifs (2).

A

• Bactéries capables de croître en présence ou en absence totale d’oxygène libre

• Ces bactéries peuvent utiliser soit la respiration (aérobie), soit la fermentation (anaérobie)

72
Q

Décrire le groupe de bactéries anaérobies aérotolérants (2).

A

• Bactéries anaérobies mais la présence d’oxygène ne les tue pas

• En présence d’oxygène, leur croissance est plus faible que celle des anaérobies facultatifs car elles n’utilisent pas l’oxygène.

73
Q

Pourquoi l’oxygène peut être potentiellement toxique?

A

Car la réduction de l’oxygène (gain d’électrons) produit une série de radicaux libres.

74
Q

Quels sont les radicaux libres toxiques possibles de l’oxygène (4)?

A

O2- (anion superoxyde)

H2O2 (peroxyde d’hydrogène)

H2O + OH (radical hydroxyle)

H2O (eau)

75
Q

Le processus de réduction de l’oxygène est accéléré grâce à 2 enzyme, quelles sont-elles?

A

1) Superoxyde dismutase (SOD) : Dismutation
2 O2- + 2 H+ = H2O2 + O2

2) Catalase : transforme le peroxyde en eau et en oxygène 2 H2O2 = 2 H2O + O2

76
Q

Comment faire croître les bactéries anaérobies (3)?

A

1- Bouillon au thioglycolate

2-Système GasPak

3-Chambre de travail anaérobie

77
Q

Quels sont les facteurs physiques influençant la croissance des microorganismes?

A

1-La température
2-L’acidité (pH)
3-La pression osmotique

78
Q

Pourquoi la température est un facteur très important dans la croissance des microorganismes?

A

Elle affecte directement les réactions enzymatiques (métabolisme) des microorganismes.

79
Q

Quelles sont les 3 données de température importantes?

A

Température minimale: Température la plus basse à laquelle un microorganisme peut croître

Température optimale: Température idéale permettant aux microorganismes un taux de croissance maximal

Température maximale: Température la plus élevée à laquelle un microorganisme peut croître

80
Q

Vrai ou faux : On peut classer les microorganismes selon la température caractéristique de leur croissance.

A

Vrai

81
Q

Classer en ordre croissant les types de microorganismes selon leur température caractéristique de croissance.

A

1-Psychrophile (<10˚C)
2-Psychrotrophe (20-30˚C)
3-Mésophile (20-45˚C)
4-Thermophile (55-65˚C)
5-Hyperthermophile (80-133˚C)

82
Q

Quelles sont les températures de réfrigération, du corps humain et de pasteurisation?

A

-Réfrigération = 4˚C
-Corps humain = 37˚C
-Pasteurisation = 66-71˚C

83
Q

Pourquoi l’acidité est un facteur qui influence la croissance?

A

L’activité enzymatique des microorganismes est directement influencée par le pH. En milieu acide ou en milieu alcalin, les enzymes sont normalement inactivées.

84
Q

Quelles sont les 3 données de pH importantes?

A

pH minimal: valeur de pH la plus basse à laquelle un microorganisme peut croître

pH optimal: valeur de pH idéale permettant aux microorganismes un taux de croissance maximal

pH maximal: valeur de pH la plus élevée à laquelle un microorganisme peut croître

85
Q

Quels sont les 3 types de microorganismes selon le pH optimal?

A

1) Acidophiles : pH 0-5.5
2) Neutrophiles : pH 5.5-8.0
3) Alcalophiles : pH 8.5-11,5

86
Q

Quel est le pH optimal pour les bactéries? Et pour les mycètes?

A

Les bactéries préfèrent un milieu à pH 6-7 tandis que les mycètes préfèrent un pH à ~5-6.

87
Q

Que cause la présence d’une membrane plasmique à perméabilité sélective chez les microorganismes?

A

La présence d’une membrane plasmique à perméabilité sélective fait en sorte que les microorganismes sont affectés par des modifications de la concentration en solutés (concentration osmotique) de leur milieu.

88
Q

Expliquer ce qui arrive chez un microorganisme en milieu hypotonique et hypertonique.

A

-Lorsque les bactéries sont placées en milieu hypotonique, l’eau entre dans la cellule mais la paroi oppose une certaine résistance mécanique à la pression osmotique

-Lorsqu’une bactérie est placée en milieu hypertonique, l’eau quitte la cellule au profit du milieu ambiant (déshydratation)
—>Plasmolyse (la membrane se rétracte de la paroi) - Faible disponibilité en eau libre

89
Q

Quels sont les types de microorganismes selon leur réponse à la pression osmotique (3)?

A

1) Osmotolérants: tolèrent une pression osmotique élevée

2) Osmophiles: nécessitent une pression osmotique élevée pour croître (milieux hypertoniques)

3) Halophiles: nécessitent une concentration en NaCl > 0.2M

90
Q

Nommer des composés osmocompatibles ou osmorégulateurs (3). Que permettent-ils?

A

Composés osmocompatibles ou osmorégulateurs: Glycine, bétaïne, glycérol

• Permettent d’ajuster l’activité de l’eau du cytoplasme sans nuire aux réactions
biochimiques des cellules

91
Q

Comment est le bouillon nutritif au thioglycolate selon le type de bactéries (par rapport à l’oxygène)?

A
  • Anaérobie stricte = trouble sur le dessus du tube
  • Anaérobie stricte = trouble dans le fond du tube
  • Anaérobie facultatifs = trouble tout le long du tube
  • Microaérophiles = trouble dans le haut du tube, mais moins que aérobie stricte
  • Anaérobie aérotolérant = trouble tout le long du tube, mais dans la portion du haut c’est moins trouble que anaérobie facultatif