Nukleotide und Nukleinsäure

Question 1

Wie sieht Doppelhelix aus?

Answer 1

Basen paaren miteinander über H-Brücken und liegen innen gestapelt vor, hydrophiles Zucker-Phosphat außen
GC-Paar stabiler (mehr H-Brücken)
polymerisierte Nukleotide in Richtung 5’-3’

Question 2

Welche Faktoren beeinfussen die DNA-Stabilität?

Answer 2

Basenstapelung: Pur-Pur > Pur-Pyr > Pyr-Pyr
Metallkationen: inteagieren mit Phosphatgruppen und stabilisieren den Duplex durch Verminderung der Ladungsabstoßung zwischen den Phosphaten

Question 3

3 DNA Formen

Answer 3

B DNA : häufig in Zellen, rechtsgängig
A DNA: bevorzugte Form von RNA Duplexen, rechtsgängig
Z DNA: spezielle Form, linksgängig

Question 4

Grundfunktion von Nucleinsäuren

Answer 4

-DNA trägt Erbinformation
-komplementäre Doppelstrangsstruktur ermöglicht semikonsevative Replikation während der Zellteilung
-katalysiert durch DNA-Polymerase, benötigt einen Primer und Nukleosid-5’-Triphosphate
-Transkription: Erzeugung einzelsträngiger NS

Question 5

Restriktionsnukleasen

Answer 5

sequenzspezifisch
schneidet innerhalb Erkennungssequenz –> Typ II
von Bakterien als Schutz gegen Fremd- DNA entwickelt
Restriktionsfragmente durch Gelelektrophorese nach Größe getrennt und sichtbar gemacht–> Bahnen und Analyse der Fragmentgrößen –> Restriktionskarte

Question 6

Komponente für Sanger-Kettenabbruchmethode

Answer 6

Primer
dNTPs
DNA Polymerase
markierten ddNTP(s)

Question 7

PCR (Polymerase Chain Reaction)

Answer 7

Primer für beide 5’-Ende beider Stränge, dNTPs, hitzestabile DNA-Polymerase
-Denaturierung (95 grad): dsDNA in ssDNA zerlegt
-Annealen (40-60 grad): Anlagerung von Primer an komplementären ssDNA
-Amplifizieren :72 grad, um DNA-Polymerase zu aktivieren

Question 8

Wie läuft Sanger-Reaktion ab?

Answer 8

DNA-Polymerase verlängert Primer, zufälliger Einbau ddNTP führt zu Abbruch –> Sequenz kann abgelesen werden