Mort cellulaire régulée - Apoptose extrinsèque

Question 1

Quels sont les récepteurs de mort cellulaire?

Answer 1

FAS, TRAIL, TNR

Question 1

Lorsque le ligand se lie au cell death receptor, qu’est-ce qui se passe?

Answer 1

Formation d’un trimer du récepteur qui permet d’exposer le domaine DD (death domain)

Question 2

Lorsque le DD est exposé, que se passe-t-il?

Answer 2

Formation du DISC (Death inducing signaling complex): DD recrute FADD qui comporte un DED (death effector domain) et une procaspase8 pour recruter les caspases initiatrices (casp8 et 10)

Question 3

Vrai ou faux: l’activation du DISC recrute casp-8 et permet l’activation des casp-executrices, ce qui est suffisant pour activer apoptose.

Answer 3

Vrai

Question 4

Dans des cellules qui expriment de hauts niveaux d’inhibiteurs d’apoptose (XIAP), l’activation des casp exécutrices n’est pas suffisant. Que se passe-t-il?

Answer 4

Les joueurs de l’apoptose intrinsèque (BCL-2, MOMP, pores, libération de cytochrome C, etc) entrent en jeu = formation d’un apoptosome pour casp3 et 7 qui sont activées et libèrent d’autres protéines dont SMAC

Question 5

Nomme un inhibiteur d’inhibiteur d’apoptose (inhibe XIAP)

Answer 5

SMAC

Question 6

Nomme un inhibiteur d’apoptose et ce qu’il inhibe?

Answer 6

XIAP, inhibe les caspases exécutrices

Question 7

Nomme une situation où les cellules trouvent des mécanismes qui les rendent insensibles aux signaux de mort cellulaire et donc l’Activation de casp8 est insuffisante pour mort

Answer 7

Cancer ->hauts niveaux de XIAP

Question 8

Nomme 3 autres types de mort cellulaire régulée.

Answer 8

Nécrose: perturbation de l’homéostasie extra ou intracellulaire (rupture de membrane plasmique)
Pyroptose: casdernine D est cleavée par casp1 et 11) -> pores et rupture de membrane
Mort cellulaire immunogénique (MCI): active une réponse immunitaire

Question 9

Pourquoi est-il impossible de tester la mort cellulaire immunogénique en culture cellulaire 2D? (in vitro)

Answer 9

Parce que la capacité d’un stimulus d’induire une mort cellulaire immunogénique doit être testée en vivo, parce que ça implique la libération d’antigènes et de molécules qui favorisent l’activation des APC (DAMPs ex) et donc on a besoin de la présence de cellules immunitaires qui habituellement migrent jusqu’au site, mais ici en culture cell, on peut pas avoir ça.

Question 10

Que peut-on faire in vitro pour étudier la mort cellulaire immunogénique?

Answer 10

Tester si l’agent chimiothérapeutique est capable de libérer des facteurs, mais pas capable de confirmer s’il y a eu mort cellulaire (tester in vivo)

Question 11

Que font les DAMPS (dire les types de DAMPS)

Answer 11

ATP, CALR, HMGB1
Ils sont relâchés dans le milieu et supportent le potentiel d’un agent chimiothérapeutique d’induire la mort cellulaire immunogénique

Question 12

Est-ce qu’une methode unique est suffisante pour prouver qu’il y a mort cellulaire induite par un stimuli d’intérêt?

Answer 12

Non. Toujours au moins 2 techniques complémentaires
Si suspect que agent pharmaco induit MRC, répondre à 2 questions
1. Est-ce que les cellules sont réellement mortes? Entre mort et diminution de prolifération, les différences sont subtiles. 2 techniques complémentaires pour supporter et confirmer la mort cellulaire

Question 13

Quelle technique pourrait être faite pour déterminer s’il y a MCR?

Answer 13

Mesurer la viabilité en mesurant l’activité mitochondriale (nb de mito égal dans chaque cellule)
Regarder l’exposition des PS (phosphatidil serine) s’ils sont symétriques ou asymétrique (normal)
Substrats colorimétriques pour détecter l’activité des caspases et clivage des caspases par immunobuvardage

Question 14

Nomme 3 thérapies en cancer.

Answer 14

• BH3 mimics: intéragir avec les anti-apoptotiques et prévenir leur interaction avec BAXBAK et donc permettre à BAXBAK de faire leur job (apoptoser)
• SMAC mimetics : intéragissent avec XIAP pour enlever l’inhibition des caspases et permettre l’apoptose
• Anticorps/ligands de TRAIL pour favoriser la mort extrinsèque (fournir le ligand pour activer l’apoptose)

Question 15

Nomme 4 pathologies liées à la MCR

Answer 15

Alzheimer/parkinson, Ischemies, Arthrite rhumatoide, cancer

Question 16

Comment l’apoptose peut promouvoir la carcinogénèse?

Answer 16

Par l’ANASTASIS.
MOMP est induit dans TOUTES les mitochondries = apoptose inévitable, mais dans certaines situations il y a l’anastasis

Question 17

Qu’est-ce que l’anastasis?

Answer 17

Lorsqu’on a un MOMP incomplet, les mitochondries saines peuvent servir à la survie de la cellule, mais les mitochondries ayant eu le MOMP relâchent tout de même le cytochrome C, donc les caspases sont activées et le endoG aussi ce qui permet d’aller induire des coupures dans l’ADN. La cellule va survivre à cause des healthy mitochondria, mais sera endomagée au niveau génomique ->promouvoit la carcinogénèse

Question 18

Qu’est-il important de s’assurer chez les agent pharmacologiques qui induisent l’apoptose/MOMP?

Answer 18

Important de s’assurer que les cellules meurent vraiment quand on donne les agents pcq sinon ça peut nuire encore plus (ANASTASIS)